下调SNAIL对TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的影响及作用机制的研究

发布时间：2018-01-07 17:29

  本文关键词：下调SNAIL对TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的影响及作用机制的研究　出处：《青岛大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:1)验证利用RNA干扰技术沉默SNAIL后可抑制肝癌细胞的生长。2)探讨沉默SNAIL对TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:筛选最有效的慢病毒载体携带sh RNA下调SNAIL及构建腺病毒载体携带TRAIL。分别利用定量PCR和western blotting技术来检测SNAIL以及TRAIL在m RNA水平和蛋白质水平的表达情况。并分别用MTT方法及Hoechst技术检测肝癌细胞的存活情况和凋亡情况。为明确沉默SNAIL如何增加TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的敏感性,利用western blotting技术检测在Hu H-7细胞系中p53,Bcl-x L,c IAP2,survivin和Raf-1蛋白的表达情况。之后通过抑制上述基因的表达,用Hoechst技术检测Hu H-7细胞系的凋亡情况。结果:以慢病毒作为载体携带sh RNA感染多种肝癌细胞系后能够持续并有效的抑制人肝癌细胞系中SNAIL的表达,而用腺病毒携带TRAIL感染多种肝癌细胞系后能够使TRAIL在肝癌细胞中持续并稳定的表达。SNAIL沉默能通过增加肝癌细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性导致细胞凋亡增加。此外,实验发现在Hu H-7细胞系中沉默SNAIL后p53蛋白表达上调,而Bcl-x L,c IAP2,survivin和Raf-1蛋白的表达是下调的。然而除了c IAP2蛋白以外,下调Bcl-x L,survivin和Raf-1任一蛋白都有利于促进TRAIL诱导肝癌细胞凋亡这一作用。结论:SNAIL沉默后可通过上调p53蛋白和调节NF-?B通路相关因子(Bcl-x L,survivin和Raf-1)来增强TRAIL诱导肝癌细胞凋亡。
[Abstract]:Objective : 1 ) To investigate the effect of silencing SNAIL on the apoptosis of human hepatocellular carcinoma cells ( HCC ) , and to investigate the effect of silencing SNAIL on the apoptosis of human hepatocellular carcinoma cells .

【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

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本文编号：1393558