ZNF545在肝癌中的表观遗传学改变及功能的研究

发布时间：2018-01-31 00:30

本文关键词： ZNF545 启动子区甲基化肝癌 5-氮杂-2’-脱氧胞苷　出处：《中国人民解放军医学院》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：背景肝癌是世界上常见的恶性肿瘤之一,其发病率在男性中居第五位,在女性中居第九位,2012年新增肝癌患者782000人。肝癌是仅次于肺癌的第二大肿瘤相关的致死原因,2012年约有746000人死于肝癌。肝癌的发病机制十分复杂,遗传学和表观遗传学的累积性改变在肝癌的发生和发展过程中发挥主要作用。许多抑癌基因的启动子区高甲基化促使其在肝癌中表达沉默。约有1/3的锌指蛋白(Zinc Finger Proteins, ZFPs)中含有KRAB (Kruppel-associated box)结构域,称为KRAB-ZFPs,其在细胞增殖、分化、凋亡及肿瘤形成过程中发挥重要的调控作用。ZNF545是KRAB-ZFPs家族的一员,位于19q13.1,该区域在多个肿瘤中频繁出现杂合性缺失。ZNF545基因在多种肿瘤中频发甲基化。已有研究发现ZNF545在胃癌及乳腺癌中的表达沉默与其启动子区甲基化相关,但在肝癌中ZNF545的表达调控及功能尚不清楚。目的探究ZNF545在肝癌中的表观遗传学改变及其生物学功能,为其在临床的应用和明确肝癌发病机制提供新的线索。方法九株肝癌细胞系(HBX344, SNU449, SMMC-7721, SNU182, SNU387, Huh7,HepG2, LM3 及 PLC-PRF-5)、一株永生化细胞系L02和62例原发性肝癌组织标本被用于本实验的研究。MSP技术、MTT实验、克隆形成、侵袭迁移实验、western-blot及流式细胞检测技术被应用于本研究中。结果ZNF545在肝癌细胞系SNU449、SMMC7721、L02、Huh7、HepG2以及LM3中表达缺失,其启动子区在这六株细胞系中呈完全甲基化;在细胞系SNU182和PLC-PRF-5中有少量表达,启动子区呈部分甲基化;在ZNF545高表达的细胞系HBX344和SNU387中,ZNF545的启动子区为非甲基化。在去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-AZA)诱导下,ZNF545在细胞系SNU449、SMMC7721、L02、Huh7、 HepG2和LM3中恢复表达,在SNU182和PLC-PRF-5细胞系中表达量增加。而在HBXF344和SNU387中,加药前后ZNF545的表达量无明显改变。在肝癌细胞系中ZNF545的表达缺失或下降受到其启动子区甲基化的调控。ZNF545的启动子区在肝癌组织中频发甲基化,甲基化率为53.2%(33/62)。恢复表达ZNF545可明显抑制SNU449和Huh7细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进细胞的凋亡。结论ZNF545在肝癌中频发甲基化。在肝癌细胞系中,ZNF545的表达受到启动子区甲基化的调控。ZNF545能够抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进细胞凋亡,在肝癌的发生和发展中可能发挥抑制作用。
[Abstract]:ZNF545 is one of the most common malignant tumors in the world . The incidence rate of ZNF545 is the fifth most common malignant tumor in the world . The expression of ZNF545 plays an important role in the genesis and development of liver cancer . Conclusion ZNF545 can inhibit the proliferation , migration and invasion ability of SNU449 and Huh7 cells and promote the apoptosis of cells . ZNF545 can inhibit the proliferation , migration and invasion ability of SNU449 and Huh7 cells and promote apoptosis .

【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

【共引文献】