吐根碱对肾癌786-O细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨

发布时间：2018-03-02 02:07

  本文关键词： 吐根碱 肾癌 PI3K-Akt信号通路 增殖 凋亡　出处：《南昌大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:本研究观察吐根碱(emetine)对人肾癌786-O细胞株增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制,为吐根碱应用于肾癌的临床研究提供理论依据。方法:1、体外培养肾癌786-O细胞株,选取对数生长期细胞,实验组加入不同浓度梯度的吐根碱分别干预24h、48h及72h,并设细胞对照组(仅加培养基),溶媒对照组(加0.16‰DMSO)。用MTT(噻唑蓝)检测药物对细胞增殖活性的影响。2、采用流式细胞仪检测786-O细胞的凋亡率。3、采用RT-PCR检测786-O细胞内PI3K和Akt m RN A的相对表达量。4、采用Western-blot测定786-O细胞内总Akt和p-Akt蛋白的相对表达量。结果:1、吐根碱对肾癌786-O细胞增殖有显著的抑制作用,25n M以上随药物浓度的增大、作用时间的延长,抑制作用随之增强,且呈剂量-时间依赖性(P0.01)。2、实验组细胞的凋亡率与对照组相比明显升高,差异具有显著统计学意义(P0.01),且随吐根碱剂量的增大而升高。3、实验组细胞内PI3K m RNA的表达水平与对照组相比明显减少(P0.01),且随吐根碱剂量的升高而减少。但Akt m RNA的表达水平无明显变化。差异无统计学意义(P0.05)。4、实验组细胞内p-Akt蛋白的表达水平与对照组相比明显减少(P0.01),且随吐根碱剂量的升高而减少。但总Akt蛋白的表达水平无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。结论:1、吐根碱在体外可以抑制肾癌786-O细胞的增殖,且呈剂量-时间依赖性。2、吐根碱在体外可以诱导肾癌786-O细胞凋亡。3、吐根碱可以下调PI3K m RNA和p-Akt蛋白的表达水平,但对Akt m RNA和总Akt蛋白的表达水平无明显影响。4、抑制PI3K-Akt信号通路活性,可能是吐根碱发挥抗肾癌作用的重要机制。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of Tucinine on proliferation and apoptosis of 786-O cell line of human renal cell carcinoma (RCC), and to explore its mechanism, and to provide a theoretical basis for the clinical study of RCC. Methods: RCC 786-O cell line was cultured in vitro. Select logarithmic growth cells, The experimental group was treated with different concentration of Tu root alkaloid for 24 h and 72 h, respectively. The cell control group (medium only and solvent control group) was added with 0.16 鈥，

本文编号：1554544