姜黄素对人肺腺癌细胞A549增殖、侵袭、迁移能力抑制以及HIF-1α表达的影响

发布时间：2018-03-04 03:06

  本文选题：姜黄　切入点：对人　出处：《西南医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:通过体外细胞实验研究姜黄素对人肺腺癌细胞株A549增殖、侵袭、迁移能力以及HIF-1α表达的影响,探讨姜黄素可能的抗肿瘤机制。方法:(1)用含10%胎牛血清的RPMI1640完全培养基培养A549细胞,在5%CO2、37℃恒温孵育箱进行培养。(2)取处于对数生长期的A549传代3-4次后,用于后续实验,按姜黄素刺激时间分为3个实验组:24小时、48小时、72小时3组。每组设2个对照组:空白对照组、DMSO对照组;按姜黄素浓度梯度分为5个实验组,5umol/L;10umol/L;20umol/L;40umol/L;80umol/L。实验结束后收集各组细胞,利用MMT法检测各组细胞的吸光度值,计算各组细胞生长抑制率情况。(3)取对数生长期的A549细胞接种于预铺基质胶的Transwell小室,再按设计的姜黄素刺激的时间梯度和浓度梯度干预细胞,于5%CO2、37℃恒温孵育箱进行培养。实验结束后染色并于显微镜下拍照,计数穿膜细胞数量,评估各组A549细胞侵袭能力。(4)取对数生长期的A549细胞接种于6孔板,待细胞融合度达到80%-90%,用200ul无菌枪头在6孔板中划痕,PBS冲洗2次,再按设计的姜黄素刺激的时间梯度和浓度梯度干预细胞,于5%CO2、37℃恒温孵育箱进行培养。实验结束后于显微镜下观察并拍照,使用Image-Pro Plus6.0图像分析软件比价各组细胞的迁移能力。(5)取对数生长期的A549细胞接种于96孔板,按设计的姜黄素刺激的时间梯度和浓度梯度干预细胞,实验结束后收集各组细胞上清液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组细胞中HIF-1α表达。结果:(1)MTT结果显示,与对照组比较,同一时间内不同浓度的姜黄素刺激A549后,对A549细胞增殖均有抑制作用,与姜黄素浓度有关,差异具有统计学意义(P0.05)。(2)Transwell侵袭实验结果显示,与对照组比较,同一时间内不同浓度的姜黄素刺激人肺腺癌细胞株A549后,各浓度组(除外5umol/L组)对A549细胞侵袭均有抑制作用,与姜黄素浓度有关,差异具有统计学意义(p0.05)。(3)细胞划痕实验结果显示,与对照组比较,同一时间内不同浓度的姜黄素刺激人肺腺癌细胞株a549后,各浓度组(除外5umol/l组)对a549细胞迁移均有抑制作用,与姜黄素浓度有关,差异具有统计学意义(p0.05)。(4)elisa结果显示:与对照组比较,同一时间内不同浓度的姜黄素刺激人肺腺癌细胞株后,对a549细胞hif-1α表达均有抑制作用,与姜黄素浓度有关,差异具有统计学意义(p0.05)。结论:(1)姜黄素可以抑制a549细胞生长。(2)姜黄素抑制a549细胞侵袭和迁移。(3)姜黄素抑制a549细胞可能与hif-1α表达有关。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of curcumin on proliferation, invasion, migration and HIF-1 伪 expression of human lung adenocarcinoma cell line A549 in vitro. To explore the possible antitumor mechanism of curcumin. Methods: A549 cells were cultured on RPMI1640 complete culture medium containing 10% fetal bovine serum. A549 cells were cultured in 5CO2 incubator at 37 鈩，

本文编号：1563845