O-GlcNAc糖基化修饰和Akt1对胃癌细胞体外增殖及侵袭力的影响

发布时间：2018-03-05 00:26

  本文选题：胃肿瘤　切入点：肿瘤侵润　出处：《重庆医学》2017年08期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨O-连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化修饰对胃癌细胞体外增殖及侵袭力的影响,并评价Akt1在O-GlcNAc糖基化促进胃癌细胞体外增殖及侵袭过程中的作用。方法通过使O-GlcNAc转移酶(OGT)过表达(过表达OGT组)或沉默表达(沉默OGT组)及使用O-GlcNAc水解酶(OGA)特异性抑制剂Thiamet-G(抑制剂组)下调O-GlcNAc水解酶活性(抑制剂组)等构建O-GlcNAc糖基化水平升高或降低的细胞模型;采用MTT法检测各组胃癌细胞增殖活力;软琼脂集落形成实验观察各组胃癌细胞集落形成;Transwell细胞迁移实验各组胃癌细胞体外迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组胃癌细胞Akt1活性;Thiamet-G处理Akt1表达沉默(沉默Akt1组)的胃癌细胞以评价Akt1在O-GlcNAc糖基化促进胃癌细胞侵袭中的作用;利用Thiamet-G处理Akt1过表达(过表达Akt1组)的胃癌细胞以进一步验证Akt1在O-GlcNAc糖基化调控胃癌细胞侵袭性过程中的作用。结果 O-GlcNAc糖基化水平升高可促进胃癌细胞增殖并显著提高细胞集落形成、体外迁移和侵袭的能力;Akt1活性被由O-GlcNAc糖基化水平升高所介导的Ser473磷酸化上调而激活;Thiamet-G诱导的细胞侵袭性被Akt1shRNA所抑制;Akt1高表达可进一步促进由Thiamet-G诱导的细胞侵袭性增强。结论 O-GlcNAc糖基化可部分通过Akt1途径增强胃癌细胞的体外增殖及侵袭力。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of O-GlcNAc-O-acetylglucosamine (O-GlcNAc) glycosylation modification on proliferation and invasiveness of gastric cancer cells in vitro. To evaluate the role of Akt1 in promoting the proliferation and invasion of gastric cancer cells in vitro by glycosylation of O-GlcNAc. Methods by over-expression of O-GlcNAc transferase (OGTG) (overexpression of OGT group) or silencing expression (silencing OGT group) and using O-GlcNAc hydrolase (OGA), O-GlcNAc hydrolase (OGA) was used specifically. Thiamet-GG (inhibitor group) down-regulated O-GlcNAc hydrolase activity (inhibitor group) to construct a cell model with increased or decreased glycosylation level of O-GlcNAc. The proliferative activity of gastric cancer cells in each group was detected by MTT assay, and the migration and invasion ability of gastric cancer cells in vitro was observed by soft Agar colony forming assay. Western blot was used to detect the Akt1 activity of gastric cancer cells in each group. Thiamet-G was used to treat gastric cancer cells with silenced Akt1 expression (silencing Akt1 group) in order to evaluate the role of Akt1 in promoting the invasion of gastric cancer cells by O-GlcNAc glycosylation. Gastric cancer cells with overexpression of Akt1 (overexpression of Akt1) were treated with Thiamet-G to further verify the role of Akt1 in the process of glycosylation of O-GlcNAc to regulate the invasion of gastric cancer cells. Results the increased glycosylation level of O-GlcNAc could promote the proliferation of gastric cancer cells and promote the proliferation of gastric cancer cells. Cell colony formation was significantly increased, The ability of migration and invasion in vitro. Akt1 activity is up-regulated by Ser473 phosphorylation mediated by increased glycosylation of O-GlcNAc, which activates the invasiveness induced by Thiamet-G, which is inhibited by Akt1shRNA. The overexpression of Akt1 may further promote the invasion induced by Thiamet-G. Conclusion O-GlcNAc glycosylation can partially enhance the proliferation and invasion of gastric cancer cells through Akt1 pathway.
【作者单位】： 南昌大学第二附属医院消化科;南昌大学第二附属医院核医学科;
【分类号】：R735.2

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