IDH1突变通过EMT促进胶质瘤恶性行为的初步研究

发布时间：2018-03-10 20:45

  本文选题：IDH　切入点：2羟基戊二酸　出处：《南方医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：胶质瘤(Glioma)作为最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,至今仍是人类未攻克的、并严重危害人类健康及生存质量的疾病。根据其组织病理学特征,世界卫生组织(WHO)也将中枢神经系统胶质瘤分为Ⅰ～Ⅳ级,而随着目前对胶质瘤研究的进一步深入,传统的组织病理学分类并不能解释许多特征性的临床现象,也与不断进展的分子基因水平研究显示出了在临床治疗及预后指导方面的不足,在有关胶质瘤的分子基因研究中,异柠檬酸脱氢酶基因(Isocitrate Dehydrogenase Gene,IDH)突变显示出了极大的临床指导意义,也值得更加深入的研究。IDH突变的研究由2008年Parsons等利用高通量测序技术而发现的;2009年Dang,L主导的研究提出,并实验证明IDH突变能够导致促癌代谢物2-轻基戊二酸(2-hydroxyglutamte,2-HG)的积聚,而高水平的2-HG能够在体内促进胶质瘤的发生和恶性进展。多数研究者对IDH突变的研究多集中在293T细胞等细胞系及胶质母细胞瘤细胞系,临床数据提示IDH突变较多发生在较低级别胶质瘤(80%),加之细胞系与临床的距离,本研究应用较低级别胶质瘤原代细胞的研究显得颇有意义。IDH基因产生异柠檬酸脱氢酶(Isocitrate Dehydrogenase),在生理水平下根据分布的不同部位可以分为IDH1、IDH2和IDH3三个亚型,IDH1位于细胞质,IDH2和IDH3位于线粒体,其功能基本一致,因此IDH1即能反应IDH的特征且更具有代表性。2-HG作为IDH突变产生的促癌代谢物,由于其与IDH突变的紧密关系也成为了被研究的重要靶点。已有的研究发现IDH1突变后,细胞基因组和组蛋白发生超甲基化,因而细胞分化受到抑制,还有研究证明IDH1突变以及外源性2-HG的作用使上皮细胞发生间质变,而这些都未曾在胶质瘤,特别是较低级别胶质瘤中得到验证,而且IDH1突变对肿瘤的促进作用也无法解释IDH突变型胶质瘤的良好预后,甚至与之相背。本次研究目的在探讨异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)及其代谢产物2-羟基戊二酸(2-hydroxyglutarate,2-HG)对胶质瘤增殖、迁移等恶性行为的作用机制。已有研究证明在正常乳腺上皮细胞以及大肠癌细胞中,IDH突变能够通过上皮细胞间质变(EMT)影响肿瘤细胞的形态和功能,而在胶质瘤中尚未有研究证明这一机制。本文所示研究通过进行原代和细胞系的细胞培养得到实验对象,细胞增殖实验(CCK-8)实验检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,聚合酶链式反应(PCR)实验检测上皮细胞间质转化相关基因的mRNA表达。实验证明,IDH突变型胶质瘤细胞以及外源性加入2-HG的胶质母细胞瘤细胞形态会发生间质样改变,随2-HG浓度的升高作用愈明显;IDH突变促进胶质瘤细胞的增殖和迁移能力,下调上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达,上调了间质细胞标志物波形蛋白(Vimentin)和β-链蛋白(β-catenin)的表达。因此我们可以认为2-HG能够促进IDH野生型胶质母细胞瘤的增殖、迁移。
[Abstract]:Glioma (Glioma) is the most common malignant tumor in the central nervous system. It is still a disease that has not been solved by human beings and seriously endangers human health and quality of life. According to its histopathological features, Glioma is the most common malignant tumor in the central nervous system. The World Health Organization (WHO) also classifies gliomas in the central nervous system as grade 鈪，

本文编号：1595005