乳酸菌培养上清液下调Piwil2基因增强三阴性乳腺癌细胞对顺铂的敏感性

发布时间：2018-03-11 12:55

  本文选题：乳酸菌培养上清液　切入点：乳腺肿瘤　出处：《第三军医大学学报》2017年12期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨乳酸菌培养上清液(lactobacilli supernatants,LS)处理乳腺癌细胞对顺铂(cisplatin,DDP)敏感性的影响及其机制。方法采用CCK-8和Western blot检测不同浓度DDP(0、1、2、3、4、5μg/m L)和LS(体积分数分别为1%、5%、10%、20%)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和Piwil2基因表达的影响;瞬时转染Piwil2 siRNA沉默MDA-MB-231细胞中Piwil2基因表达,Western blot检测其沉默效果,CCK-8检测Piwil2基因沉默后对MDA-MB-231细胞增殖的影响;2μg/m L DDP联合不同浓度LS(体积分数分别为1%、5%、10%、20%)作用MDA-MB-231细胞,观察细胞增殖抑制效应和Piwil2蛋白表达的改变。结果高浓度DDP(≥3μg/m L)可抑制MDA-MB-231细胞的增殖(P0.05),而低浓度DDP(≤2μg/m L)不能有效抑制细胞增殖;DDP以剂量依赖性方式上调Piwil2蛋白的表达;siRNA沉默Piwil2表达可恢复2μg/m L DDP对细胞增殖的抑制。与对照组(乳酸菌培养基,MRS)比较,LS以剂量依赖性方式下调Piwil2蛋白的表达,但并不影响细胞的增殖;与单用2μg/m L DDP比较,2μg/m L DDP联合20%LS处理可显著下调Piwil2蛋白的表达并抑制细胞增殖(P0.05)。结论三阴性乳腺癌细胞中Piwil2的高表达可导致细胞对顺铂敏感性的降低,乳酸菌培养上清液可通过下调Piwil2基因的表达增强三阴性乳腺癌细胞对顺铂的敏感性。
[Abstract]:Objective to explore the culture supernatant of lactic acid bacteria (lactobacilli supernatants, LS) treatment of breast cancer cells to cisplatin (cisplatin, DDP) sensitivity and its mechanism. Methods CCK-8 and Western blot to detect different concentrations of DDP (0,1,2,3,4,5 g/m L) and LS (volume fraction respectively 1%, 5%, 10%, 20%) effect on the expression of the proliferation and Piwil2 three negative breast cancer cell MDA-MB-231 gene; expression of Piwil2 transfected Piwil2 silence siRNA gene in MDA-MB-231 cells, Western blot to detect the silencing effect on the proliferation of MDA-MB-231 cell CCK-8 detection after Piwil2 gene silencing; 2 g/m L DDP combined with different concentrations of LS (volume fraction of 1%, 10%, 5% respectively. 20%) MDA-MB-231 cells, observe the inhibitory effect of cell proliferation and the expression of Piwil2 protein was observed. Results the high concentration of DDP (3 g/m L) inhibited MDA-MB-231 cell proliferation (P0.05), while low concentrations of DDP (less than 2 g/m L) can effectively inhibit cell proliferation; DDP expression in a dose-dependent manner up-regulated Piwil2 protein expression; siRNA silencing of Piwil2 2 g/m L DDP recovery inhibition on cell proliferation. And the control group (lactic acid bacteria culture medium, MRS, LS) expression of Piwil2 protein in a dose dependent manner, but does not affect cell proliferation; with 2 g/m L DDP, 2 g/m L DDP combined with 20%LS treatment can significantly reduce Piwil2 protein expression and inhibit cell proliferation (P0.05). Conclusion the high expression of Piwil2 three negative breast cancer cells can cause cells to cisplatin sensitivity decreased, lactic acid bacteria culture supernatant can enhance the sensitivity of cells to cisplatin three negative breast cancer by down regulating the expression of Piwil2.

【作者单位】： 第三军医大学新桥医院普通外科;第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(31571459,81272908)~~
【分类号】：R737.9

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