PRDX2对结直肠癌血管生成拟态的影响及其机制研究

发布时间：2018-03-13 10:55

  本文选题：PRDX2　切入点：血管生成拟态　出处：《重庆医科大学》2016年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：第一部分结直肠癌组织中PRDX2与血管生成拟态的表达及临床意义目的:探讨结直肠癌组织中PRDX2与血管生成拟态及相关因子的表达及其临床意义。方法:1.免疫组织化学法检测70例结直肠癌组织及癌旁正常组织PRDX2与VM相关因子VEGFR2、MMP-2、LN-5γ2蛋白的表达,统计学分析PRDX2与VEGFR2、MMP-2、LN-5γ2蛋白表达的相关性。2.统计学分析PRDX2、VEGFR2、MMP-2及LN-5γ2蛋白表达与患者临床病理特征之间的相关性。3.CD34/PAS免疫组化双重染色法检测70例结直肠癌组织VM的表达,统计学分析VM形成与PRDX2蛋白表达的相关性。结果:1.PRDX2、VEGFR2、MMP-2及LN-5γ2蛋白表达在结直肠癌组织中的表达显著的高于癌旁正常组织(P0.05);PRDX2蛋白表达与VEGFR2、MMP-2及LN-5γ2蛋白表达成正相关(P0.05)。2.PRDX2、VEGFR2、MMP-2及LN-5γ2蛋白的表达与结直肠癌的临床TNM分期及淋巴结转移有相关(P0.05);MMP-2和LN-5γ2蛋白的表达与肿瘤分化程度有相关(P0.05),PRDX2和VEGFR2蛋白的表达与肿瘤分化程度无明显相关(P0.05);PRDX2、VEGFR2、MMP-2及LN-5γ2蛋白表达与患者的年龄、性别和肿瘤大小程度均无明显相关(P0.05)。3.70例患者的结直肠癌组织中16例VM阳性表达,VM阳性表达率为22.86%(16/70),PRDX2蛋白表达与VM表达成正相关(P0.05)。结论:结直肠癌组织中PRDX2与VM相关因子VEGFR2、MMP-2及LN-5γ2蛋白表达高于癌旁正常组织,且PRDX2与VM相关因子蛋白表达间有相关性;PRDX2、VEGFR2、MMP-2及LN-5γ2蛋白表达与结肠癌患者不良的临床病理特征有相关性;结直肠癌组织中PRDX2蛋白表达与VM的形成有关。第二部分结直肠癌细胞中PRDX2对血管生成拟态的影响及其意义目的:研究PRDX2对结直肠癌细胞VM形成的影响及其意义。方法:1.采用细胞体外三维培养检测结肠癌细胞VM形成能力。2.PRDX2干扰慢病毒及阴性对照慢病毒分别转染HCT116细胞后,使用Real-Time PCR和WB检测PRDX2 m RNA和蛋白表达的干扰效果。3.外源性VEGF诱导以模拟肿瘤微环境,细胞体外三维培养检测PRDX2干扰慢病毒组及阴性对照组HCT116细胞VM形成变化情况。4.外源性VEGF诱导后采用Transwell小室迁移及侵袭实验检测PRDX2干扰慢病毒组及阴性对照组HCT116细胞迁移及侵袭变化情况。5.使用Real-Time PCR及WB法检测干扰PRDX2后对HCT116细胞VM形成相关因子表达的影响。6.使用裸鼠皮下移植瘤模型,观察干扰PRDX2后HCT116细胞皮下移植瘤生长变化情况;使用裸鼠肺转移瘤模型,观察干扰PRDX2后HCT116细胞肺转移变化情况。结果:1.与人脐静脉内皮细胞HUVEC对照比较,三株人结肠癌细胞株中只有分化程度较低的HCT116细胞株能够形成VM管样结构。2.同阴性对照组、亲本空白对照组分别比较,PRDX2干扰组HCT116细胞PRDX2 m RNA和蛋白表达的水平均明显下降(P0.05)。3.VEGF诱导后HCT116细胞VM形成能力增强(P0.05);PRDX2干扰后HCT116细胞VM的形成能力明显下降(P0.05)。4.VEGF诱导后HCT116细胞迁移及侵袭能力增强(P0.05);PRDX2干扰后HCT116细胞迁移及侵袭明显下降(P0.05)。5.干扰PRDX2后HCT116细胞VEGFR2蛋白表达水平无明显变化(P0.05);p-VEGFR2蛋白表达水平随着VEGF诱导时间均逐渐增高,PRDX2干扰后p-VEGFR2蛋白表达水平与相应的对照组比较明显降低(P0.05)。VEGF诱导后MMP-2、MMP-9及LN-5γ2的m RNA及蛋白的表达水平增强(P0.05),PRDX2干扰慢病毒组MMP-2、MMP-9及LN-5γ2的m RNA及蛋白表达水平与相应阴性对照组比较明显减弱(P0.05)。6.PRDX2干扰后裸鼠皮下移植瘤平均体积(0.82±0.11cm3)和肺转移瘤的数目(27.13±3.55个)分别低于阴性对照组皮下移植瘤平均体积(1.43±0.17 cm3)和肺转移瘤的数目(43.62±5.81个)(P0.05),干扰PRDX2能抑制结肠癌细胞生长与转移。结论:PRDX2能促进结直肠癌细胞的VM形成,结直肠癌细胞迁移、侵袭力随之增强,进而增强了结直肠癌细胞的生长与转移能力。第三部分PRDX2通过ERK1/2通路调控结直肠癌血管生成拟态的机制研究目的:研究ERK1/2通路在PRDX2调控结直肠癌细胞VM形成中的作用及机制。方法:1.外源性VEGF诱导,使用WB检测干扰PRDX2对HCT116细胞中ERK1/2与p-ERK1/2蛋白表达变化情况的影响。2.使用ERK1/2通路抑制剂PD98059干预,外源性VEGF诱导后细胞体外三维培养检测HCT116细胞VM形成变化情况。3.使用ERK1/2通路抑制剂PD98059干预,外源性VEGF诱导,使用Transwell小室迁移实验、侵袭实验,检测HCT116细胞迁移及侵袭力变化情况。4.使用Real-Time PCR及WB法,检测ERK1/2通路抑制剂PD98059干预后HCT116细胞VM相关的因子m RNA及蛋白表达的变化情况。5.使用免疫组化法检测动物皮下移植瘤中干扰PRDX2后VM形成相关因子MMP-2、MMP-9及LN-5γ2蛋白表达的变化情况。结果:1.干扰PRDX2后HCT116细胞中ERK1/2蛋白的表达水平无明显变异(P0.05);p-ERK1/2蛋白表达水平随着VEGF诱导时间均逐渐增高,PRDX2干扰后p-ERK1/2蛋白表达水平较阴性对照组比较明显降低(P0.05),PRDX2对结直肠癌VM形成的调控可能与ERK1/2通路有关。2.ERK1/2通路抑制剂PD98059干预后,与相应阴性对照组比较,HCT116细胞后VM的形成能力明显的减弱(P0.05)。3.ERK1/2通路抑制剂PD98059干预后,与相应阴性对照组比较,HCT116后细胞迁移及侵袭力明显的减弱(P0.05)。4.ERK1/2通路抑制剂PD98059干预后,与相应阴性对照组比较,VM形成相关因子MMP-2、MMP-9及LN-5γ2的m RNA及蛋白表达明显的减弱(P0.05)。5.干扰PRDX2后裸鼠皮下移植瘤组织中PRDX2、MMP-2、MMP-9及LN-5γ2的表达与对照组相比较明显减弱(P0.05)。结论:PRDX2可能通过激活ERK1/2通路促进结直肠癌VM形成;干扰PRDX2能抑制结直肠癌ERK1/2通路激活,降低VM形成相关因子的表达,从而抑制VM形成及结直癌细胞的生长与转移。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.34

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 王汉涛 ,Kraemer M.;随访危险因素分析:复发和非复发结直肠癌的比较[J];中国实用外科杂志;2001年12期

2 苏森;患结直肠癌妇女后代癌症的危险性增加[J];中国肿瘤;2001年06期

3 汪一虹;在确定的法国人群中年龄<45岁结直肠癌病人与≥45岁结直肠癌病人的比较[J];国外医学(消化系疾病分册);2002年01期

4 李会晨;结直肠癌解剖位置的连续性右向迁移[J];国外医学.外科学分册;2003年03期

5 李志霞;结直肠癌复发及转移的综合治疗[J];中华胃肠外科杂志;2003年06期

6 何建苗,蒲永东,曹志宇,刘卫平;老年人结直肠癌186例的外科治疗[J];中华胃肠外科杂志;2003年05期

7 保红平,方登华,高瑞岗,李奎,张雪松,刘天锡;青年人结直肠癌临床病理分析[J];中国普外基础与临床杂志;2004年01期

8 章江;;监测结直肠癌非常必要[J];国外医学情报;2004年04期

9 郜文秀,杨艳芳,梁小波,李耀平,李佩珍;细胞粘附分子变异体在结直肠癌中的表达及预后[J];中国公共卫生;2005年07期

10 Nozawa T. ,Enomoto T. ,Koshida Y. ,M. Kuranami,王志宇;人结直肠癌黏膜下血小板源性内皮细胞生长因子特异性增强表达[J];世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册);2005年06期

相关会议论文 前10条

1 郑树;;结直肠癌预后与转移相关因素分析[A];2005年浙江省肿瘤学术会议全国大肠癌转移与复发的诊治研讨会学术论文集[C];2005年

2 邹一峰;吴小剑;兰平;;结直肠癌免疫治疗新进展[A];第十一次全国中西医结合大肠肛门病学术会议论文汇编[C];2006年

3 郁宝铭;;结直肠癌治疗的进展及其新理念[A];2006年浙江省肛肠外科学术年会论文汇编[C];2006年

4 王锡山;;结直肠癌治疗的困惑之我见[A];第九届全国肿瘤转移学术大会暨2011年黑龙江省医学会肿瘤学年会报告集[C];2011年

5 秦建平;;未病思想中的结直肠癌预防[A];贵州省中西医结合学会肛肠学会第五届学术交流会暨新技术新进展学习班论文汇编[C];2012年

6 高文庆;陈会林;童蕾;陆松春;;老年梗阻性结直肠癌诊疗体会(附42例报告)[A];首届“之江中医药论坛”暨浙江省中医药学会2011年学术年会论文集[C];2011年

7 王启远;周长江;高云飞;徐岩;李坤;;血管内皮生长因子与结直肠癌[A];《中华急诊医学杂志》第八届组稿会暨急诊医学首届青年论坛论文汇编[C];2009年

8 巴一;;结直肠癌靶向治疗进展[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年

9 何超;朱洪波;;结直肠癌的生物治疗[A];2009年浙江省肿瘤外科学术年会暨肿瘤外科规范化诊治学习班论文汇编[C];2009年

10 万德森;;进一步提高结直肠癌疗效的思考[A];2009年浙江省肿瘤学术年会暨肿瘤诊治新进展学习班论文汇编[C];2009年

相关重要报纸文章 前10条

1 中华医学会肿瘤学分会主任委员 顾晋;分期不精确 致结直肠癌过度治疗[N];健康报;2012年

2 本报记者 贾岩;跨线治疗成结直肠癌最后防线[N];医药经济报;2012年

3 本报记者 贾岩;跨线治疗构筑结直肠癌最后防线[N];医药经济报;2012年

4 本报记者 林琳;结直肠癌：可以治愈的癌症[N];医药经济报;2013年

5 记者 张妍　通讯员 熊静帆 朱品磊;深圳结直肠癌发病高于全国[N];深圳商报;2013年

6 本报记者 孙刚;预防结直肠癌：请管住嘴[N];解放日报;2013年

7 上海市中医医院肿瘤科 侯凤刚 副主任医师;中医药在结直肠癌治疗中的作用和特色[N];上海中医药报;2014年

8 李华虹 孙瑜淼 记者 李丽云 实习生 阴浩;专家呼吁：结直肠癌应多学科规范化诊疗[N];科技日报;2014年

9 ;降低结直肠癌复发有新疗法[N];人民日报;2003年

10 韩自力;新化疗方案可高效治疗结直肠癌[N];健康报;2007年

相关博士学位论文 前10条

1 陈涛;MicroRNA-31/FIH-1调控关系在结直肠癌发生发展中的作用及其机制研究[D];复旦大学;2014年

2 任翡;MYBL2基因在结直肠癌的表达及机制的初步探讨[D];复旦大学;2014年

3 吴朋;结直肠癌中microRNA-615基因甲基化及其生物学特性探究[D];复旦大学;2014年

4 李泽武;MicroRNA-203靶向ZNF217基因调控结直肠癌生物学行为的研究[D];山东大学;2015年

5 徐兴远;低分子肝素对结直肠癌患者预后的影响及相关机制的研究[D];复旦大学;2014年

6 梁洪亮;miR-454在结直肠癌中的功能及其作用机制[D];山东大学;2015年

7 金鹏;MMR蛋白在雌激素致结肠癌细胞凋亡中的作用及SEPT9检测结直肠癌的研究[D];第三军医大学;2015年

8 珠珠;云南省Lynch综合征候选基因标志物研究[D];昆明医科大学;2014年

9 周智航;SEMA3F通过下调ASCL2-CXCR4轴而抑制结直肠癌转移的分子机制[D];第三军医大学;2015年

10 王林;MiRNA-300对结直肠癌肿瘤侵袭和增殖的影响及其调控机制的初步研究[D];第三军医大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 颜斐斐;术后结直肠癌患者癌因性疲乏与影响因素的研究[D];南方医科大学;2009年

2 李斌;结直肠癌患者就诊延迟分析[D];中南大学;2009年

3 叶建杰;慈溪市结直肠癌危险因素病例对照研究[D];浙江大学;2008年

4 赵波;结直肠癌危险因素及临床流行病学特征的调查与分析[D];广西医科大学;2013年

5 宋艳敏;PAQR3基因甲基化水平与结直肠癌关系的研究[D];河北大学;2015年

6 黎江;Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及其与Twist的相关性研究[D];遵义医学院;2015年

7 杨文婷;PD-L1、SIRT1在结直肠癌组织中的表达及意义[D];福建医科大学;2015年

8 罗佳;二代测序分析散发性结直肠癌和息肉的基因突变[D];福建医科大学;2015年

9 崔慧鹏;精氨酸琥珀酸合成酶（ASS1）高表达与结直肠癌恶性进展的相关性研究[D];中国人民解放军医学院;2015年

10 崔娟娟;p53和nm23在结直肠癌中的表达及其临床意义[D];河北联合大学;2014年

，

本文编号：1606080