泮托拉唑对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2018-03-20 06:21

  本文选题：泮托拉唑　切入点：肝细胞肝癌　出处：《遵义医学院》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:质子泵抑制剂(PPI)在临床上主要用于治疗胃酸相关性疾病,发现它也可以作为细胞毒性药物进行抗多种肿瘤的治疗。然而,PPI对肝癌的作用和相关机制研究甚少。本课题旨在探索泮托拉唑(PPZ)对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制,希望能够扩展PPZ的临床适用范围到肝癌治疗。方法:(1)运用CCK-8(Cell Counting Kit-8)细胞增殖实验技术检测PPZ对肝癌细胞Huh7、SK-Hep1、Hep G2、PLC/PRF/5增殖行为的影响;(2)运用平板集落形成实验检测PPZ对SK-Hep-1细胞集落形成能力的影响;(3)运用生长曲线检测PPZ对SK-Hep-1生长活力的影响;(4)运用Edu增殖实验检测泮托拉唑对SK-Hep1、Huh7 S期中DNA合成情况的影响;(5)运用流式Annexin V-FITC/PI双染法检测PPZ对SK-Hep-1和Huh7凋亡的影响;(6)运用TUNEL实验检测PPZ对SK-Hep-1和Huh7晚期凋亡的影响;(7)运用流式细胞周期实验技术检测PPZ对SK-Hep-1和Huh7细胞周期的影响;(8)PPZ作用SK-Hep1和Huh7 24h后,运用基因芯片技术筛选出改变明显的增殖和细胞周期相关基因,并用q PCR技术进行再次验证PPZ作用SK-Hep1后这些基因在m RNA水平的表达是否和基因芯片结果一致。(9)进一步运用Western-Blot检测PPZ作用SK-Hep1后,以上筛选出的相关周期基因在蛋白水平的表达情况。结果:(1)CCK-8结果显示不同浓度的PPZ(20、40、80、160、320、640μmol/L)作用于多种肝癌细胞一定时间(24h、48h、72h)后,与对照组相比,PPZ呈剂量和时间依赖性地抑制各种肝癌细胞的增殖(p0.05)。(2)平板集落形成实验显示,不同浓度的PPZ(20、40、80、160μmol/L)作用肝癌细胞SK-Hep-1 9天后,随着PPZ浓度的增加,肝癌细胞SK-Hep-1的集落数目和面积明显地降低(p0.01)。(3)生长曲线实验发现不同浓度的PPZ(20、40、80、160μmol/L)作用SK-Hep-1 7天后,与对照组相比,PPZ呈剂量和时间依赖性地抑制SK-Hep-1生长(p0.05)。(4)Edu实验显示,与对照组相比,不同浓度的PPZ(20、40、80、160μmol/L)作用SK-Hep-1和Huh7 48h后,可以明显地抑制肝癌细胞在S期的DNA合成(p0.05)。(5)流式Annexin V-FITC/PI双染法结果显示,不同浓度的PPZ(160、320μmol/L)作用SK-Hep-1和Huh7 24h后,可以明显地诱导肝癌细胞的早期和晚期凋亡(p0.05)。(6)TUNEL实验发现不同浓度的PPZ(160、320μmol/L)作用SK-Hep-1和Huh7 48h后,能够明显地诱导肝癌细胞晚期凋亡;(7)流式细胞周期实验发现,不同浓度的PPZ(160、320μmol/L)作用SK-Hep-1和Huh7 24h后,SK-Hep-1和Huh7细胞周期明显地被阻滞在G2/M期且S期细胞百分比明显减少(p0.05);(8)基因芯片筛选并经q PCR验证发现,PPZ作用SK-Hep-1和Huh7 24h后,增殖和细胞周期相关基因PNCA、MKI67、CDK1、CDK2、CDC25C、CYCLINA2、CYCLINE2在m RNA水平表达明显下调(p0.05);(9)Western-Blot发现,PPZ作用SK-Hep-1和Huh7 24h后,细胞增殖和周期相关基因CDK1、CDK2、CDC25C、CYCLINA2、CYCLINE2在蛋白表达水平表达下调,凋亡相关的蛋白Procaspase-9表达下降,活化的caspase-9表达增加(p0.05)。结论:PPZ能够明显地抑制肝癌细胞增殖和诱导凋亡,可能与下调增殖和细胞周期相关基因PNCA、MKI67、CDK1、CDK2、CDC25C、CYCLINA2、CYCLINE2的表达,进而使得细胞周期被阻滞在G2/M期有关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.7

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 蒋小玲,邓欣,聂广,杨大国;剔毒护肝方及其拆方对人肝癌细胞增殖及端粒酶活性的影响[J];中西医结合肝病杂志;2004年02期

2 孙宏伟;沈锋;吴孟超;;瞬时受体势C可能存在介导肝癌细胞增殖的作用[J];肿瘤;2006年04期

3 田文礼;赵亚周;彭文君;;蜂胶对肝癌细胞增殖及其脂肪沉积的影响[J];食品科学;2012年09期

4 杨春;陈文;钟晓琳;王忠琼;陈枫;夏纪毅;;丙型肝炎病毒非结构蛋白4B对肝癌细胞增殖的影响[J];山东医药;2012年32期

5 王静;宗瑞强;莫艳波;田国华;郝礼森;张国志;;无花果浆液对肝癌细胞增殖抑制作用研究[J];中国煤炭工业医学杂志;2014年04期

6 康九红,魏亚明,郑荣梁;二乙基二硫代氨基甲酸钠对人肝癌细胞增殖、再分化与凋亡的作用(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2001年09期

7 胡辉,荆绪斌,蔡先彬;过氧化氢在乙醇抑制肝癌细胞增殖中的作用[J];临床消化病杂志;2005年03期

8 史冬梅;马天乐;涂水平;谭继宏;乔敏敏;章永平;江石湖;;X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1抑制肝癌细胞增殖和诱导凋亡的实验研究[J];中华消化杂志;2006年10期

9 赵新;;儿茶素抑制肝癌细胞增殖、诱导凋亡作用研究[J];中国现代医学杂志;2012年10期

10 王迎春;刘炎芳;邢兰花;杨旭;李小欢;;曲古抑菌素A对人肝癌细胞增殖凋亡影响及其机制的探讨[J];中华肿瘤防治杂志;2013年06期

相关会议论文 前10条

1 徐艳敏;钱程;;低浓度阿霉素促进肝癌细胞增殖[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年

2 田晶;周士胜;陶凌;董玲;杨安钢;;尼氟灭酸对肝癌细胞增殖的影响[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年

3 秦敏;白文元;谭莉莉;;白藜芦醇抑制人肝癌细胞增殖与促进其凋亡的作用[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

4 钟宁;董明;程宝泉;张尚忠;李延青;;大蒜素和阿霉素对裸小鼠皮下移植肝癌细胞增殖、分化和凋亡影响的实验研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

5 陶立平;陶佳南;陶富山;;宽带中远红外线辐射对肝癌细胞增殖细胞核抗原的研究[A];第八届全国红外加热暨红外医学发展研讨会论文及论文摘要集[C];2001年

6 刘珊林;;抗氧化干预对肿瘤生长和肝癌细胞增殖的抑制作用研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展（下册）[C];1999年

7 高金亭;郑树森;梁廷波;吴丽花;余松峰;金晶;吴李鸣;徐世国;;环孢素A和他克莫司联合表阿霉素对肝癌细胞增殖、凋亡的影响[A];2005年浙江省器官移植学术会议论文汇编[C];2005年

8 高金亭;郑树森;梁廷波;吴丽花;余松峰;金晶;吴李鸣;徐世国;;环孢素A和他克莫司联合表阿霉素对肝癌细胞增殖、凋亡的影响[A];2005年浙江省外科学术会议论文汇编[C];2005年

9 任开环;邵荣光;;MR-1基因功能研究:促进肝癌细胞增殖、粘附和迁移[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年

10 巴一;吴雄志;谢广茹;陈丹;王伟;;守宫硫酸多糖对人肝癌细胞增殖与分化的影响[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年

相关重要报纸文章 前2条

1 何德功;日发现致肠癌和肝癌细胞增殖的酶[N];中国劳动保障报;2004年

2 ;乙型肝炎病毒x蛋白对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响[N];中国医药报;2003年

相关博士学位论文 前10条

1 杨思俊;癌基因RMP与抑癌基因PTEN的相互拮抗作用及其对肝癌细胞增殖的影响[D];苏州大学;2015年

2 王贵明;SOX18基因对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭作用的研究[D];山西医科大学;2016年

3 崔静;ARK5在肝癌组织中的表达及对肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响[D];郑州大学;2016年

4 黄健;1,25-二羟维生素D3下调HDAC2抑制肝癌细胞增殖及诱导凋亡的作用及机制研究[D];贵州医科大学;2016年

5 周彦明;曲格列酮抑制肝癌细胞增殖及其作用机制的实验研究[D];第二军医大学;2007年

6 崔越宏;17AAG对肝癌细胞增殖转移的抑制及其机制的研究[D];复旦大学;2011年

7 魏双;Ku80分子对人肝癌细胞增殖的影响及其机制的研究[D];华中科技大学;2011年

8 孙慧燕;Hsa-miR-486-5p抑制肝癌细胞增殖及侵袭的作用及机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年

9 路欣;HSD17B4促进肝癌细胞增殖及其机制的研究[D];河北医科大学;2015年

10 王琦;乙型肝炎病毒X蛋白突变体致癌作用及其信号传导途径的研究[D];南开大学;2010年

相关硕士学位论文 前10条

1 杨海洋;钙通道蛋白STIM1&Orai1对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭作用的初步研究[D];福建医科大学;2015年

2 彭云云;NLRC5靶向Wnt/β-catenin信号通路调控肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的功能及机制研究[D];安徽医科大学;2015年

3 黄道斌;葡萄糖调节蛋白78对肝癌细胞增殖、自噬及体外血管生成的影响[D];南昌大学医学院;2015年

4 周勇;TLR4调控肿瘤增殖相关蛋白CDK4、CDK6对HBV相关性肝癌细胞增殖的作用[D];南昌大学医学院;2015年

5 严晓娣;shRNA干预IGF-I受体活化对肝癌细胞增殖抑制及其分子机制研究[D];南通大学;2014年

6 吴国慧;Wnt10b基因失活对人肝癌细胞增殖、周期、凋亡、迁移及侵袭的影响[D];桂林医学院;2015年

7 代航;MicroRNA-30a-5p对肝癌细胞增殖凋亡及侵袭转移的实验研究[D];重庆医科大学;2015年

8 肖泽林;乙肝病毒X蛋白通过SPHK1促进肝癌细胞增殖的作用及其分子机制的研究[D];南开大学;2015年

9 武承凤;MIF通过ERK信号通路对肝癌细胞增殖的实验研究[D];甘肃中医药大学;2016年

10 王晓锋;Wdr5通过Wnt通路促进肝癌细胞增殖的研究[D];兰州大学;2016年

，

本文编号：1637863