光动力疗法联合氟尿嘧啶植入剂治疗H22肝癌小鼠移植瘤的实验研究

发布时间：2018-03-20 09:34

本文选题：肝癌　切入点：光动力　出处：《河北医科大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:肝癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一。肝癌在全球的发病率呈上升趋势,根据世界卫生组织发表的2014版《世界癌症报告》中显示,2012年全世界约一半的新增肝癌病例出现在中国,中国肝癌的新增病例和死亡人数均居世界首位。因此,肝癌的治疗显得尤为重要。虽然现有治疗手段在一定程度上能够使肝癌患者获益,但这些传统的治疗方法仍具有局限性。光动力疗法(Photodynamic Therapy,PDT)是20世纪80年代末问世的一种用于疾病的诊断和治疗的技术[1]。光动力疗法以其适应症广、创伤小、毒性低、靶向性、可重复治疗、可姑息治疗、可协同手术提高疗效、可消灭隐匿性病灶、可保护容貌及重要器官功能、恢复迅速等优点在肿瘤及非肿瘤疾病治疗领域迅速发展。光动力疗法现已应用于肝癌的治疗,尽管技术尚未成熟,但发展前景广阔。氟尿嘧啶植入剂,商品名中人氟安(Sinofuan),是一种新型的植入用缓释制剂,以氟尿嘧啶为主原料,由生物组织相容性较好的医用高分子材料作骨架制成新型缓释植入剂[2]。药物释放局部药物浓度可达静脉用药的10倍以上,且有效药物浓度可持续240h以上。中人氟安以其独特的给药方式提高了肿瘤组织局部药物浓度,且延长了有效药物浓度持续时间,实现了抗肿瘤疗效强、毒副作用小的理想用药模式[3-4]。本实验采用昆明小鼠H22肝癌移植瘤模型为研究对象,研究氟尿嘧啶植入剂局部植入治疗与光动力治疗单独应用及联合应用对H22荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用,以期提高肝癌的局部控制率,延长生存期,为光动力治疗联合局部化疗治疗肝癌在临床上的应用提供理论依据。方法:1建立昆明小鼠H22肝癌移植瘤模型及实验分组:按随机数字表法分为:对照组(C组)、氟尿嘧啶植入剂组(SF组)、光动力治疗组(PDT组)、联合治疗组(PDT+SF组)。其中C组不予任何处理;SF组瘤内植入氟尿嘧啶植入剂100mg/Kg;PDT组给予PDT;PDT+SF组给予瘤内植入氟尿嘧啶植入剂100mg/kg及PDT。2隔日一次测量小鼠移植瘤大小,计算瘤体积及肿瘤生长抑制率,并绘制生长曲线,观察小鼠治疗前后的生长情况及体重变化。3处理后第14天处死部分小鼠后剥离肿瘤称瘤重,计算肿瘤抑制率。取出小鼠脾脏称重,计算小鼠脾脏指数,分析各处理方法对小鼠免疫力的影响。4剩余小鼠观察生存时间及生存质量,绘制生存曲线,计算生命延长率。5镜下观察小鼠移植瘤HE染色病理组织切片情况。6流式细胞仪检测各组瘤组织凋亡情况及细胞周期分布情况。7统计分析:采用SPSS19.0软件进行数据统计分析。计量资料用x±s表示。各组指标均数比较采用单因素方差分析检验,各组荷瘤小鼠生存分析采用Kaplan-Meier法。各检验均以P0.05为有统计学意义。结果:1昆明小鼠H22移植瘤种植成瘤率100%,操作简单,具有可重复性。2小鼠体重变化情况:处理前各组小鼠体重经方差分析无统计学差异(P0.05)。处理后第14天C组、SF组、PDT组、PDT+SF组体重分别为:(35.58±2.04),(31.79±1.76),(32.46±1.88),(33.20±1.85),经方差分析显示C组与SF组、C组与PDT组间有统计学意义(P0.05),其余各组之间差异比较无统计学意义(P0.05)。3小鼠移植瘤体积变化情况及肿瘤生长抑制率:治疗前初始肿瘤体积平均为(792±41)mm3,经方差分析各组间无统计学差异(P0.05),处理后第14天方差分析各组间均有统计学差异(P0.05)C组、SF组、PDT组、PDT+SF组肿瘤生长抑制率分别为:0、51.62%、43.35%、68.68%。4各组移植瘤重量及肿瘤抑制率:C组、SF组、PDT组、PDT+SF组瘤重分别为:(5.42±0.27)g、(2.69±0.34)g、(3.05±0.37)g、(1.72±0.27)g,PDT+SF组瘤重明显低于氟尿嘧啶植入剂组及光动力治疗组,差异均具有统计学意义(P0.05),SF组与PDT组之间比较无统计学意义(P=0.094)。C组、SF组、PDT组、PDT+SF组抑瘤率分别为:0、50.37%、43.73%、68.27%。5荷瘤小鼠生存情况:各处理组均能延长荷瘤小鼠生存时间,其中PDT+SF组生存时间最长、生命延长率最高。6移植瘤病理观察:与对照组比较,各处理组均出现肿瘤细胞数量减少、病理性核分裂象减少,可见片状坏死及空泡样变性,以PDT+SF组坏死面积最大。7细胞凋亡及细胞周期分布情况:与C组相比,SF组、PDT组、PDT+SF组凋亡率均有所上升,以PDT+SF组升高最为显著,以联合治疗组凋亡率最高,差异均有统计学意义(P=0.000)。细胞周期分布结果显示与C组相比SF组、PDT组、PDT+SF组G0/G1期细胞所占比例呈上升趋势,S期细胞所占比例均有所下降,以PDT+SF组下降最为明显(P=0.000)。8各组小鼠脾指数检测:与C组相比SF组脾指数有所下降,差异具有统计学意义(P0.05);PDT组、PDT+SF组与C组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:光动力治疗与氟尿嘧啶植入剂联合应用能够更有效地抑制肿瘤生长,延长荷瘤小鼠生存期,促进细胞凋亡,且无降低荷瘤小鼠免疫力的风险。
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【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

【参考文献】