急性髓细胞白血病TNF-α、P65表达变化的相关性及意义

发布时间：2018-03-25 00:11

  本文选题：TNF-α　切入点：P65　出处：《兰州大学》2015年硕士论文

【摘要】：目的：本研究探讨了急性髓系白血病(Acute myelocytic leukemia, AML)患者和急性髓系白血病细胞系(HL-60)中TNF-α和P65表达变化相关性及意义。材料与方法：收集30例AML患者的骨髓样本,10例非白血病对照样本。通过qRT-PCR检测P65和TNF-α的表达,并用Pearson检验说明样本中TNF-α和P65表达的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线观察在AML患者与非白血病患者TNF-α和P65表达变化。使用MG132和抗TNF-α抗体分别抑制p65和TNF-α在HL-60细胞(AML细胞)中的表达,MTT法检测HL-60细胞的生长状况确认药物最佳作用时间。通过定量qRT-PCR和Western Blot分别检测HL-60细胞中p65和TNF-α mRNA和蛋白的表达。结果：1.通过MTT法检测结果显示,加入抗TNF-α抗体和NF-κB抑制剂MG132培养后的HL-60细胞生长受到明显抑制,生长曲线低平(P0.05)。2.通过qPT-PCR检测骨髓样本显示,在急性髓细胞白血病中P65和TNF-α mRNA相对表达量要显著高于非白血病对照组；它们可以作为有力的证据来区分急性髓细胞白血病患者的实验组和非白血病患者的对照组(P0.05),它们之间存在着显著的相关性(R=0.901)。3.通过qRT-PCR检测HL-60细胞株显示,加入NF-κB抑制剂MG132培养后的细胞P65和TNF-α mRNA相对表达量明显降低；同样,加入抗TNF-α抗体培养后,P65和TNF-α mRNA相对表达量显著降低(P0.05)。4.通过Western Blot检测HL-60细胞株显示,加入NF-κB抑制剂MG132培养后的细胞P65和TNF-α蛋白相对表达量明显降低；同样,加入抗TNF-α抗体培养后,P65和TNF-α蛋白相对表达量显著降低(P0.05)。结论：1.TNF-α和P65在AML中均高表达,并且两者具有显著相关性。2.TNF-α和P65是区分急性髓细胞白血病与非白血病未被利用的潜在分子标记物。
[Abstract]:Objective: to investigate the correlation and significance of the expression of TNF- 伪 and p65 in acute myelocytic leukemia (AMLA) patients and acute myeloid leukemia cell line (HL-60). Materials and methods: bone marrow samples from 30 patients with AML were collected from 10 cases of non-myeloid leukemia. The expression of p65 and TNF- 伪 was detected by qRT-PCR. The correlation between TNF- 伪 and p65 expression in the sample was demonstrated by Pearson test. The changes of TNF- 伪 and p65 expression in AML patients and non-leukemia patients were observed by using the ROC curve. MG132 and anti-TNF- 伪 antibodies were used to inhibit the expression of TNF- 伪 and TNF- 伪 in HL-60 cells, respectively. The expression of p65 and TNF- 伪 mRNA and protein in HL-60 cells were detected by quantitative qRT-PCR and Western Blot. The growth of HL-60 cells cultured with anti-TNF- 伪 antibody and NF- 魏 B inhibitor MG132 was significantly inhibited, and the growth curve of HL-60 cells was significantly inhibited. The bone marrow samples were detected by qPT-PCR. The relative expression of p65 and TNF- 伪 mRNA in acute myeloid leukemia was significantly higher than that in non-leukemia control group. They can be used as strong evidence to distinguish between the experimental group of acute myeloid leukemia patients and the control group of non-leukemia patients (P0.05). There is a significant correlation between them. The HL-60 cell line was detected by qRT-PCR. The relative expression of p65 and TNF- 伪 mRNA was significantly decreased after the addition of NF- 魏 B inhibitor MG132, and the relative expression of P65 and TNF- 伪 mRNA was significantly decreased after the addition of anti-TNF- 伪 antibody. The expression of P65 and TNF- 伪 mRNA in HL-60 cells was detected by Western Blot assay. The relative expression of p65 and TNF- 伪 protein decreased significantly after the addition of NF- 魏 B inhibitor MG132, and the relative expression of p65 and TNF- 伪 protein decreased significantly after the addition of anti-TNF- 伪 antibody. Conclusion: 1. TNF- 伪 and P65 are highly expressed in AML. TNF- 伪 and p65 are potential molecular markers to distinguish acute myeloid leukemia from non-leukemia.
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.71

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本文编号：1660665