姜黄素诱导肺腺癌细胞的凋亡机制研究

发布时间：2018-04-03 19:38

本文选题：肺腺癌　切入点：姜黄素　出处：《南方医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：本论文通过研究姜黄素(curcumin)对人肺腺癌细胞的作用,揭示了该化合物对肺腺癌细胞的抑制作用和作用机理,为后续的临床应用转化研究打下了基础。肺癌是一种恶性程度很高的肿瘤,在全球范围内都存在很高的发病率和死亡率,严重威胁着人们的生命健康。在我国,因罹患肺癌而产生的死亡率也是位居所有恶性肿瘤的首位,也是目前肿瘤研究者研究的重点和难点。然而对于肺癌的治疗,近些年的疗效并没有明显的改善,患者的5年生存期仍然很低,患者的预后还是很差,生活质量很低。[1,2]。为此,临床医生和基础科研工作者都致力于寻找更为有效的药物。通常,肺癌可以分为非小细胞肺癌和小细胞癌,而其中以非小细胞肺癌为主,占肺癌总人数的80%[3,4]。而非小细胞肺癌又可以分为大细胞肺癌、腺癌和鳞癌,其中腺癌又占据绝大多数的非小细胞肺癌的比例,因此在研究非小细胞肺癌临床诊断治疗方针的时候,多选择以肺腺癌为研究对象。姜黄素(curcumin),是一种天然的酚类物质,其具有强还原性。目前市面上的姜黄素主要来源是从一些植物的内部提取出来,通过化学纯化得到纯品的姜黄素。姜科、天南星科这样的一些植物都存在姜黄素的有效成分,获取也较为容易[5,6],人们通常就是通过提取这些植物的根茎来获取姜黄素。目前的医学研究表明,中药姜黄素在临床治疗上具有十分重要的功能,其中不乏降血脂、抗肿瘤等一系列特殊的作用[7]。根据目前数据库收揽的文献查阅可知,姜黄素已经被报道可抑制肿瘤细胞的增殖,同时姜黄素也能够诱导肿瘤细胞发生明显的细胞凋亡[7,8],其潜在的临床应用价值可见一斑,但是这些文献报道都只是停留在粗浅的细胞表型上,并没有对细胞增殖信号通路以及细胞凋亡的经典途径进行更深层次的剖析和解释,因此对临床上更进一步的应用姜黄素带来了一定的困扰,其作用与肿瘤细胞的具体机制究竟是什么?目前尚无明确的报道。为此,我们希望研究姜黄素对于人肺腺癌细胞的生物学作用已经药物毒理性,深入了解姜黄素是否具有潜在的临床应用价值。首先,我们利用检测细胞活性的方法,即MTS实验,发现姜黄素能够抑制对人肺腺癌细胞A549和SPC-A-1增殖,而且这种抑制作用呈现明显的姜黄素毒性剂量-作用时间依赖关系。另外一方面,我们为了研究姜黄素对于人肺腺癌细胞是否具有诱导凋亡的功能,于是我们采用了较为普遍的流式凋亡细胞检测技术,即AnnexinV-FITC/7-AAD双染检测凋亡细胞率。结果显示,姜黄素刺激A549和SPC-A-1细胞之后,两株细胞均表现出了明显的凋亡,而且这种细胞凋亡呈现出明显的剂量依赖性。即高浓度的姜黄素会产生更多的细胞凋亡。接着,为了深入研究姜黄素诱导肺腺癌细胞凋亡的具体分子机制,我们关注了PI3K/Akt信号通路下游分子的变化,我们利用western blot检测了与细胞凋亡密切相关线粒体凋亡信号通路中的caspase信号蛋白,姜黄素5和10μM组作用A549 和 SPC-A-1 细胞 48 h 后,而 CYP1A2、Caspase-9、Caspase-3、PARP 蛋白表达量均降低,而触发凋亡的cleaved-Caspase-9、cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP及Cytochrome C蛋白表达量均增加,这一系列的结果提示姜黄素诱导A549和SPC-A-1细胞凋亡的机制是通过线粒体凋亡信号通路实现的。总的来说,我们的研究表明了中药姜黄素对于人肺腺癌细胞具有一定的杀伤能力。其不仅能够抑制肺腺癌细胞的增殖,而且还能够诱导明显的细胞凋亡。更深层次的,我们发现了姜黄素诱导细胞凋亡的具体机制是通过抑制磷酸化Akt,激活下游线粒体凋亡信号通路来实现的。本研究展示了姜黄素对于肺腺癌细胞的作用,同时在PI3K-AKT信号通路中所扮演的重要角色,为临床上针对肺腺癌的基因靶向治疗提供了新的策略和新的靶点。
[Abstract]:This paper studies the effect of curcumin on human lung adenocarcinoma cells , and reveals the inhibitory effect and mechanism of this compound on lung adenocarcinoma cells . In order to investigate whether curcumin can inhibit the proliferation of human lung adenocarcinoma cells A549 and SPC - A - 1 , it is suggested that curcumin can inhibit the proliferation of human lung adenocarcinoma cells A549 and SPC - A - 1 .

【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R734.2

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