肺腺癌患者恶性胸腔积液中PDGF-A、B、C、D的基因表达的研究

发布时间：2018-04-04 03:59

本文选题：非小细胞肺癌　切入点：胸腔积液　出处：《河北医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:肺癌(Lung Cancer)是目前全球最高发的恶性肿瘤之一。在我国肺癌是发病率及死亡率第一位的肿瘤[1],其总体5年生存率约为10%-15%。根据癌细胞在显微镜下组织学上的大小和外观,癌细胞可分为小细胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC),后者包括腺癌、鳞癌和大细胞肺癌等亚型。其中非小细胞肺癌占肺癌80%-85%,且超过一半的非小细胞肺癌在确诊时已是晚期[2]。胸腔积液是晚期非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)最易合并的临床表现之一。肺癌患者合并胸腔积液的约占15%,其中约50%是在肺癌晚期出现胸腔积液的,并且他们的预后是普遍较差的[3]。因此,胸腔积液患者能否得到及时、正确的诊断和治疗,直接影响着患者的预后。目前,表皮生长因子受体(EGFR)基因突变抑制剂吉非替尼、厄洛替尼和埃克替尼,渐变性淋巴瘤激酶(ALK)融合基因缺失抑制剂克唑替尼等小分子酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors,TKIs)已广泛应用于临床一线或二线治疗,因此肺癌患者分子靶向检测和治疗尤为重要。但晚期肺癌往往难以取得组织标本,在无法获得组织标本的情况下进行胸腔积液的EGFR、ALK基因突变的检测并根据结果选择特定的靶向药物已经成为常态,因此,我们需要探索更多的与肺癌相关的特异性基因,检测其与肺癌的关系,从而选择更合适的靶向治疗方案。血小板衍生生长因子(PDGF)与多种肿瘤的发生和发展有关[4],但其与肺癌的相关研究甚少,有报道称非小细胞肺癌中有32%-67%过表达PDGF,但多仅涉及PDGF-B链在肺癌组织中的相关性研究。以往的为数不多的学者对于肺癌患者PDGF的研究中大多是采取的肺癌的组织或血液标本。而本实验将探讨PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D在晚期肺腺癌患者胸腔积液中的表达。研究晚期肺腺癌伴有恶性胸腔积液的患者与良性胸腔积液(包括肺炎合并胸腔积液、结核性胸腔积液)的患者中PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D的基因表达在基因水平的变化,由此推测PDGF在肺腺癌发生发展的作用和可能机制,从而为晚期伴有胸腔积液的肺腺癌的诊断及选择新型的抗肿瘤药物提供理论基础。本实验拟应用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)法,检测肺腺癌患者恶性胸腔积液与良性(肺炎合并胸腔积液、结核性胸腔积液)胸腔积液中PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D的基因表达情况,并根据ROC曲线探讨这四个指标对肺腺癌恶性胸腔积液的诊断和治疗的价值和意义。方法:收集河北医科大学附属第四医院呼吸内科2015年3月1日至2016年12月31日就诊的胸腔积液患者70例。其中肺癌组为45例,均经CT引导下肺穿刺、支气管镜活检病理诊断或胸腔积液脱落细胞学检查证实为肺腺癌患者,胸腔积液均送脱落细胞学检查找到癌细胞;对照组为25例良性胸腔积液患者(包括肺炎合并胸腔积液、结核性胸膜炎),胸腔积液送脱落细胞学检查未找到癌细胞,可见间皮细胞、淋巴细胞和炎细胞。提取并保存患者胸腔积液:留取70例患者各200-500ml胸腔积液,10分钟内进行离心,取沉渣,将细胞沉渣加入2m L的保存管中,然后加入RNA保存液中应用Trizol试剂法快速提取RNA,放-80℃冰箱中保存。将提取的RNA反转录生成c DNA,然后采用实时荧光定量PCR法分别检测PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D在肺癌组及对照组患者的胸腔积液中的表达,用2-ΔΔCT法计算相对表达量。全部数据均采用SPSS17.0版统计软件处理。并行相关统计学分析。结果:1肺癌组和对照组的性别、年龄构成无统计学差异(P0.05)。2肺癌组与对照组PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D之间基因表达的比较:肺癌组PDGF-A与对照组PDGF-A比较差异无统计学意义(P0.05);肺癌组PDGF-B与对照组PDGF-B比较差异有统计学意义(P0.05);肺癌组PDGF-C与对照组PDGF-C比较差异无统计学意义(P0.05);肺癌组PDGF-D与对照组PDGF-D比较差异有统计学意义(P0.05)。3 ROC曲线分析PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D的效能:对检测结果绘制的ROC曲线,算出了PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D的曲线下面积分别为0.632、0.953、0.557、0.654,PDGF-B、PDGF-D诊断界值分别为3.72、3.12,及这两个指标对肺癌的敏感性和特异性分别为88.9%、92%;40%、84%。统计学分析PDGF-B、PDGF-D,P0.05为有统计学差异,PDGF-A、PDGF-C,P0.05无统计学差异。结论:1肺腺癌患者恶性胸腔积液中PDGF-B、PDGF-D的基因表达明显升高,提示了PDGF-B、PDGF-D可能参与了肺腺癌的发生过程,PDGF基因未来可能会成为治疗肺腺癌分子靶向治疗的新的靶点。2对胸腔积液PDGF-B、PDGF-D的基因表达的检测可能成为胸腔积液判断良恶性的新辅助检验指标,其中PDGF-B的诊断效能最佳。
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【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R734.2

【参考文献】