PinX1在三阴型乳腺癌中的功能及机制的初步研究

发布时间：2018-04-06 05:26

本文选题：PinX1　切入点：三阴型乳腺癌　出处：《南方医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：乳腺癌女性最常见的恶性肿瘤,全球每年乳腺癌的新发病例远超过150万人,形势严峻。根据雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2以及Ki-67的表达情况,乳腺癌被划分为四种不同亚型,依次为:管腔A型、管腔B型、HER2阳性型及三阴型乳腺癌。近些年,乳腺癌早期筛查及治疗方法的不断改进提高显著降低了 Luminal型及HER2阳性型乳腺癌的死亡率。但是,三阴型乳腺癌的死亡率仍居高不下,令人堪忧。深入了解乳腺癌的异质性,完善针对乳腺癌不同分子亚型的特异的诊断及治疗方法,寻找三阴型乳腺癌特异性的生物分子标志物,以实现个体化的综合诊治,降低三阴型乳腺癌的死亡率,提高患者的生存质量,是当今亟待解决的难题。PinX1是一个大小为45KD,由328个氨基酸构成的端粒蛋白复合体(shelterin)相关蛋白。越来越多的研究表明,PinX1在多种肿瘤中表达下降,可能通过与端粒或端粒酶相互作用抑制肿瘤生长,是一个潜在的肿瘤抑制因子。目前,人们对于PinX1与三阴型乳腺癌的关系仍知之甚少,PinX1在三阴型乳腺癌的预后、诊断及治疗等方面的临床价值仍有待进一步研究。本研究首先通过实时荧光定量PCR及Western Blot检测了 PinX1在乳腺癌组织及其配对癌旁组织中的表达情况,结果表明PinX1在乳腺癌组织中低表达;其次,通过组织芯片及免疫组织化学染色,进一步探究PinX1表达与乳腺癌临床病理参数间的关系。在59例浸润性导管癌中,PinX1的表达与患者ER表达状态、PR表达状态、组织病理学分级具有显著相关性(P0.05),而与临床分期、pT分期、年龄、P53状态及HER2状态无显著相关性(P0.05);然后,通过分层分析探究了 PinX1表达与乳腺癌不同亚型间的关系,结果发现,PinX1的表达与三阴型乳腺癌密切相关,在三阴型乳腺癌中表达降低。最后,选取一株人三阴型乳腺癌细胞系(MDA-MB-231),采用G418筛选及CRISPR-Cas9技术构建过表达及敲除PinX1的稳定细胞系,通过划痕、CCK-8、流式、Transwell等功能试验,以进一步验证PinX1可能的作用机制。CCK-8实验结果表明,过表达PinX1抑制了细胞的增殖,而敲除PinX1则在一定程度上促进了细胞的增殖(P0.05);划痕及Transwell试验验证了过表达PinX1抑制细胞迁移,而PinX1敲除则促进细胞迁移(P0.05);流式检测结果提示,过表达PinX1对细胞的凋亡具有一定的促进作用,而敲除PinX1则抑制了细胞的凋亡。此外,利用Western Blot检测凋亡标志物Caspase-3的活性,结果表明,与对照组相比,过表达PinX1促进了 caspase-3的切割活化。本研究表明,PinX1在乳腺癌中低表达,其低表达与三阴型乳腺癌的迁移、增殖等恶性表型密切相关,过表达PinX1促进了 MDA-MB-231细胞的凋亡。因此,PinX1在三阴型乳腺癌的发生发展中发挥着重要的作用,有望成为三阴型乳腺癌潜在的治疗靶点及分子标志物。
[Abstract]:In recent years , the relationship between PinX1 expression and clinical pathological parameters of breast cancer was studied . The results showed that PinX1 inhibited the proliferation of the cells . The results showed that PinX1 inhibited the proliferation of the cells . The results showed that the overexpression of PinX1 inhibited the proliferation of cells .

【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.9

【参考文献】