AZD9291单纯用药或联合放疗对人肺支气管上皮细胞BEAS-2B及小鼠肺组织影响的基础研究

发布时间：2018-04-15 23:36

本文选题：表皮生长因子受体(EGFR) + AZD9291　；参考：《济南大学》2017年硕士论文

【摘要】：背景与目的:肺癌仍然是全球最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率居所有恶性肿瘤首位。肺癌大体可分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞细胞肺癌(NSCLC),非小细胞肺癌约占肺癌的85%。西方和亚洲晚期非小细胞肺癌患者中分别有10%-15%和40%有表皮生长因子受体(EGFR)基因突变,对于这类人群,靶向药物表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)为其重要治疗方法。迄今为止,EGFR-TKIs已研发至第三代。第一代药物有吉非替尼、厄洛替尼,为针对EGFR酪氨酸激酶位点19外显子缺失和21外显子突变的可逆抑制剂。第二代药物有阿法替尼和Dacomitinib,为针对多个EGFR酪氨酸激酶位点和ErbB家族位点突变的不可逆抑制剂。第三代药物有AZD9291、CO-1686、HM61713等,为针对T790M耐药突变并保留野生突变的高选择性不可逆抑制剂。EGFR-TKI单药治疗为EGFR敏感突变非小细胞肺癌患者一线治疗方案,与放疗联合治疗时近年来基础研究证实其有放疗增敏作用,临床研究表明其可改善晚期非小细胞肺癌患者生存且亦有可能作为无法耐受放化疗时的替代方案。然而EGFR-TKI单药治疗间质性肺炎发生率低但死亡率高,与放疗联合时肺毒性发生概率不一,AZD9291为高选择性针对T790M突变的第三代新药,其肺毒性一直是临床医师关注的问题,本课题将通过体外细胞实验和体内动物实验检测AZD9291单纯用药或与放疗联合应用时人肺/支气管上皮细胞(BEAS-2B)功能变化和小鼠肺组织损伤程度,为AZD9291单纯用药或联合治疗方案的安全性提供参考。方法:体外细胞实验选取人肺/支气管上皮样细胞株BEAS-2B,体内动物实验选取C57BL/6小鼠,分别设对照组,药物组(AZD9291),放疗组,放疗联合AZD9291组,MTS/Acumen检测细胞增殖率和死亡率,流式技术检测细胞周期;免疫组化检测小鼠肺组织γ-H2AX表达情况。HE染色检测小鼠肺炎发生情况。结果:1.细胞存活率检测(1)AZD9291单纯用药时在20nm、250nm、700nm(患者口服80mg/kg/d剂量时最高有效血药浓度为635nM)不同浓度下,细胞存活率较对照组均无显著差异(P0.674);(2)单纯放疗组显著抑制BEAS-2B细胞存活能力(与对照组相比2Gy、4Gy、8Gy时P值分别为0.066,0.001,0.001),AZD9291联合4Gy放疗较单纯4Gy放疗组相比并未进一步加重放疗引起的细胞存活能力抑制(P=0.967)。2.细胞周期实验(1)AZD9291单纯用药时在20nm、250nm、700nm不同浓度下对细胞周期影响不显著(2)放疗导致BEAS-2B细胞G2/M期阻滞(P=0.011),AZD9291联合放疗并未进一步加重放疗对细胞周期的影响。3.免疫组化检测小鼠肺组织γ-H2AX表达情况(1)AZD9291单纯用药不会增加小鼠肺组织γ-H2AX水平(P=0.9);(2)2Gy×5f放疗组与对照组相比明显增加小鼠肺组织γ-H2AX水平(P=0.011);15Gy单次大剂量照射组显著增加小鼠肺组织γ-H2AX水平(P=0.001);AZD9291联合2Gy×5f放疗组较单纯2Gy×5f放疗组γ-H2AX水平无显著差异(P=0.997),AZD9291联合15Gy放疗组较单纯15Gy放疗组间无差异(P=0.308)。4.HE染色结果(1)AZD9291单纯用药组在第3周有1只小鼠有轻度肺炎,概率为20%(1/5);(2)AZD9291联合15Gy放疗组在第3个月有1只小鼠合并轻度肺纤维化(肺纤维化范围1%),概率为20%(1/5)结论:体内外模拟临床给药剂量范围条件下,单纯AZD9291用药对BEAS-2B无损伤作用,但体内实验不能排除其可能产生间质性肺炎;AZD9291联合放疗不会加重放疗对BEAS-2B细胞和小鼠肺组织DNA损伤作用,联合方案不能排除其可能产生肺毒性
[Abstract]:BACKGROUND & OBJECTIVE : Lung cancer remains one of the most common malignant tumors in the world . The mortality of lung cancer is the first in all malignant tumors . There was no significant difference in the levels of 纬 - H2AX ( P = 0.997 ) between AZD9291 and 15Gy radiotherapy group ( P = 0.308 ) .

【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R734.2

【参考文献】