癫痫相关脑肿瘤的临床、影像与病理学研究

发布时间：2018-04-18 15:04

本文选题：脑肿瘤 + 癫痫　；参考：《浙江大学》2017年博士论文

【摘要】：癫痫是一种以脑部神经元异常放电导致反复性、发作性和短暂性的中枢神经系统功能失常为特征的慢性疾病。脑肿瘤是导致癫痫的最重要原因之一。癫痫相关的脑肿瘤是其中一类具有特殊临床表现和生物学习性的肿瘤,绝大多数生长缓慢,相对隐匿,以癫痫为主要甚至唯一症状,大部分患者对抗癫痫药物反应欠佳,但手术完整切除后通常预后较好。胶质神经元肿瘤,包括节细胞胶质瘤和胚胎发育不良性神经上皮瘤,是癫痫相关脑肿瘤最常见的组织学类型。鼠肉瘤病毒癌基因同源物B1(v-RAF murine sarcoma viral oncogene homologue B1,BRAF)基因编码丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是调节RAS/RAF/MEK/ERK激酶信号传导通路的一个重要分子。第15外显子第1799位核苷酸上的错义突变(碱基T突变为A),导致其编码的产物缬氨酸被谷氨酸替代,是BRAF最常见的突变类型(即BRAF V600E突变)。近来,BRAF V600E突变在多达50%的节细胞胶质瘤和部分胚胎发育不良性神经上皮瘤中被发现。但中国胶质神经元肿瘤人群中的BRAF V600E的突变情况尚无相关数据,且罕有癫痫相关胶质神经元肿瘤患者BRAF突变与临床相关性的报道。自噬是依赖溶酶体途径对细胞器和胞质蛋白进行降解的一种过程,有多种蛋白参与其中,微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)和Beclin-1是目前最广泛应用的能够很好的反映自噬水平的指示性蛋白。局灶性皮质发育不良和结节性硬化均为难治性癫痫的常见病因,与胶质神经元肿瘤可能有相似的致病机制。先前研究发现在局灶性皮质发育不良和结节性硬化中存在自噬异常现象,而胶质神经元肿瘤中自噬相关蛋白的表达目前尚无相关报道。因此,在本博士论文的第一部分,我们对浙江大学医学院附属第二医院癫痫中心接受致病灶切除并经病理诊断为脑肿瘤的患者进行回顾性分析,探讨癫痫相关脑肿瘤的临床、影像及病理学特点,进一步加深对该类疾病的认识。随后的第二部分,我们检测了中国人群中癫痫相关胶质神经元肿瘤的BRAFV600E突变率,并探究其与临床特征之间的关联。而在第三部分,我们深入评估癫痫相关胶质神经元肿瘤中自噬相关蛋白的表达情况,并分析其与BRAFV600E基因突变及临床病理特点之间的相关性。第一部分癫痫相关脑肿瘤的临床病理学分析目的研究经手术切除的癫痫相关脑肿瘤的临床病理学特点。方法收集浙江大学医学院附属第二医院癫痫中心2012年7月至2016年6月连续60例接受致病灶手术切除并经病理诊断为脑肿瘤的患者的临床、影像、脑电图及术后随访等资料。对手术标本采用苏木精-伊红和免疫组织化学染色,回顾性分析其临床病理特点。结果60例患者男女比例约为1.7:1,其中49例表现为难治性癫痫。癫痫起病平均年龄为22.2岁,35岁及以下起病者占到80.0%。平均癫痫病程4.7年,半数以上患者病程大于2年。肿瘤绝大多数多位于颞叶,其次是额叶。组织学亚型:节细胞胶质瘤24例,胚胎发育不良性神经上皮瘤11例,弥漫性星形胶质细胞瘤11例,少突胶质细胞瘤7例,少突星形胶质细胞瘤4例,毛细胞粘液样星形胶质细胞瘤1例,多形性黄色星形胶质细胞瘤1例,血管中心性胶质瘤1例。9例脑肿瘤患者合并有局灶性皮质发育不良。47例患者术后未再有癫痫发作。结论癫痫相关脑肿瘤以儿童及青少年多见,常位于颞叶且为生长缓慢的胶质神经元肿瘤或低级别胶质瘤。临床多以难治性癫痫为主要症状。外科手术是首选治疗方法,完整切除后通常预后较好。第二部分癫痫相关胶质神经元肿瘤BRAF'V600E突变率及其临床相关性探究目的胶质神经元肿瘤是最常见的癫痫相关脑肿瘤亚型,部分合并BRAFV600E突变。我们试图在癫痫相关胶质神经元肿瘤中国患者中检测BRAF V600E的突变率,并探究其与临床特征的相关性。方法纳入的35例癫痫相关胶质神经元肿瘤包括24例节细胞胶质瘤和11例胚胎发育不良性神经上皮瘤,收集相关的临床资料。从肿瘤石蜡样本中提取DNA并通过测序检测BRAFV600E突变。分析BRAFV600E突变与临床特征间的关联。结果我们共发现11例突变,节细胞胶质瘤和胚胎发育不良性神经上皮瘤的突变率分别为33.3%(8/24)和27.3%(3/11)。女性患者(4/23,17.4%)较男性患者BRAF V600E突变更常见(P = 0.022)。此外,BRAF突变的胶质神经元肿瘤与BRAF野生型患者相比,其癫痫发作类型更多,两者之间具有统计学差异(P=0.027)。然而,BRAFV600E突变与其他临床特征,包括癫痫发作起病年龄,癫痫病程,手术年龄,肿瘤部位以及术后癫痫有无发作等之间无明显相关性。结论我们的研究首次报道了中国癫痫相关胶质神经元肿瘤患者BRAF V600E的突变率,并证实其与性别和多种发作类型有明显相关性。未来需要更大样本量的研究和更长时间的随访来进一步证实。第三部分癫痫相关胶质神经元肿瘤自噬相关蛋白表达与BRAF V600E突变及临床特征的关联性研究目的在本研究中,我们旨在了解癫痫相关胶质神经元肿瘤中自噬相关蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征的相关性。方法共纳入33例患者,其中节细胞胶质瘤22例,胚胎发育不良性神经上皮瘤11例。采用免疫组织化学染色法评估自噬相关蛋白(LC3和Beclin-1)的表达情况,并通过DNA测序检测肿瘤样本的BRAF V600E突变。分析自噬相关蛋白表达和临床病理特征之间的相关性。结果LC3和Beclin-1蛋白高表达分布见于36.4%(12/33)和39.4%(13/33)的患者,其与BRAFV600E突变有关(P = 0.008;P = 0.018)。此外,位于颞叶的胶质神经元肿瘤更多见LC3蛋白高表达(P = 0.002)。节细胞胶质瘤亚组分析仅发现LC3蛋白高表达与BRAF V600E突变以及肿瘤位于颞叶显著相关(P = 0.020;P = 0.015)。我们未能发现自噬相关蛋白高表达与其他临床病理特征间的关联性,如性别,癫痫起病年龄,癫痫病程,术后癫痫无发作情况等。结论我们的研究证实胶质神经元肿瘤中自噬过程异常可能与BRAFV600E突变有关,将来还需要更大样本量的数据和更长时间的随访来进一步明确。
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【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R739.41;R742.1

【参考文献】