IGF-FOXO3a通路对肝癌干细胞自我更新能力的调控

发布时间：2018-04-22 14:20

  本文选题：肝癌干细胞 + FOXOa　； 参考：《第三军医大学学报》2017年16期

【摘要】：目的探讨FOXO3a对肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)自我更新能力的调控作用以及其相关机制。方法流式细胞仪分选获取肝癌干细胞,实时荧光定量PCR(real time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)检测FOXO3a在肝癌干细胞中的表达情况;利用类胰岛素生长因子(insulin-like growth factor,IGF)的抑制剂或激活剂改变IGF活性,Western blot和qRT-PCR检测FOXO3a表达的改变;包装、纯化表达和干扰FOXO3a的慢病毒并进行细胞的感染,Western blot检测其过表达和干扰效率;采用细胞克隆形成实验和细胞成球生长能力实验检测过表达或干扰FOXO3a后细胞自我更新能力的改变,以及肝癌细胞中激活IGF信号,同时过表达FOXO3a后细胞自我更新能力的改变。结果 FOXO3a在肝癌干细胞中的表达明显低于肝癌细胞(P0.01),并且受到IGF的负向调控;构建了稳定过表达和干扰FOXO3a的细胞模型,并发现过表达FOXO3a后,细胞的克隆形成能力和成球生长能力均降低,而干扰FOXO3a后,细胞的克隆形成能力和成球生长能力均得到了提升;激活IGF信号,同时过表达FOXO3a后,细胞的克隆形成能力和成球生长能力下降。结论 FOXO3a对肝癌干细胞的自我更新能力具有负向调控作用,且可受到IGF的负调节,并介导IGF对肝癌干细胞的自我更新能力的调控。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of FOXO3a on the self-renewal ability of liver stem cell cancer stem cells and its related mechanism. Methods Hepatocellular carcinoma stem cells were obtained by flow cytometry. The expression of FOXO3a in HCC stem cells was detected by real-time quantitative PCR(real time fluorescent quantitative PCRQRT-PCRR. Using the inhibitor or activator of insulin-like growth factor-like IGF to change the activity of IGF, Western blot and qRT-PCR were used to detect the expression of FOXO3a, and the lentiviruses expressing and interfering with FOXO3a were packaged, purified and infected with Western blot to detect its overexpression and interference efficiency. The changes of cell self-renewal ability after overexpression or interference with FOXO3a and activation of IGF signal in hepatoma cells were detected by cell clone forming assay and cell spheroidization ability test, and the changes of cell self-renewal ability after over-expression of FOXO3a were also detected. Results the expression of FOXO3a in HCC stem cells was significantly lower than that in HCC cells P0.01 and was regulated negatively by IGF. A cell model of stable overexpression and interference with FOXO3a was constructed, and the overexpression of FOXO3a was found. The ability of cell clone formation and spheroidization decreased, but after interfering with FOXO3a, the ability of cell clone formation and spheroidization was improved, and IGF signal was activated and FOXO3a was overexpressed. The ability of cell clone formation and spheroidal growth decreased. Conclusion FOXO3a has a negative regulatory effect on the self-renewal ability of HCC stem cells and can be negatively regulated by IGF and mediated by the regulation of IGF on the self-renewal ability of HCC stem cells.
【作者单位】： 浙江理工大学生命科学学院;第三军医大学西南医院生物治疗中心;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81472292)~~
【分类号】：R735.7

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 冷政伟;夏清华;;肝癌干细胞研究进展[J];腹部外科;2008年06期

2 宋凯;杨硕菲;吴俊华;江春平;;肝癌干细胞的研究进展[J];世界华人消化杂志;2009年36期

3 严威;吴国洋;;肝癌干细胞分离鉴定研究进展[J];肝胆外科杂志;2010年03期

4 李广权;陈伟强;;肝癌干细胞的研究现状[J];医学综述;2013年03期

5 张朵;朱海英;马凤云;胡以平;;肝癌干细胞的研究现状[J];生命的化学;2006年01期

6 陈丽;戴广海;;肝癌干细胞研究现状[J];临床肿瘤学杂志;2008年12期

7 唐飞;吕洪敏;向慧玲;;肝癌干细胞的研究现状[J];实用肝脏病杂志;2008年02期

8 张伟;陈孝平;;肝癌干细胞的研究进展[J];临床外科杂志;2008年09期

9 张华;高志红;许田英;朱建凤;文家斌;张阳;;常规化疗对肝癌干细胞的作用[J];胃肠病学和肝病学杂志;2009年06期

10 徐文;曹璐;殷正丰;;肝癌干细胞研究进展与方向[J];癌症;2009年09期

相关会议论文 前4条

1 单娟娟;钱程;;悬浮条件培养法富集肝癌干细胞[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年

2 尹川;谢渭芬;;肝癌干细胞及其分化治疗[A];第九次全国消化系统疾病学术会议专题报告论文集[C];2009年

3 殷胜勇;陈新华;胡晨;;CD133阳性肝癌干细胞在肝癌肝移植术后肿瘤复发中的作用及纳秒脉冲进行干预的初步实验研究[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年

4 杜智;宋文芹;张世光;高英堂;朱争艳;王毅军;只丹琮;;人原发性肝癌细胞建系及其生物学特性的初步鉴定[A];天津市生物医学工程学会2007年学术年会论文摘要集[C];2007年

相关重要报纸文章 前1条

1 本报记者 王雪敏;肝癌干细胞及其分化治疗[N];医药经济报;2010年

相关博士学位论文 前10条

1 雷增杰;组蛋白去甲基化酶LSD1促进肿瘤细胞“干性”和侵袭转移的机制研究[D];第三军医大学;2015年

2 张克志;三氧化二砷抑制GLI1表达诱导肝癌干细胞分化延长术后生存期的实验研究[D];复旦大学;2014年

3 刘辉琦;肝癌干细胞相关功能性基因的研究[D];北京协和医学院;2015年

4 戎晓祥;CIK细胞对肝癌干细胞的杀伤作用及其相关机制研究[D];南方医科大学;2015年

5 朱平平;肝癌干细胞相关基因和长链非编码RNA调控自我更新的分子机制研究[D];中国科学技术大学;2016年

6 罗勇利;Nanog~-非肝癌干细胞维持Nanog~+肝癌干细胞自我更新作用的分子机制研究[D];第三军医大学;2016年

7 刘春刚;Sox9调控肝癌干细胞对称非对称分裂影响自我更新及肿瘤发生的研究[D];浙江大学;2016年

8 刘颜敏;超声靶向微泡介导CD133-shRNA转染对CD133~+肝癌干细胞生物学特性及上皮间质转化的影响[D];重庆医科大学;2016年

9 朱新锋;全反式维甲酸诱导分化肝癌干细胞作用研究[D];昆明医科大学;2016年

10 王雪;长链非编码RNA对肝癌干细胞的调控作用及分子机制[D];第二军医大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 马俊明;人肝癌组织中肝癌干细胞的分离培养与鉴定[D];宁夏医科大学;2015年

2 巩志荣;靶向肝癌细胞和肝癌干细胞的共载盐霉素钠和阿霉素纳米脂质体的体内外研究[D];第二军医大学;2015年

3 王璐;抑瘤素M与盐霉素联用对肝癌干细胞作用的研究[D];吉林大学;2016年

4 陆世东;CD90阳性细胞筛选及PI3K/AKT通路对其干细胞样特性影响的初步研究[D];广西医科大学;2016年

5 杨帅;基于耐药和单细胞全克隆构建肝癌干细胞体外富集模式的实验研究[D];广西医科大学;2016年

6 何永燕;抗人肝癌干细胞功能性单抗的研究[D];广西医科大学;2016年

7 杨婧;肝癌干细胞靶向治疗的研究[D];北京协和医学院;2016年

8 何欢;纳米羟基磷灰石负载p53基因及阿霉素对肝癌干细胞抑制效果研究[D];浙江理工大学;2016年

9 赖佛宝;脂多糖对肝癌干细胞干性维持的作用及其机制研究[D];福建医科大学;2016年

10 戴雪辰;乙型肝炎病毒preS1基因对肝癌干细胞的发生和发展的促进作用研究[D];武汉大学;2017年

，

本文编号：1787611