锌指结构蛋白148可变剪切体在结直肠癌发生发展中的作用

发布时间：2018-04-27 11:23

  本文选题：锌指结构蛋白 + 可变剪接体　； 参考：《中国肿瘤生物治疗杂志》2017年12期

【摘要】：目的:探讨锌指结构蛋白148(zinc finger protein 148,ZNF 148)基因的两种可变剪接体对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响及相关作用机制。方法:RT-PCR检测人结肠癌SW480细胞中的ZNF148两种剪接体的表达,构建ZNF148干扰载体和过表达载体,将构建成功的ZNF148干扰载体及过表达载体转染至人结肠癌SW480细胞中,分为ZNF148~(FL)-siRNA组、ZNF148~(FL)-Over express组、ZNF148~(ΔN)-siRNA组、ZNF148~(ΔN)-Over express组、Control siRNA组、Control Over express组以及Normal control组。RTPCR检测各组细胞m RNA表达水平,MTT、Transwell、划痕实验和流式细胞术检测人结肠癌SW480细胞的增殖、体外细胞侵袭、迁移和凋亡情况。结果:RT-PCR扩增获得全长分别为2 385 bp以及2 004 bp的ZNF148~(FL)与ZNF148~(ΔN)两种不同剪接体产物。ZNF148~(FL)-siRNA组ZNF148~(FL)的表达量明显下降,但ZNF148~(ΔN)的表达水平上升;ZNF148~(FL)-Over express组ZNF148~(FL)的表达量明显上升,而ZNF148~(ΔN)的表达水平下降(均P0.05)。ZNF148~(ΔN)-siRNA组的ZNF148~(ΔN)表达水平明显下降,但ZNF148~(FL)的表达水平上升;ZNF148~(ΔN)-Over express组ZNF148~(ΔN)表达水平升高,而ZNF148~(FL)的表达水平下降(均P0.05)。ZNF148~(FL)-Over express组及ZNF148~(ΔN)-siRNA组SW480细胞增殖能力增强,而ZNF148~(FL)-siRNA组和ZNF148~(ΔN)-Over express组SW480细胞增殖能力下降(均P0.05)。ZNF148~(FL)-siRNA组和ZNF148~(ΔN)-Over express组穿膜SW480细胞数量及迁移活性显著下降,而凋亡率显著上调;ZNF148~(FL)-Over express组和ZNF148~(ΔN)-siRNA组穿膜细胞数及迁移活性显著上调,而凋亡率显著下调(均P0.05)。结论:ZNF148~(FL)表现为增加结直肠癌细胞的增殖、侵袭和转移活力,而ZNF~(ΔN)作用与之相反,ZNF148的ZNF148~(FL)与ZNF~(ΔN)两种剪接体对于结直肠癌的恶性生物活性可能表现出了互相拮抗作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of two variable splicing bodies of zinc finger structural protein 148(zinc finger protein 148on the invasion and metastasis of colon cancer cells and its related mechanism. Methods the ZNF148 interference vector and overexpression vector were constructed by detecting the expression of ZNF148 splicing in human colon cancer SW480 cell line by using 1: RT-PCR, and the successfully constructed ZNF148 interference vector and overexpression vector were transfected into human colon cancer SW480 cell line. ZNF148~(FL)-siRNA group was divided into two groups: ZNF148FL-Over express group (螖 N)-siRNA group) control siRNA group (螖 N)-Over express group) control Over express group and Normal control group .RT-PCR was used to detect the expression of m RNA in the cells of each group. The proliferation, invasion, migration and apoptosis of SW480 cells in human colon cancer were detected by scratch test and flow cytometry. Results the results showed that the expression of ZNF148Fl (2 385 BP and 2 004 BP) and ZNF1488 (螖 N) splicing products. The expression of ZNF148FL-siRNA group was significantly decreased, but the expression level of ZNF148FL-Over express group was increased significantly (P < 0.05), but the expression of ZNF148FL-siRNA group was significantly increased than that of ZNF148FL-Over express group (P < 0.05), but the expression level of ZNF148mRNA was significantly increased in ZNF148FL-siRNA group, but the expression level of ZNF148FL-Over express group was significantly higher than that of ZNF148FL-Over express group. However, the expression level of ZNF148T (螖 N) decreased significantly (P0.05N. ZNF148T (螖 N) in 螖 N)-siRNA group, but ZNF148FL increased in 螖 N)-Over express group (螖 N)-Over express group), but the expression level of ZNF148Fl decreased (both P0.05).ZNF148~(FL)-Over express group and ZNF148FL group (螖 N)-siRNA group) increased the proliferative ability of SW480 cells in both P0.05).ZNF148~(FL)-Over express group and ZNF148T group (螖 N)-siRNA group), the expression level of ZNF148T (螖 N) decreased significantly (P < 0.05), but the expression of ZNF148T (螖 N) increased significantly (P < 0.05). However, the proliferative ability of SW480 cells in ZNF148~(FL)-siRNA group and ZNF148 (螖 N)-Over express group) decreased significantly (both P0.05).ZNF148~(FL)-siRNA group and ZNF148 group (螖 N)-Over express group) decreased the number and migration activity of SW480 cells, while the apoptosis rate upregulated significantly the number and migration activity of SW480 cells in express group and 螖 N)-siRNA group. The apoptotic rate was significantly decreased (all P 0.05). Conclusion the cell proliferation, invasion and metastasis activity of colorectal cancer cells were increased by: 1. ZNFN (螖 N) and ZNF148 (螖 N) splicing may antagonize the malignant biological activity of colorectal cancer.
【作者单位】： 南昌大学第三附属医院普外科;上海长海医院急诊科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81572332)~~
【分类号】：R735.34

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本文编号：1810537