MiRNA-331在大肠癌中生物学功能研究

发布时间：2018-05-05 20:23

  本文选题：大肠癌 + miRNA-331　； 参考：《安徽医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:将人大肠癌细胞株HCT116进行细胞培养,再进行miRNA-331mimics转染,采用平板克隆形成实验、MTT法和Transwell小室实验检测miRNA-331对人大肠癌细胞HCT116的增殖能力、克隆形成、迁移能力、侵袭能力的影响。阐明miRNA-331对大肠癌的发生、发展的影响,探讨miRNA-331作为肿瘤基因标记物对大肠癌诊断的价值,为大肠癌的早期诊断、早期治疗提供理论和依据。方法:1、选取中国科学技术大学生命科学院分子病理实验室提供的大肠癌细胞株HCT116进行细胞培养。2、将HCT116细胞进行miRNA-331mimics转染,设实验组(转染miRNA-331mimics组)和对照组(negative control,NC)。3、应用平板克隆形成实验观察转染miRNA-331mimics后HCT116细胞集落形成情况。4、采用MTT法观察转染miRNA-331mimics后第1天、第2天、第3天、第4天、第5天分别检测5个同一时段的OD值,并绘制细胞的生长曲线。5、通过Transwell小室实验观察HCT116细胞转染miRNA-331mimics后其迁移能力及侵袭能力的变化。6、采用SPSS20.0软件对所得数据进行统计学对比分析,数据以均数±标准差表示,两组间配对样本采用配对t检验,两组间独立样本采用非配对t检验,均以P0.05为差异有统计学意义。结果:1、在平板克隆形成实验中,两组间细胞集落形成的数量和体积均有明显差异,实验组细胞集落形成数量较对照组减少,集落形成体积明显小于对照组。2、HCT116细胞转染mi RNA-331mimics后第1天、2天、3天、4天、5天,采用MTT比色分析法检测OD值,实验组和对照组结果分别为第1天:(0.08±0.07、0.10±0.08),(t=-3.42,P0.05);第2天:(0.11±0.01、0.16±0.04),(t=-3.33,P0.05);第3天:(0.39±0.10、0.62±0.21),(t=-2.49,P0.05);第4天:(0.75±0.10、1.20±1.94),(t=-5.05,P0.05);第5天:(1.13±0.23、2.23±0.30),(t=-7.19,P0.05)。通过对比发现随着HCT116细胞中miRNA-331mimics的含量增多可抑制细胞的增殖,结果有统计学意义。3、HCT116细胞转染miRNA-331mimics后,通过Transwell实验观察发现实验组细胞进入下方培养液数量减少,表明转染后的HCT116细胞的迁移能力减弱。4、HCT116细胞转染miRNA-331mimics后,通过Transwell实验观察实验组和对照组均未发现细胞进入下方培养液中,两组结果为阴性,表明转染后的HCT116细胞的侵袭能力无明显变化。结论:miRNA-331mimics有抑制大肠癌HCT116细胞的克隆形成、细胞增殖及迁移能力,表明miRNA-331可能在大肠癌的发生、发展过程中起着抑癌基因作用。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of miRNA - 331 on the proliferation , cloning , migration and invasion of human colorectal carcinoma cell line HCT116 . The results showed that miRNA - 331 could inhibit the clonal formation , cell proliferation and migration of HCT116 cells .

【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.34

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