肝内肿块型胆管细胞癌在影像学和分子生物学以及子宫内膜癌在分子生物学特征的研究

发布时间：2018-05-09 19:30

  本文选题：胆管细胞癌 + Gd-BOPTA　； 参考：《山东大学》2017年博士论文

【摘要】：第一部分肝内肿块型胆管细胞癌在肝胆特异性对比剂Gd-BOPTA增强磁共振表现特点的研究目的:研究肝内肿块型胆管细胞癌(intrahepatic mass-forming cholangiogcarcinoma,IMC )在3.0 T磁共振的表现特点,评价肝内肿块型胆管细胞癌的强化方式和强化特征,尤其是重点评价病变在Gd-BOPTA增强磁共振上肝胆特异期的特征。方法:我们回顾性的分析了 2011年3月到2015年7月的66位患者的66例经病理证实的肝内肿块型胆管细胞癌,所有患者均在3.0T磁共振(Magnetom Verio,Siemens, Germany )应用肝胆特异性对比剂钆贝酸二葡甲胺(gadobenate dimeglumine,Gd-BOPTA)作为对比剂行进行增强扫描检查,扫描序列主要包括横断位脂肪抑制T2WI,其脂肪抑制技术采用FS (fat saturation);横断位双回波T1WI正相位和反相位;T1WI平扫及增强采用三维容积内插体部检查序列(volume interpolated body examination,VIBE);弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI) (b值选择0、800 sec/mm2);对比剂注射后,增强扫描的各期及其扫描时间分别为动脉期(25-30s),门脉期(60-70s),延迟期(10 min),肝胆特异期(90-100min)。我们主要观察了以下磁共振图像的特点:T1WI,T2WI,DWI,T1WI动态增强扫描序列(动脉期、门脉期、延迟期)以及T1WI肝胆特异期序列。我们定量、定性的评估了每一个胆管细胞癌的信号强度、强化方式、强化程度和肿瘤边界。我们还分析了 DWI序列的图像并计算了每一个肿瘤的ADC值。以上这些研究使用了 Wilcoxon符号秩检验以及独立样本t检验。结果:我们研究了 66位患者的66例肝内肿块型胆管细胞癌。在动态增强扫描图像中,57个病灶(86.4%)表现为动脉期病灶的周边明显强化、在门脉期及延迟期病灶中央渐进性强化而病灶周边强化程度下降。在延迟期,所有病灶均显示为肿瘤周边环状低信号、肿瘤中央不均匀的高或低信号。在肝胆特异期,61个病灶(92.4%)显示为周围环状的低信号、中间为高信号。此外,有57个病灶(86.4%)在DWI序列表现为周围高信号、中间不均匀低或混杂信号。在肝胆特异期,胆管细胞癌有着最高的醒目性评分(中位数,5;四分位距,4-5)。在肝胆特异期,中分化胆管细胞癌的强化程度(48.2%±15.6%)要高于低分化胆管细胞癌的强化程度(35.5%± 18.9%),有淋巴结转移的胆管细胞癌的强化程度(47.6%± 18.8%)要高于没有淋巴结转移的胆管细胞癌的强化程度(33.7%± 19.6%)。此外,低分化的胆管细胞癌的ADC值(0.75×10-3 mm2/s±0.18×10-3 mm2/s)要低于中分化的胆管细胞癌的 ADC 值 0.98×10-3 mm2/s±0.22X 10-3 mm2/s)。结论:在Gd-BOPTA增强的磁共振图像上,肝内肿块型胆管细胞癌最常见的强化方式是动脉期肿瘤周边明显环状强化、门脉期和延迟期肿瘤中央渐进样强化而肿瘤周边强化程度下降。在肝胆特异期,肝内肿块型胆管细胞癌的典型特点是肿瘤周边低信号、肿瘤中央高信号,这种表现与肝内肿块型胆管细胞癌在应用Gd-EOB-DTPA时增强扫描后在肝胆特异期的表现特点是不同的。肝内肿块型胆管细胞癌这种周边低信号、中央高信号或是周边高信号、中央低信号的这种“靶征”表现可出现于肝内肿块型胆管细胞癌的延迟期、肝胆特异期以及弥散加权图像上。此外,肝内肿块型胆管细胞癌在肝胆特异期更为醒目,其轮廓和边缘显示的更为清晰。低分化胆管细胞癌的ADC值要低于中分化胆管细胞癌的ADC值,这可以为临床的治疗和预后提供更多有益的信息。第二部分应用3. 0T磁共振分析肝内肿块型胆管细胞癌表观扩散系数与分子标记物Ki-67之间的关系目的:肝内肿块型胆管细胞癌(intrahepatic mass-forming cholangiogcarcinoma,IMC)是肝内第二常见的原发性恶性肿瘤。Ki-67蛋白是一种与核糖体RNA转录有关的核蛋白,在细胞增殖的各期(G1,S,G2和M)均有表达,Ki-67染色指数(Ki-67 staining index, Ki-67 SI)可用于判定细胞增殖的活性程度。我们着重研究了经3.0T磁共振检查的肝内肿块型胆管细胞癌的表观扩散系数(Apparent diffiusion coefficient,ADC)与分子标记物 Ki-67 SI 表达之间的关系。方法:我们选取了 38位患者的38个经病理证实的肝内肿块型胆管细胞癌(其中包括16例中分化胆管细胞癌和22例低分化胆管细胞癌),患者包括28位男性和10位女性,平均年龄61.3岁。所有患者均行3.0T磁共振检查(Magnetom Verio 3T, Siemens, Germany)。各扫描序列为:横断位脂肪抑制T2WI,其脂肪抑制技术采用FS (fat saturation);横断位双回波T1WI正相位和反相位;弥散加权成像(diffusion-weighted imaging, DWI); T1WI平扫及增强采用三维容积内插体部检查序列(volume interpolated body examination,VIBE);注射钆塞酸二钠(Gd-BOPTA,MultiHance, 0.1 mmol/kg)后,增强扫描各期时间分别为动脉期(25-30s),门脉期(60-70s),延迟期(10 min),肝胆特异期(90 -100 min)。DWI序列我们选择的b值为0和800 sec/mm2, ADC值通过工作站系统(Syngo Multimodality workplace, Siemens,Germany)重建而成。ADC 值的计算公式为:ADC=-ln(s(b=800)/s(b=0))/800,其中 S (b=800)、S (b=0)分别为 b=800 sec/mm2和b=0 sec/mm2时相对应的DWI图像的信号。我们使用感兴趣区(regions of interest, ROI)测量病灶在ADC图上的ADC值。病灶内感兴趣区的范围要尽可能的大(感兴趣区范围:100.1 mm2-4577.9mm2)。感兴趣区要避开大血管、出血区域、坏死区域及伪影区域。我们计算出所有病灶的平均ADC值,其计算公式为其中n表示一个病灶所含有的ROI的个数,Si为第i个感兴趣区面积的大小,ADCi为第i个ROI的ADC的平均值。外科医师将肿瘤切除后将标本送至病理科,完成对标本的免疫组化染色。当细胞核的染色为棕褐色时,被认为Ki-67染色阳性。Ki-67染色指数指1000个细胞中阳性细胞核所占的百分比。当≤10%的肿瘤细胞显示细胞核染色时,被认为是低Ki-67染色;当10%的肿瘤细胞显示细胞核染色时,被认为是高Ki-67染色。我们将16例中分化胆管细胞癌分为2组:低Ki-67染色的胆管细胞癌和高Ki-67染色的胆管细胞癌。我们分析了 16例中分化胆管细胞癌和22例低分化胆管细胞癌,应用斯皮尔曼等级相关系数(Spearman rank correlation coefficient)来分析低分化胆管细胞癌和中分化胆管细胞癌的Ki-67染色指数与ADC值之间的关系,使用t检验(Student' s t-test)来分析不同肿瘤组(低Ki-67染色的低分化胆管细胞癌、高Ki-67染色的低分化胆管细胞癌和中分化胆管细胞癌)之间ADC值的差异。对于以上所有的统计学分析,P0.05被认为有明显统计学差异。我们使用SPSS 17.0作为统计学分析软件。结果:我们一共研究了 16个中分化胆管细胞癌和22个低分化胆管细胞癌。其中,我们将16例中分化胆管细胞癌分为2组:一组为7例高Ki-67染色的胆管细胞癌,另一组为9例低Ki-67染色的胆管细胞癌。肝内肿块型胆管细胞癌的ADC值与Ki-67染色指数呈负相关(r=-0.699, P=0.000)。16例中分化胆管细胞癌的ADC值与Ki-67染色指数呈负相关(r=-0.633, P=0.025); 22例低分化胆管细胞癌的ADC值与Ki-67染色指数也呈负相关(r=-0.589,P=0.037)。低分化胆管细胞癌的平均ADC值(0.79×10-3 mm2/s±0.12× 10-3 mm2/s)要明显低于中分化胆管细胞癌的平均ADC值(0.95X 10-3 mm2/s±0.29×10-3 mm2/s)。高Ki-67的中分化胆管细胞癌的平均ADC值(0.78×10-3 mm2/s±0.15×10-3mm2/s)要明显低于低Ki-67的中分化胆管细胞癌的ADC值(1.21 X 10-3mm2/s±0.22×10-3 mm2/s)(P=0.008)。高 Ki-67 的中分化胆管细胞癌的平均ADC值与低分化胆管细胞癌的平均ADC值之间没有明显的统计学差异(P=0.621)。结论:研究表明肝内肿块型胆管细胞癌的ADC值与肿瘤的Ki-67染色指数之间存在着明显的负相关,ADC值可以反映肿瘤细胞的增殖活性,可应用DWI及ADC来预测肝内肿块型胆管细胞癌的分化程度。第三部分长链非编码RNA在子宫内膜癌中的表达及作用机制的研究目的:我们应用芯片技术研究长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)在子宫内膜癌及其邻近正常子宫内膜组织中的表达。方法:在这次研究中,我们使用了 45例经病理证实的子宫内膜癌标本以及其邻近的正常子宫内膜组织标本,所有的标本在手术切除后迅速冷冻在液氮里,然后接着保存在-80℃的冰箱里。我们应用第三代lncRNA芯片分析技术(Arraystar公司的人类LncRNA芯片分析V3.0)来检测子宫内膜癌及邻近正常子宫内膜组织中的lncRNA和mRNA。为了进一步了解lncRNA的生化功能,我们还进行了生物信息学分析(生物学通路分析和基因本体分析)。为了更进一步研究lncRNA和子宫内膜癌发生及发展的关系,我们还进行了亚组分析(subgroup analysis)。此外,我们应用定量实时聚合酶链反应技术(qRT-PCR)技术验证了在子宫内膜癌组织中异常表达的lncRNA与其经芯片分析数据结果的一致性。结果:在我们的研究中,在子宫内膜癌标本中共监测到30586个lncRNA和26109个mRNA (倍数2倍),与正常子宫组织相比,有4010个lncRNA的表达是上调的,有3350个lncRNA的表达是下降的.在qRT-PCR分析中,有7个lncRNA与芯片分析的结果一致,包括3个表达升高的lncRNA(uc003xut, uc021re1.1,ENST00000445734)和 4 个表达下降的 lncRNA (uc002nbr.3, ENST00000502941,ENST00000448093, ENST00000503710),其中 uc003xut 和 ENST00000502941 分别是表达升高的lncRNA和表达下降的lncRNA中表达最为显著的。此外,生物学通路分析表明有24条通路与表达升高的mRNA有关,其中“Neuroactive ligand-receptor interaction - Homo sapiens (human)” 通路包含 62 个靶基因,是表达最富集的一条通路;有27条通路与表达下降的mRNA有关,其中“Neuroactive ligand-receptor interaction - Homo sapiens (human)” 通路包含 48 个靶基因,同样是表达最富集的一条通路。结论:我们的研究表明,与正常的子宫组织相比,子宫内膜癌组织中有大量的lncRNA的表达发生了变化,这表明lncRNA可以作为一项潜在的诊断标记物应用于子宫内膜癌的诊断和治疗。
[Abstract]:The features of Gd - BOPTA enhanced MR imaging were studied in 66 patients with hepatic mass - forming cystic carcinoma ( IMC ) . We analyzed the image of DWI sequences and calculated the ADC values for each tumor . Results : We studied 66 patients with intrahepatic masses type bile duct carcinoma . Results : In the dynamic contrast - enhanced scan , 57 lesions ( 86.4 % ) showed peripheral annular low signal , and the middle is high signal . In addition , 57 lesions ( 86.4 % ) showed peripheral high signal and middle non - uniform low or mixed signal . In the liver and gallbladder - specific period , the degree of enhancement ( 48.2 % 卤 15.6 % ) of the medium - differentiated biliary cell carcinoma was higher than that of the low - differentiated bile duct carcinoma ( 35 . 5 % 卤 18 . 9 % ) , and the degree of enhancement ( 47.6 % 卤 18 . 8 % ) of the bile duct cell carcinoma with lymph node metastasis was higher than that of the bile duct cell carcinoma without lymph node metastasis ( 33.7 % 卤 19.6 % ) . In addition , the ADC value of poorly differentiated biliary cell carcinoma ( 0.75 脳 10 - 3 mm2 / s 卤 0.18 脳 10 - 3 mm2 / s ) was lower than that of the median differentiated biliary cell carcinoma ( 0.98 脳 10 - 3 mm2 / s 卤 0.22 X 10 - 3 mm2 / s ) . Conclusion : The most common enhancement mode of intrahepatic mass - type biliary cell carcinoma is that the peripheral low signal , the central high signal , and the peripheral high signal of the intrahepatic mass - type bile duct carcinoma have been enhanced . The expression of Ki - 67 staining index ( Ki - 67 SI ) in the liver and gallbladder - specific period is more clear than that in the middle - differentiated bile duct cell carcinoma . All the scanning sequences were : transverse - position fat suppression T _ T _ 2 , FS ( fat saturation ) and FS ( fat saturation ) ; cross - sectional double - echo T 1WI plus phase and inverse phase ; diffusion - weighted imaging ( DWI ) ; T 1WI plain scan and enhancement were performed with three - dimensional volume interpolation body examination ( VIBE ) ; after gadolinium injection of disodium gadolinium ( Gd - BOPTA , Multitude , 0.1 mmol / kg ) , the duration of each phase was increased ( 25 - 30s ) , portal vein period ( 60 - 70s ) , delay period ( 10 min ) , and liver - gallbladder - specific period ( 90 - 100 min ) . DWI搴忓垪鎴戜滑閫夋嫨鐨刡鍊间负0鍜，

本文编号：1867127