人TRB3过表达载体的构建及检测

发布时间：2018-05-19 05:58

  本文选题：TRB + 过表达　； 参考：《东南大学学报(医学版)》2017年01期

【摘要】：目的:构建TRB3真核表达重组质粒,并用肝癌细胞MHCC-97H检测其表达。方法:从肝癌组织中提取并扩增TRB3基因的编码区,将其克隆到真核表达载体pcdh-CMV-MCS-GFP中,酶切并检定,将克隆成功的质粒转染至MHCC-97H细胞中,用q PCR和Western Blot检测TRB3的表达水平。结果与结论:成功扩增了TRB3的编码区,并克隆至真核表达载体中;转染后72、96 h,MHCC-97H细胞的TRB3 m RNA和蛋白表达显著增高;成功构建的TRB3过表达载体可用于后续实验。
[Abstract]:Aim: to construct the eukaryotic expression plasmid of TRB3 and detect its expression by MHCC-97H. Methods: the coding region of TRB3 gene was extracted from hepatocellular carcinoma and cloned into eukaryotic expression vector pcdh-CMV-MCS-GFP. The cloned plasmid was transfected into MHCC-97H cells by restriction endonuclease digestion. The expression level of TRB3 was detected by Q PCR and Western Blot. Results and conclusion: the coding region of TRB3 was amplified successfully and cloned into eukaryotic expression vector, the expression of TRB3 m RNA and protein in MHCC-97H cells was significantly increased after 72 ~ 96 h transfection, and the successfully constructed TRB3 overexpression vector could be used for further experiments.
【作者单位】： 南京医科大学上海一院临床医学院消化科;上海交通大学附属第一人民医院消化科;上海交通大学附属第九人民医院消化科;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81072007) 江苏省研究生培养创新工程项目(SJLX15_0433)
【分类号】：R735.7

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本文编号：1908974