BCL6B对人结直肠癌LoVo细胞增殖和迁移的影响及机制
本文选题:BCLB + 结直肠癌 ; 参考:《中国病理生理杂志》2017年01期
【摘要】:目的:研究B细胞白血病/淋巴瘤6B(BCL6B)在人正常肠上皮细胞FHC及结直肠癌细胞LoVo中的表达水平及BCL6B对LoVo细胞增殖和迁移的影响,并探讨其相关分子机制。方法:采用RT-PCR及Western blot检测FHC细胞和LoVo细胞中BCL6B的内源性表达;用脂质体法将重组质粒pc DNA3.1-BCL6B转入LoVo细胞,运用MTT、集落形成、细胞划痕及Transwell小室实验检测BCL6B对LoVo细胞增殖和迁移的影响,采用RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,Western blot检测蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。结果:与正常肠上皮细胞FHC相比,BCL6B在LoVo细胞中呈明显低表达;转染pc DNA3.1-BCL6B后的LoVo细胞内BCL6B水平显著增高。过表达BCL6B的实验组细胞72 h的增殖活性及划痕愈合力分别较对照组降低28.33%(P0.01)和36.11%(P0.05)。实验组细胞cyclin D1和MMP-9的m RNA水平分别降低39.90%(P0.01)和77.36%(P0.05),同时cyclin D1、MMP-9和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白水平分别降低44.00%(P0.05)、47.06%(P0.01)和32.88%(P0.05)。结论:BCL6B可抑制结直肠癌LoVo细胞的增殖和迁移,其机制可能涉及PI3K/AKT信号通路的抑制。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression of B-cell leukemia / lymphoma 6BCL6B in human normal intestinal epithelial cells (FHC) and colorectal cancer cells (LoVo) and the effect of BCL6B on the proliferation and migration of LoVo cells. Methods: the endogenous expression of BCL6B in FHC cells and LoVo cells was detected by RT-PCR and Western blot, and the recombinant plasmid pcDNA3.1-BCL6B was transfected into LoVo cells by liposome method. The effects of BCL6B on the proliferation and migration of LoVo cells were detected by cell scratch and Transwell chamber assay. The expression of cyclin D1 and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) were detected by RT-PCR and Western blot. The phosphorylation of protein kinase (BK) was detected by Western blot. Results: the expression of BCL6B in LoVo cells was significantly lower than that in normal intestinal epithelial cells, and the level of BCL6B in LoVo cells transfected with pcDNA3.1-BCL6B was significantly higher than that in normal intestinal epithelial cells. Compared with the control group, the proliferation activity and scratch healing ability of the experimental group were lower than that of the control group (P 0.01) and 36.11% P 0.05 respectively. The mRNA levels of cyclin D1 and MMP-9 in the experimental group were decreased by 39.90 and 77.36, respectively, while the protein levels of cyclin D1MP-9 and phosphorylated protein kinase BP-AKT were decreased by 44.00 and 47.06 and 32.88P0.05, respectively. Conclusion: BCL6B can inhibit the proliferation and migration of LoVo cells in colorectal cancer, and its mechanism may be related to the inhibition of PI3K / AKT signaling pathway.
【作者单位】: 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室;
【分类号】:R735.3
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,本文编号:1998703
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