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IL-1β预刺激骨髓间充质干细胞通过NF-κB通路调节其成骨分化潜能

发布时间:2018-06-22 17:37

  本文选题:骨髓间充质干细胞 + 多发性骨髓瘤 ; 参考:《中国实验血液学杂志》2017年03期


【摘要】:目的:研究不同作用时间的IL-1β对骨髓间充质干细胞(BMMSC)成骨潜能的影响以及NF-κB等通路在其中的作用。方法:将正常人BMMSC在体外给予IL-1β处理1或7 d,再予成骨诱导分化后分别采用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色(ARS)方法检测BMMSC成骨分化;采用real-time PCR法检测BMMSC中IGF-1、EphB4和OPG基因mRNA表达水平;细免疫组织化学染色方法检测BMMSC的BMP-2和p-Smad1/5/8蛋白表达情况;Western blot方法检测BMMSC中iκBα和p-iκBα蛋白的表达水平,并将IL-1β处理组的结果与对照组比较。结果:与对照组相比较,IL-1β处理组BMMSC的成骨分化潜能明显增强,但这一差异可被NF-κB抑制剂减弱;另外,处理组的iκBα蛋白水平的表达降低(P0.05),p-iκBα蛋白水平的表达增高(P0.05);与此同时,处理组BMMSC的BMP-2表达水平增高,但p-Smad1/5/8的表达水平无明显变化;IL-1β处理组BMMSC的IGF-1、EphB4、OPG mRNA表达水平上调(P0.05)。与成骨结果比较显示,IL-1β处理1 d组与对照组的差异,不如IL-1β处理7 d组明显。结论:骨髓微环境中高水平IL-1β长期作用于BMMSC,可以通过NF-κB通路而不是BMP-2/Smad通路对其成骨分化产生影响。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of IL-1 尾 on osteogenic potential of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) and the role of NF- 魏 B pathway. Methods: normal BMMSC were treated with IL-1 尾 for 1 or 7 days in vitro, then osteogenic differentiation was induced by alkaline phosphatase (ALP) staining and alizarin red staining (ARS) respectively. The osteogenic differentiation of BMMSC was detected by alkaline phosphatase (ALP) staining and alizarin red staining (ARS). The expression levels of IGF-1EphB4 and OPG genes in BMMSC were detected by real-time polymerase chain reaction, and the expression of BMP-2 and p-Smad1 / 5 / 8 protein in BMMSC was detected by immunohistochemical staining. The expression levels of I 魏 B 伪 and p-i 魏 B 伪 proteins in BMMSC were detected by Western blot. The results of IL-1 尾 treatment group were compared with that of control group. Results: compared with the control group, the osteogenic differentiation potential of BMMSC treated with IL-1 尾 was significantly increased, but this difference could be weakened by NF- 魏 B inhibitor, in addition, the expression of I 魏 B 伪 protein decreased (P0.05) and the expression of p-i 魏 B 伪 protein increased (P0.05) in the treated group. The expression of BMP-2 in BMMSC was increased, but the expression of p-Smad1 / 5 / 8 was not changed significantly in BMMSC treated with IL-1 尾. The expression of IGF-1EphB4OPG mRNA was up-regulated in BMMSC treated with IL-1 尾 (P0.05). The results of osteogenesis showed that the difference between IL-1 尾 treatment group and control group was not as obvious as that of IL-1 尾 treatment group for 7 days. Conclusion: the high level of IL-1 尾 in bone marrow microenvironment can affect the osteogenic differentiation of BMMSCB through NF- 魏 B pathway rather than BMP-2 / Smad pathway.
【作者单位】: 江苏大学附属医院血液科;江苏大学附属医院风湿科;
【分类号】:R733.3

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号:2053614

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