CRIP1生物学功能的定量蛋白质组学分析

发布时间：2018-11-24 21:08

【摘要】：CRIP1(cysteine-rich intestinal protein 1)是含有双锌指结构域的蛋白,在很多肿瘤细胞中高表达,但其在肺癌细胞中的生理学功能尚不明确。本研究应用定量蛋白质组学探究CRIP1过表达对肺癌顺铂耐药细胞(A549/DDP)的影响及作用机制。运用慢病毒载体系统构建了CRIP1过表达的A549/DDP稳转细胞系,利用Western Blotting证实了单克隆细胞系中CRIP1的过表达。发现CRIP1过表达能够加快细胞增殖,增加细胞的耐药性。通过定量蛋白质组学分析,鉴定了CRIP1过表达引起的蛋白质组的变化,并且对上调和下调的蛋白进行聚类分析。结果表明,CRIP1过表达上调了烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)和NAD依赖型氧化还原酶的表达,从而促进细胞的增殖,并且提高了细胞的耐药性。
[Abstract]:CRIP1 (cysteine-rich intestinal protein 1), a protein containing double zinc finger domain, is highly expressed in many tumor cells, but its physiological function in lung cancer cells is unclear. In this study, quantitative proteomics was used to investigate the effect of CRIP1 overexpression on cisplatin resistant lung cancer cells (A549/DDP) and its mechanism. A stable A549/DDP cell line with overexpression of CRIP1 was constructed by using lentivirus vector system, and the overexpression of CRIP1 was confirmed by Western Blotting. It was found that overexpression of CRIP1 could accelerate cell proliferation and increase cell resistance. The proteome changes caused by CRIP1 overexpression were identified by quantitative proteomics analysis, and the up-regulated and down-regulated proteins were analyzed by cluster analysis. The results showed that overexpression of CRIP1 upregulated the expression of nicotinamide phosphate ribonucleosyltransferase (NAMPT) and NAD dependent oxidoreductase (NAD), which promoted cell proliferation and increased cell resistance.
【作者单位】： 清华大学生命科学学院教育部生物信息学重点实验室;
【基金】：科技部973项目(2014CBA02005)资助
【分类号】：R734.2

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本文编号：2355065