Aurora A作为Luminal A型乳腺癌新型风险评估标记物及潜在的治疗靶点的研究

发布时间：2019-01-23 08:45

【摘要】：研究背景根据ER、PR、her-2、Ki67的表达情况可将乳腺癌分为预后相对较好的Luminal A型、Luminal B型和预后相对较差的Her-2过表达型、三阴性乳腺癌。作为一种高异质性肿瘤,不同分子分型的乳腺癌患者的预后存在巨大差异,即使在Luminal A型乳腺癌中,仍有一部分患者的预后接近三阴性患者,由此可见目前的乳腺癌分子分型仍不够完善。因此,在乳腺癌各分子亚型中进一步寻找有预后意义的分子标记物具有重要的临床意义。Aur-A作为细胞有丝分裂期的关键激酶,与多种肿瘤的发生有密切的联系,但其是否可作为乳腺癌的独立预后因素仍存在争论。同时Aur-A对乳腺癌患者的预后中的具体分子机制尚不清楚,有待进一步深入研究。实验目的初步探讨Aur-A是否可作为不同亚型乳腺癌中进一步区分预后的更准确的风险标记物。通过分子信号通路的研究,更好的了解Aur-A的生物学功能及其作用机制。实验方法(1)利用310例,具备12年完整随访资料的人乳腺癌组织芯片,进行免疫组化染色,分析Aur-A在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系。通过进一步分层分析了解Aur-A是否能筛选出各型乳腺癌患者中预后不良的亚群。(2)以代表Luminal A型乳腺癌的MCF-7细胞系作为体外实验的研究对象,运用siRNA敲除MCF-7细胞中的Aur-A或使用Aur-A选择性抑制剂Amg900抑制Aur-A的活性,通过克隆形成、CCK-8细胞增殖、划痕实验、transwell侵袭、迁移实验等实验方法研究Aur-A在Luminal A型乳腺癌的增殖及侵袭转移中的作用。用Western blot和RT-PCR方法探索Aur-A发挥相应作用的分子机制。(3)运用MCF-7细胞分别建立慢病毒敲除的荷瘤模型和Amg900抑制剂的药物干预模型,两组模型分别设置相应的阴性对照和空白对照。观察两种模型瘤体生长速度：并运用免疫组化染色检测瘤体Aur-A、Ki67、Cofilin、P-Cofilin、PHH3以及Src的表达水平。实验结果第一部分：Aur-A在浸润性乳腺癌中高表达,310例患者中阳性表达率达到80.65%(250/310), Aur-A的阳性和阴性表达分布与年龄(P=0.451)、病理分级(P=0.318)、腋窝淋巴结转移(P=0.777)、肿瘤部位(P=0.387)、临床分期(P=0.902)、CK5/6(P=0.099)、AR (P=0.512)等无显著相关性：但与肿瘤大小(P=0.0.030)、ER(P=0.044)、PR(P=0.027)、Her-2 (P=0.000)、Ki-67 (P=0.013)、P53 (P=0.029)、EGFR(P=0.036)、Cofilin(P=0.000)、分子分型(P=0.000)等指标具有显著相关(P0.05)。Kaplan-Meie r生存分析显示,Aur-A过表达是乳腺癌不良预后的独立危险因素。进一步分层分析发现,Aur-A在LuminalA型乳腺癌中的表达与其预后有统计学意义(P=0.03)。单因素Cox回归分析结果示,Aur-A、ER、PR、EGFR、 AR、FAK、Cofilin、Aur-B、分子分型、肿瘤分期等指标具有统计学意义,然而多因素Cox分析中却只有Aur-A 和 Cofilin可作为独立预后因素。结果表明,Aur-A可作为Luminal A型乳腺癌患者预后评估的风险标记物。第二部分：基于第一部分实验,对Aur-A的生物学功能及作用机制展开初步研究。Aur-A在代表Luminal A型乳腺癌的MCF-7细胞株中高表达,使用siRNA敲除MCF-7细胞中的Aur-A或使用Aur-A选择性抑制剂Amg900抑制Aur-A的活化后,观察到其细胞增殖能力、迁移、侵袭能力、划痕愈合能力及克隆形成能力均明显减弱。siRNA敲除细胞内的Aur-A后Cofilin-F-actin通路的磷酸化程度增高,从而减少Cofilin活性的非磷酸化部分,导致Cofilin-F-actin通路的活性降低：另外Aur-A被敲除后上皮间质转化相关分子TGF-β、Snail、Vimentin表达下降,E-cadherin蛋白表达升高；Src、FAK等侵袭转移相关的分子亦发生相应改变。这些信号通路中的改变均有可能是Aur-A导致乳腺癌不良预后的分子机制。第三部分：裸鼠成瘤及抑制剂干预实验结果表明,Aur-A病毒敲除细胞系在裸鼠体内成瘤体积和重量明显小于对照组;在MCF-7裸鼠成瘤模型中给予Aur-A的选择性抑制Amg900可有效的控制肿瘤的生长。同时免疫组化结果示Aur-A敲除后裸鼠体内成瘤中的Cofilin、PHH3等的表达无明显的差异性,但Aur-A、Src、Ki67的表达量明显低于对照组,P-Cofilin明显高表达。结论Aur-A可作为乳腺癌的独立预后因素；对于Luminal A型乳腺癌,其预后意义尤为显著。Aur-A作为上游基因可调控Cofilin-F-actin、Src、FAK 及 EMT相关因子TGF-β、Snail、 Vimentin、E-cadherin等蛋白的表达,通过其它多条侵袭转移相关信号通路的分子共同作用,实现对肿瘤细胞侵袭转移的调控。Aur-A有望成为Lumianl A型乳腺癌预后风险评估的标记物及潜在的治疗靶点。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 黄啸原;用“印度阅兵”形容乳腺癌合适吗?[J];诊断病理学杂志;2001年02期

2 张嘉庆,王殊,乔新民;乳腺癌的现状和远景[J];中华外科杂志;2002年03期

3 张维彬,汪波,石灵春;中医药在现代乳腺癌治疗中的运用[J];中国中西医结合急救杂志;2002年01期

4 薛志勇;食物与乳腺癌[J];山东食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建军,郑国华;乳腺癌相关标志物的研究进展[J];山东医药;2002年33期

6 陆尚闻;;男人也患乳腺癌[J];环境;2003年12期

7 ;新技术清晰拍摄早期乳腺癌细胞[J];上海生物医学工程;2005年04期

8 田富国;郭向阳;张华一;;乳腺癌诊治研究新进展[J];肿瘤研究与临床;2005年S1期

9 马涛,谷俊朝;血管内皮生长因子与乳腺癌的临床研究进展[J];国外医学(外科学分册);2005年01期

10 郭庆良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相关性研究进展[J];国外医学.外科学分册;2005年03期

相关会议论文 前10条

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治疗融合蛋白[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

2 郭红飞;;中医治疗乳腺癌的策略[A];江西省中医、中西医结合肿瘤学术交流会论文集[C];2012年

3 庞朋沙;伍会健;;乳腺癌治疗靶标的研究进展[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年

4 陆劲松;邵志敏;吴炅;韩企夏;沈镇宙;;新型维甲酸抑制乳腺癌细胞的生长及诱导凋亡的机制研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

5 刘爱国;胡冰;;乳腺癌临床治疗进展[A];安徽省抗癌协会第四次代表大会暨乳腺癌、肺癌专业委员会成立会议、安徽省肿瘤防治进展学术研讨会论文汇编[C];2001年

6 张嘉庆;王殊;乔新民;;乳腺癌的现状和远景[A];第一届全国中西医结合乳腺疾病学术会议论文汇编[C];2002年

7 刘清俊;;乳腺癌综合治疗的新进展[A];山西省抗癌协会第六届肿瘤学术交流会论文汇编[C];2003年

8 邵志敏;;21世纪乳腺癌治疗的展望[A];第三届中国肿瘤学术大会教育论文集[C];2004年

9 陈松旺;张明;;乳腺癌治疗的回顾与展望[A];西部地区肿瘤学学术会议论文汇编[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凯阳;王兆钺;阮长耿;;组织因子途径抑制物-2在乳腺癌细胞中的表达研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

相关重要报纸文章 前10条

1 ;血检有望揭示乳腺癌治疗效果[N];医药经济报;2004年

2 记者 郑晓春;乳腺癌细胞扩散基因被找到[N];科技日报;2007年

3 中国军事医学科学院肿瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新疗法[N];中国妇女报;2002年

4 王艳红;抑制ＤＮＡ修补可消灭乳腺癌细胞[N];医药经济报;2005年

5 詹建;乳腺癌饮食 两个时期不一样[N];中国中医药报;2006年

6 辛君;乳腺癌扩散基因“浮出水面”[N];大众卫生报;2009年

7 记者 毛黎;美发现有效抑制乳腺癌细胞生长的分子[N];科技日报;2010年

8 记者 吴春燕　通讯员 王丽霞;乳腺癌治疗将有新途径[N];光明日报;2011年

9 王乐　沈基飞;我科学家发现导致乳腺癌耐药的新标志物[N];科技日报;2011年

10 刘霞;一种天然分子能阻止乳腺癌恶化[N];科技日报;2011年

相关博士学位论文 前10条

1 柴红燕;疾病状态下CYP4Z1和4A的生物学行为及其药物干预研究[D];武汉大学;2012年

2 李凯;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白调控乳腺细胞的分化并影响乳腺癌的预后[D];复旦大学;2014年

3 江一舟;乳腺癌新辅助化疗前后基因变异检测及其功能论证[D];复旦大学;2014年

4 马邵;酪氨酸去磷酸化增强表皮生长因子受体在乳腺癌治疗中靶向性的研究[D];山东大学;2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基转移酶PRMT7诱导乳腺癌细胞发生表皮—间质转换及转移的作用机制研究[D];东北师范大学;2015年

6 侯培锋;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上调缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)诱发高致瘤性干细胞样乳腺癌细胞机制研究[D];福建医科大学;2014年

7 李丽丽;分泌蛋白SHON调控乳腺癌细胞EMT的分子机制研究[D];东北师范大学;2015年

8 陈丽艳;PI3K抑制剂联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乳腺癌协同杀伤作用的分子机制研究[D];延边大学;2015年

9 朴俊杰;乳腺癌差异基因筛选及PAIP1对其生物学行为的影响[D];延边大学;2015年

10 汪[?如;染色体6q25.1区域基因多态性与乳腺癌遗传易感性的关联研究[D];南方医科大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 杜文英;乳腺癌分子亚型的临床与病理特点[D];郑州大学;2011年

2 贾晓菲;彩色多普勒超声与乳腺癌病理及免疫组化指标的相关性研究[D];内蒙古大学;2015年

3 靳文;乳腺癌全基因组DNA甲基化修饰的研究[D];内蒙古大学;2015年

4 吴坤琳;TLR4/MyD88信号通路对乳腺癌侵袭性影响的实验研究[D];福建医科大学;2015年

5 葛广哲;树，

本文编号：2413642