长链非编码RNA BCYRN1在胃癌中发挥的生物学功能及临床应用研究

发布时间：2019-02-14 17:12

【摘要】：第一部分长链非编码RNA BCYRN1在胃癌组织中的表达情况及生物学功能研究目的:检测胃癌组织中lncRNABCYRN1表达情况,并分析其与胃癌患者临床病理参数之间的关系;体外调控BCYRN1基因的表达水平,进行相关细胞功能实验,寻找下游靶基因,探究BCYRN1在胃癌中发挥的生物学功能和调控机制。方法:1.采用实时荧光定量聚合酶链反应方法(qRT-PCR)检测lncRNA BCYRN1在56例胃癌患者癌组织及癌旁组织中的表达水平,收集患者临床病理资料,分析BCYRN1表达水平与患者临床病理参数之间的关系。2.采用脂质体2000将含BCYRN1的质粒和空白质粒转染到BGC-823和SGC-7901细胞,将si-BCYRN1或si-NC转染到AGS细胞中。采用qRT-PCR方法检测转染效率;采用CCK-8、细胞平板克隆形成实验、transwell实验以及流式细胞术检测细胞周期和凋亡,检测细胞增殖、迁移、凋亡等情况的变化。3.用qRT-PCR检测胃癌患者癌组织中EpCAM的表达水平,分析与BCYRN1表达之间的相关性;过表达或低表达BCYRN1后,检测EpCAM的mRNA和蛋白质的含量变化。结果:1.lncRNABCYRN1在胃癌癌组织中表达量高于癌旁组织(P0.0001),其表达水平与肿瘤的TNM分期有关,与年龄、性别、肿瘤大小、远处转移等其他临床病理参数无关。2.在BGC-823和SGC-7901中,转染pcDNA-BCYRN1组比转染empty vector组的BCYRN1表达量明显升高(P均0.0001);在AGS细胞系中,转染si-BCYRN1组比si-NC组的BCYRN1表达量显著降低(P0.01);CCK-8结果显示,与阴性对照组相比,过表达了 BCYRN1的细胞在检测的48小时、72小时增殖速度明显增加(P均0.05);在进行低表达的细胞中,si-BCYRN1组其增殖速度在检测的第48、72小时较对照组有明显降低(P均0.05);过表达BCYRN1的细胞形成的克隆数多于阴性对照组(BGC-823细胞中P0.01,SGC-7901细胞中P0.05),低表达目的基因的AGS细胞形成的克隆数目少于阴性对照组(P0.01);过表达BCYRN1的细胞其细胞周期G1/G0期出现明显的降低(BGC-823:P0.001,SGC-7901:P0.01),S 期和 G2/M 期显著增加(BGC-823:P0.01,SGC-7901:P0.05),在 AGS 细胞中,BCYRN1的低表达引起了 G2/M期的显著降低(P0.0001)和G1/G0期的增加(P0.01);高表达了 BCYRN1的细胞在经历了无血清处理后其早期凋亡的细胞少于对照组(BGC-823:P0.001,SGC-7901:P0.01),干扰 BCYRN1 表达后,早期凋亡的AGS细胞比对照组有所增加(P0.01);在Transwell实验中,高表达了BCYRN1的细胞穿膜细胞数高于阴性组(P均0.05);抑制BCYRN1表达穿膜细胞数低于阴性对照(P0.01)。差异均有统计学意义。3.BCYRN1和EpCAM在胃癌癌组织中的表达呈正相关(r=0.468,P0.01)。在上调了 BCYRN1的BGC-823及SGC-7901两种细胞中EpCAM的mRNA表达水平均显著增高,抑制BCYRN1表达的AGS细胞中EpCAM的mRNA明显降低;western blot实验提示蛋白变化与mRNA的变化趋势一致。结论:lncRNABCYRN1在胃癌中高表达,有促进细胞增殖、迁移,增强细胞耐缺血清环境的能力,同时可调节EpCAM的表达,在胃癌中发挥癌基因的作用。第二部分血清长链非编码RNA BCYRN1的检测及其对胃癌诊断和预后价值的评估目的:检测胃癌患者血清中长链非编码RNA(lncRNA)BCYRN1表达水平,分析其与患者临床特征的关系,探讨其在胃癌诊断中的价值。方法:1.采用病例对照研究方法。采用qRT-PCR对2014年11月至2015年7月山东大学齐鲁医院收治的124例胃癌患者、41例萎缩型胃炎患者、59名健康体检者血清中的lncRNABCYRN1的表达水平进行检测。2.采用电化学发光免疫分析法检测血清中癌胚抗原(CEA)、糖类抗原72-4(CA72-4)。3.对31例成功接受胃癌根治术的患者手术前及术后3、7、10、30、100 d血清lncRNABCYRN1水平进行动态监测。4.应用ROC曲线分析lncRNABCYRN1、CEA及CA72-4诊断胃癌的敏感度和特异度。两组间比较采用Mann-Whitney U检验,多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验。结果:1.胃癌患者血清BCYRN1表达水平Ⅰ + Ⅱ期组[1.041(0.794,1.462)]及Ⅲ + Ⅳ期组[1.290(0.978,1.794)]较癌前病变组[0.969(0.699,1.219)]、健康对照组[0.801(0.556,1.599)]有明显升高(H=54.68,P0.0001)。2.与术前[1.120(0.859,1.663)]相比,胃癌患者血清lncRNA BCYRN1表达水平在术后 10 d[0.903(0.724,1.182)](U=55.0,P0.0001)、30 d[0.759(0.671,1.037)](U=299.0,P=0.0261)、100 d[0.478(0.378,0.635)](U=41.0,P0.0001)均有显著降低。3.血清lncRNA BCYRN1诊断胃癌的曲线下面积(AUC)为0.865,高于CA72-4(AUC=0.699)及 CEA(AUC=0.807)。三者联合检测 AUC 为 0.934。结论:胃癌患者血清中lncRNA BCYRN1表达水平明显升高,lncRNA BCYRN1有望作为胃癌诊断及疗效监测的潜在生物标志物。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.2

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 倪国汉;低场强MRI在胃癌诊断中的作用[J];放射学实践;2002年02期

2 戴成雨;胃癌20例误诊分析[J];实用医学杂志;2002年03期

3 李秋波,陶智慧,胡奎,韩智,马勇;胃癌术前区域动脉灌注化疗加手术联合治疗的疗效观察(附24例)[J];航空航天医药;2003年03期

4 倪海滨,毛振彪,黄介飞,肖明兵,季颖林,张彦亮,冒海蕾;血清可溶性细胞间粘附分子-1与胃癌临床意义的研究[J];南通医学院学报;2003年01期

5 邢亚莉;姚春霞;唐晓君;刘春梅;;彩超在胃癌诊断中的价值[J];基层医学论坛;2007年17期

6 ;日本专家用新技术提高胃癌诊断准确率[J];生物医学工程与临床;2009年02期

7 ;新技术能提高胃癌诊断准确率[J];中华中医药学刊;2009年07期

8 高春光;;胃癌患者的临床治疗体会[J];中国民族民间医药;2009年14期

9 高瑞凤;朱晔;刘兴姣;;37例进展期胃癌的超声分析[J];中国实用医药;2010年25期

10 姜可伟;;规范全球第二大致死率疾病的诊断——《胃癌诊断标准》解读[J];中国卫生标准管理;2010年04期

相关会议论文 前10条

1 武淑兰;魏志杰;殷宇明;;胃癌致微血管病性溶血性贫血的诊断[A];第十一届全国红细胞疾病学术会议暨学习班论文汇编[C];2007年

2 丁涛;;超声在诊断胃癌中的应用[A];中国超声医学工程学会第三届全国肌肉骨骼超声医学学术交流会论文汇编[C];2011年

3 陈晓康;吕国荣;苏若瑟;;应用彩色能量多普勒血流显像对胃癌的诊断价值[A];庆祝中国超声医学工程学会成立20周年——第八届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2004年

4 于吉人;;胃癌的术前系统评估[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年

5 杨军乐;宁文德;董季平;徐敏;;多层螺旋CT在胃癌诊断中的应用研究[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编（下册）[C];2006年

6 张晓鹏;;胃癌磁共振成像研究进展[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议教育集[C];2006年

7 张丽红;常维平;黄贤会;;螺旋CT在特殊部位胃癌诊断中的应用[A];中国医师协会放射医师分会首届会员大会暨第四届医学影像山东论坛、山东省第16次放射学会议暨山东省第14届医学影像学学术研讨会论文集[C];2007年

8 陈静;;彩色多普勒超声检查在胃癌的应用[A];中国超声医学工程学会第七届全国腹部超声学术会议学术论文汇编[C];2007年

9 刘池波;梁勇;王海宝;杨林军;梁津逍;;胃癌患者中血清淀粉样蛋白A的测定及临床意义[A];第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议论文集[C];2008年

10 吴厚宾;;腹腔镜在胃癌诊治中的应用进展(综述)[A];江西省第二届胃肠外科学术会议暨江西省第十二次中西医结合普通外科学术会议论文汇编[C];2012年

相关重要报纸文章 前10条

1 钱铮;新技术能提高胃癌诊断准确率[N];中国中医药报;2009年

2 记者 陈青;胃癌患者从“存活”迈向“乐活”[N];文汇报;2010年

3 李楠;胃癌诊断敏感性从不足30%提高到57.4%[N];健康报;2008年

4 通讯员 李楠;胃癌“转化医学”研究见成效[N];上海科技报;2008年

5 记者 楚燕　通讯员 那伟 高树灼;厦门胃癌研究达国际领先水平[N];厦门日报;2009年

6 胡德荣;新型胃癌分子标志物研究获突破[N];中国医药报;2010年

7 本报记者 周芳;改善饮食习惯 早发现早治疗[N];吉林日报;2006年

8 中南大学湘雅二医院 杨燕贻;胃癌防治有哪些错误观念[N];大众卫生报;2005年

9 特约记者 程守勤;胃癌诊断又有新方法[N];家庭医生报;2003年

10 重庆万州 黄琼;胃癌的手术治疗[N];上海中医药报;2013年

相关博士学位论文 前10条

1 孙大志;基于microRNA 21的调控作用探讨从痰论治胃癌的作用机制[D];中国人民解放军医学院;2012年

2 陈悦之;TNFAIP8在胃癌中的表达和对调节胃癌细胞增殖，，影响侵袭及迁移中的作用研究[D];山东大学;2015年

3 殷继鹏;肿瘤血管靶向肽GX1用于胃癌的分子影像研究[D];第四军医大学;2015年

4 蔡习强;TFEB介导的自噬在胃癌耐药中的作用及其机制研究[D];第四军医大学;2015年

5 赵晓迪;microRNA-7调控胃癌恶性生物学行为的功能与分子机制研究[D];第四军医大学;2015年

6 尚华;MicroRNA-125a在胃癌中表达水平的研究及其临床意义[D];山东大学;2015年

7 关中正;TGF-β在胃癌免疫逃逸中作用及机制研究[D];山东大学;2015年

8 黄勇;AEG-1/MT qDH、NF-κB、MMP-9在胃癌中的表达及相关性的研究[D];山东大学;2015年

9 谢黎明;胃癌中miR-124表达的意义及作用机制研究[D];南华大学;2015年

10 刘佳宁;SOX9和CEACAM1在胃癌组织中表达及其对胃癌细胞增殖和转移的影响[D];山东大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 徐海蓉;胃癌危险因素的流行病学研究[D];南京医科大学;2002年

2 张军利;p27、PTEN与VEGF蛋白在胃癌组织中的表达及其意义[D];泰山医学院;2014年

3 马春婷;胃癌与幽门螺杆菌的相关性研究[D];石河子大学;2015年

4 王士杰;腹腔镜手术治疗进展期远端胃癌的临床疗效及患者术后随访生存质量研究[D];中国人民解放军医学院;2015年

5 李浩;胃癌血清蛋白标记物的筛选与鉴定[D];郑州大学;2015年

6 王巍;胃癌患者血液样品的光谱分析[D];郑州大学;2015年

7 李玉博;高场磁共振在胃癌术前T分期与分级的价值[D];郑州大学;2015年

8 张苏钰;SOX4和P53蛋白在胃癌组织中的表达及贞芪扶正胶囊对胃癌术后辅助治疗作用的观察[D];兰州大学;2015年

9 马来阳;能谱CT成像在胃癌术前分期及分化程度评价中的应用研究[D];兰州大学;2015年

10 侯向红;HORMAD2在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响[D];兰州大学;2015年

本文编号：2422424