CD147对T细胞谱系的维持作用及作为肿瘤免疫治疗靶点的机制研究

发布时间：2019-04-25 10:40

【摘要】：CD147作为一个多功能的跨膜糖蛋白,高表达在多种肿瘤细胞表面,促进肿瘤的侵袭和转移。在肺癌和肝癌治疗中,CD147特异性抗体被证明是有效的治疗手段,并且已经商品化。在免疫系统中,CD147被认为是一个协同刺激分子受体,并能影响胸腺选择的结果。我们利用T淋巴细胞上特异性敲除CD147的小鼠模型进行研究CD147与胸腺发育之间的种种关系,发现在稳定的αβT细胞谱系发育过程中,CD147是必不可少的,失去CD147将导致传统T细胞发育受阻,促进DN期细胞和DP期细胞向NK-like细胞转化。CD147缺失导致的这种异常变化,是由于损害了Wnt信号通路,进而使TCF1激活失能,导致T细胞发育关键转录因子Bcl11b的表达异常。另外,CD147抗体封闭CD147的功能或者CD147特异性敲除可以使胸腺和外周的NK细胞数量增加,应用在小鼠黑色素瘤和原位肝癌移植瘤模型中发现,当CD147受到抑制,NK-like细胞的增加与抑瘤作用有很强的联系。因此,在肿瘤免疫治疗中,CD147可以作为一个有效的表面靶点去发挥免疫调节因子的作用。本课题主要有三个部分组成:第一部分:CD147~(T-KO)小鼠的表型变化我们科室成功获得了cd147的条件基因打靶小鼠(cd147t-ko),并且对它的表型进行了简单的分析。为了更清楚的弄明白cd147分子在t细胞发育过程中的作用,我们又重新对cd147t-ko小鼠进行了分析和深入研究。在本部分实验中,我们发现cd147t-ko小鼠的胸腺的大小和重量较同窝对照野生型小鼠的要小,其中的不同细胞类型也发生变化;而外周淋巴器官的大小、重量及其中的淋巴细胞种类并没有明显差异;综合这两部分实验结果,我们又分析了nk/nkt样细胞的表型变化,发现nk/nkt样细胞增加。综合所有实验结果,我们明确了t淋巴细胞上cd147的敲除对t细胞发育过程中的某些阶段产生影响,对某些细胞的产生和发育也有作用,这些结果从体内进一步验证了cd147对胸腺发育是必不可少的,也为我们研究cd147和t细胞发育之间的关系提供了良好的开端。第二部分:cd147影响nkt/nk-like细胞发育及其分子机制cd147的敲除阻断了t细胞发育过程中dn3-dn4阶段的发展,促进了innate样细胞发产生。那么,产生的过多的nk/nkt样细胞来源于哪里?cd147影响t细胞发育的作用机制又是什么,是否与notch或者wnt信号通路相关?在本部分实验中,我们利用标准的t细胞体外发育培养体系,即op9-dl1基质滋养细胞系与造血干细胞或t细胞共培养体系,对nk/nkt样细胞的来源在体外进行了分析研究,发现cd147敲除导致的nk/nkt样细胞增加,来源于不同发育时期的t细胞谱系的重编程;并且利用此共培养体系,对影响t细胞发育的两大信号通路,即notch通路和wnt通路进行了研究,成功的弄清楚了cd147影响了wnt信号通路中tcf1的表达,进而影响了bcl11b的表达及t细胞的发育。第三部分:cd147与小鼠肿瘤免疫治疗cd147作为一个广泛且可靠的的肿瘤生物标志物,在多种组织来源的肿瘤细胞表面的表达显著增高,并且在肿瘤患者治疗中与多种肿瘤的临床预后相关。并且在我们的研究中还发现,cd147在胸腺发育中功不可没,并且与nk/nkt细胞的产生密切相关,我们还深入的研究了其中的分子机制。那么,cd147与nk/nkt细胞之间的关系是否会成为cd147抗体抗肿瘤作用的另一个作用机制呢?研究这一问题必须在肿瘤模型中进行,小鼠黑色素瘤是研究nk/nkt细胞常用的肿瘤模型,小鼠原位肝癌移植瘤是研究CD147抗体抗肿瘤的主要工具。因此,我们利用小鼠黑色素瘤模型和原位肝癌移植瘤模型,利用多种实验方法在瘤内研究CD147与NK/NKT细胞之间的关系,发现CD147抗体治疗可以减缓两种肿瘤的生长速度,并且这种抑瘤作用跟NK-like细胞相关。这部分实验进一步拓展CD147抗体抗肿瘤作用的作用机制。
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【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R730.51

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