miRNA-101-3p靶向调控EZH2蛋白抑制胃癌细胞增殖和迁移

发布时间：2019-05-29 04:00

【摘要】：目的:研究微小RNA-101-3p(miRNA-101-3p)对人胃癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其可能的调控机制。方法:Real-time PCR检测2种人胃癌细胞和1种胃黏膜细胞中miRNA-101-3p和zeste增强子同源物2(EZH2)的表达水平;采用脂质体瞬时转染技术过表达miRNA-101-3p;流式细胞术检测miRNA-101-3p对胃癌细胞周期和凋亡的影响;Transwell实验、CCK-8法和台盼蓝染色法检测miRNA-101-3p对胃癌细胞迁移和增殖能力的影响;Western blot法检测EZH2的表达。结果:miRNA-101-3p在胃癌细胞的表达水平显著低于胃黏膜细胞(P0.05);过表达miRNA-101-3p后,流式细胞术结果显示胃癌细胞的S期比例减少,G0/G1期比例增加,早期凋亡率增加(P0.05);CCK-8法、台盼蓝染色法及Transwell实验结果显示胃癌细胞的增殖和迁移能力显著降低(P0.05);Western blot结果显示胃癌细胞中EZH2蛋白的表达明显下降(P0.05)。结论:miRNA-101-3p可能通过靶向负调控EZH2蛋白的表达抑制胃癌细胞的增殖和迁移,进而促进胃癌细胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to study the effect of microRNA-101-3p (miRNA-101-3p) on proliferation, apoptosis and migration of human gastric cancer cells and its possible regulatory mechanism. Methods: the expression of miRNA-101-3p and zeste enhancer homologue 2 (EZH2) in two kinds of human gastric cancer cells and one kind of gastric mucous membrane cells was detected by Real-time PCR, and the expression of miRNA-101-3p; was overexpressed by liposomes transient transfer technique. The effects of miRNA-101-3p on the cycle and apoptosis of gastric cancer cells were detected by flow cytometry, and the expression of EZH2 was detected by; Western blot assay. The effects of miRNA-101-3p on the migration and proliferation of gastric cancer cells were detected by Transwell assay, CCK- 8 assay and trypan blue staining. Results: the expression level of miRNA-101-3p in gastric cancer cells was significantly lower than that in gastric mucosa cells (P 0.05). After overexpression of miRNA-101-3p, the results of flow cytometry showed that the proportion of S phase decreased, the proportion of G 0 / G 1 phase increased, and the early apoptosis rate increased (P 0.05). The results of CCK-8 assay, trypan blue staining and Transwell assay showed that the proliferation and migration of gastric cancer cells were significantly decreased (P 0.05); Western blot). The expression of EZH2 protein in gastric cancer cells was significantly decreased (P 0.05). Conclusion: miRNA-101-3p may inhibit the proliferation and migration of gastric cancer cells by targeting negative regulation of EZH2 protein expression, and then promote apoptosis of gastric cancer cells.
【作者单位】： 山西医科大学汾阳学院医学检验系;山西医科大学医学影像学系;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81301426) 山西医科大学汾阳学院科研项目(No.2017B05)
【分类号】：R735.2

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