Sp100和LG268对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的影响及相关机制研究

发布时间：2019-08-07 13:56

【摘要】：第一部分ATRA诱导Sp100蛋白的表达及其对白血病NB4细胞增殖的影响目的:探讨Sp100在全反式维甲酸(ATRA)处理NB4细胞过程中的表达及其对NB4细胞增殖和周期的影响。方法:1μM的ATRA处理NB4细胞后,Q-PCR检测Sp100 m RNA的表达,Western blot检测Sp100蛋白的表达,间接免疫荧光(IF)检测Sp100定位的变化;采用慢病毒RNA干扰的方法干扰Sp100的表达后,观察Sp100-sh RNA对NB4细胞增殖和周期的影响,Western blot检测Sp100蛋白表达,CCK-8检测NB4细胞的增殖,流式细胞术(FCM)检测NB4细胞的周期。结果:ATRA能明显促进NB4细胞中Sp100 m RNA水平和蛋白水平的表达,并将Sp100由弥散的小点状转变为较大的斑块状;成功构建Sp100基因RNA干扰的稳定细胞株,感染Sp100-sh RNA的NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和病毒空载组,并使G2/M期的细胞增多。结论:ATRA促进NB4细胞中Sp100的表达,Sp100可能参与NB4细胞增殖活力的调节。第二部分LG268对NB4细胞增殖和凋亡的影响目的:研究LG268对NB4细胞增殖和凋亡的影响。方法:LG268作用NB4细胞24 h或48 h,CCK-8实验和细胞集落形成实验检测细胞的增殖;FCM检测NB4细胞的凋亡和周期;Western blot检测Survivin、PARP、c-Myc,、cyclin D1、ERK、p-ERK、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达情况。结果:LG268以剂量依赖的方式抑制NB4细胞的增殖,以时间依赖的方式促进NB4细胞的凋亡;LG268可明显降低细胞的集落形成能力,将NB4细胞的细胞周期阻滞在G0/G1期;此外,LG268能够下调Survivin、c-Myc和cyclin D1蛋白的表达,并使PARP的活化增多;LG268促进p38 MAPK的磷酸化而下调ERK的磷酸化。结论:LG268可抑制NB4细胞的增殖,促进其凋亡。
【图文】：

Sp100和LG268对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的影响及相关机制研究,徐婷;2017年

图 1.1ATRA 对 NB4 细胞 Sp100 mRNA 和蛋白表达的影响Fig 1.1 Effects of ATRA on the expression of Sp100 mRNA and protein in NB4 cellsA. the expression of Sp100 mRNA was increased with ATRA treatment than that with DMSO treatment;B. the expression of Sp100 protein was increased with ATRA treatment than that with DMSO treatment;C. the relative expression of Sp100 protein;*P<0.052.2 ATRA 对 NB4 细胞 Sp100 蛋白定位的影响间接免疫荧光实验显示，，与 DMSO 处理（control）相比，1 μM 的 ATRA 处理NB4 细胞 3 d 后，Sp100 由弥散的小点状变为较大的斑块状（图 1.2）。

Sp100和LG268对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的影响及相关机制研究,徐婷;2017年

图 1.1ATRA 对 NB4 细胞 Sp100 mRNA 和蛋白表达的影响ffects of ATRA on the expression of Sp100 mRNA and proteinsion of Sp100 mRNA was increased with ATRA treatment than that with DMSO treatmsion of Sp100 protein was increased with ATRA treatment than that with DMSO treatme expression of Sp100 protein;RA 对 NB4 细胞 Sp100 蛋白定位的影响疫荧光实验显示，与 DMSO 处理（control）相比，1 μM 的 3 d 后，Sp100 由弥散的小点状变为较大的斑块状（图 1.2）。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R733.71

【参考文献】