姜黄素下调Notch1信号通路影响结肠腺癌SW480细胞株增殖的研究

发布时间：2019-09-21 14:04

【摘要】：目的:从Notch1信号通路探讨姜黄素对结肠癌SW480细胞株增殖的影响。方法:1.利用二步法免疫组织化学方法检测人结直肠癌组织病理切片中Notch1信号通路中Notch 1 intracellular domain蛋白(NICD1蛋白)表达的情况,判断Notch 1 intracellular domain蛋白阳性颗粒表达与人结直肠癌的关系,从而推测Notch1信号通路与结直肠癌的关系。2.利用流式细胞技术及MTT方法检测梯度浓度姜黄素溶液(0μmol/L、7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L、60μmol/L)处理结肠腺癌SW480细胞株24小时和48小时后,结肠腺癌SW480细胞株增殖及凋亡情况。3.利用Western blot方法检测梯度浓度姜黄素溶液(0μmol/L、7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L、60μmol/L)处理结肠腺癌SW480细胞株24小时和48小时后,Notch1信号通路中Notch1、NICD1、Hes-1蛋白表达情况,观察姜黄素对Notch1信号通路中Notch1、NICD1、Hes-1蛋白表达影响。4.利用RT-PCR方法检测梯度浓度姜黄素溶液(0μmol/L、7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L、60μmol/L)处理结肠腺癌SW480细胞株24小时和48小时后,Notch1信号通路中Notch1、Hes-1基因mRNA表达水平,观察姜黄素对Notch1信号通路中Notch1、Hes-1基因mRNA表达的影响。结果:1.免疫组织化学方法结果显示Notch 1 intracellular domain蛋白(NICD1蛋白)在人结直肠癌病理组织中均表达,阳性率100%(40/40),而对照组癌旁正常肠粘膜组织中部分表达,阳性率为90.3%(28/31),但NICD1蛋白在人结直肠癌组织中表达强度明显高于癌旁正常肠粘膜组织,差异有统计学意义(P0.05)。2.流式细胞技术和MTT法检测凋亡结果均显示,姜黄素能一定程度上抑制结肠癌SW480细胞株增殖并促进其凋亡,有浓度和时间依赖。3.Western blot结果示姜黄素能一定程度上下调人结肠腺癌SW480细胞株中NICD1、Notch1、Hes-1蛋白的表达,有时间和剂量依赖,差异有统计学意义(P0.05)。4.RT-PCR结果示姜黄素一定程度上降低了结肠癌细胞株中Notch1、Hes-1基因m RNA的表达水平,有时间和剂量依赖,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.Notch1信号通路能在人结直肠癌组织中高表达。2.姜黄素能够通过下调Notch1信号通路抑制结肠腺癌SW480细胞株的增殖并促进细胞凋亡。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.35

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本文编号：2539410