Nutlin-3促进肝癌细胞SMMC-7721发生焦亡的作用

发布时间：2019-09-23 17:25

【摘要】：目的:探讨MDM2拮抗剂Nutlin-3促进肝癌细胞SMMC-7721发生焦亡的作用及相关机制。方法:Western blot检测细胞中活化caspase-1(p20)及IL-1β的表达,LDH法检测SMMC-7721细胞焦亡情况,ELISA检测细胞上清中IL-1β释放情况。结果:Nutlin-3提高SMMC-7721细胞活化caspase-1(p20)及IL-1β的蛋白表达水平。Nutlin-3处理显著提高了SMMC-7721细胞培养上清中的LDH及IL-1β的表达水平(P0.05)。结论:Nutlin-3激活了caspase-1,诱导肝癌细胞SMMC-7721发生焦亡,并促进IL-1β释放。
【图文】：

学处理各组实验数据用SPSS16.0统计软件进行分析，，采用单因素方差分析(one-wayANO-VA)，两两比较用turkey检验，结果中数据用x±s的方式表示(n=3)，P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1Nutlin-3处理激活了caspase-1活化caspase-1是介导细胞焦亡的关键分子。caspase-1前体被激活后，产生由p20和p10两个亚单位组成的活化caspase-1。为判断Nutlin-3对caspase-1前体活性的影响，Westernblot检测p20的表达水平。结果显示，Nutlin-3提高了SMMC-7721细胞中活化caspase-1的表达水平(图1)，说明Nutlin-3能激活caspase-1。图1Westernblot检测SMMC-7721细胞中活化caspase-1的表达水平Fig．1Westernblotwasperformedforproteinexpressionofactivedcaspase-1Note:β-actinwasusedasloadingcontrol.图2乳酸脱氢酶细胞毒性试剂盒检测释放到细胞培养上清中LDH的含量Fig．2ContentofLDHincellculturesupernatantwasan-alyzedbyLDHCytotoxicityAssayKit石新丽等Nutlin-3促进肝癌细胞SMMC-7721发生焦亡的作用第7期·1015·

2结果2.1Nutlin-3处理激活了caspase-1活化caspase-1是介导细胞焦亡的关键分子。caspase-1前体被激活后，产生由p20和p10两个亚单位组成的活化caspase-1。为判断Nutlin-3对caspase-1前体活性的影响，Westernblot检测p20的表达水平。结果显示，Nutlin-3提高了SMMC-7721细胞中活化caspase-1的表达水平(图1)，说明Nutlin-3能激活caspase-1。图1Westernblot检测SMMC-7721细胞中活化caspase-1的表达水平Fig．1Westernblotwasperformedforproteinexpressionofactivedcaspase-1Note:β-actinwasusedasloadingcontrol.图2乳酸脱氢酶细胞毒性试剂盒检测释放到细胞培养上清中LDH的含量Fig．2ContentofLDHincellculturesupernatantwasan-alyzedbyLDHCytotoxicityAssayKit石新丽等Nutlin-3促进肝癌细胞SMMC-7721发生焦亡的作用第7期·1015·
【作者单位】： 河北中医学院基础医学院河北省中西医结合肝肾病证重点实验室;中国人民解放军白求恩医务士官学校医学技术系装备维修教研室;
【基金】：河北省自然科学基金资助项目(H20174230011) 河北省中西医结合肝肾病证重点实验室开放课题 河北省教育厅青年基金项目(No.QN2014012) 河北中医学院博士科研基金项目(No.BSZ2015006)
【分类号】：R735.7

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