脂联素对胰腺癌发展的作用及其机制的研究

发布时间：2019-10-24 13:32

【摘要】：背景与目的:由脂肪组织分泌的脂联素是一个脂肪因子,它具有感应胰岛素、抗糖尿病、抗炎和抗肿瘤等活性。已经报道脂联素在肝癌、乳腺癌、前列腺癌等癌中具有抗肿瘤的作用,但其对于胰腺癌发生发展的作用却不清楚。我们首次研究了脂联素对于胰腺癌发展的影响,并详细阐述了相关分子机制。方法:我们利用脂联素敲除(APN KO)鼠和正常野生型(WT)鼠建立胰腺原位或皮下肿瘤模型,收集APN KO和WT鼠的肿瘤组织,分析肿瘤大小和重量。通过组织病理学、免疫组织化学、免疫印迹以及实时定量PCR等手段,分析组织病理及相关分子。此外,体外我们还利用人或鼠的外源纯化的脂联素蛋白直接处理人或鼠胰腺癌细胞系,检测其凋亡和增殖,以及相关信号分子。结果:脂联素缺失后会显著降低H7和Panc02小鼠胰腺癌细胞的胰腺成瘤。外源脂联素会显著抑制人或鼠胰腺癌细胞的凋亡。进一步研究发现,脂联素通过其受体1活化了AMP活化蛋白激酶(AMPK)、NAD依赖性去乙酰化酶sirtuin-1(Sirt1)和过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(PGC1α)。脂联素上调Sirt1,而Sirt1可以去乙酰化PGC1α。PGC1α去乙酰化会上调一系列线粒体基因的表达水平,重编程胰腺癌细胞的代谢。通过PGC1α/caspase 3,脂联素能够保护线粒体膜功能的完整性,从而展现出抗凋亡的作用。脂联素对于传统的AKT/GSK3β信号没有作用,但是会上调β-catenin和cyclin D1水平。结论:在胰腺癌中,脂联素具有抗凋亡的能力。这些新颖的发现揭示了脂联素具有促进胰腺癌发展的非常规角色,强调了脂联素在不同肿瘤的病理形成中具有不同的影响。
【图文】：

Excel 2007 或 IBM SPSS Statistics 19 分析，并用 GraphPad Prism 统计软件以均值± SEM 来呈现的。以 p<0.05表示差异有统计学意义。1.2 结果1.2.1 脂联素缺失后会抑制胰腺癌的发展小鼠胰腺癌细胞系 H7和 Panc02 来源于 C57BL/6 背景[27, 28]。为了弄清脂联素在胰腺癌生长中的调节作用，我们利用脂联素敲除鼠和野生型鼠胰腺原位接种小鼠胰腺癌细胞 H7。两周后麻醉处死小鼠，分离测量肿瘤的大小与重量。我们发现野生型鼠中的肿瘤药比脂联素敲除鼠中的肿瘤显著更大和更重（体积：1:7，重量：1:2） （图 1 A 和 B）。为了进 步确认脂联素与胰腺癌的关系，我们又利用脂联素敲除鼠和野生型鼠皮下接种小鼠胰腺癌细胞系 H7 和Panc02。结果发现，H7 和 Panc02 细胞都能在野生型和脂联素敲除鼠中生长成瘤，但是脂联素敲除鼠中的肿瘤大小与体积要比野生型鼠中皮下瘤要小并且轻很多，充分说明脂联素能够促进胰腺癌体内生长（图 1 C、D、E 和 F）。我们利用实时

图 2 脂联素缺失可缓解小鼠原位胰腺癌转移。5×105个 H7细胞原位注射到每只小鼠胰腺内（WT：n=8，KO：n=6）。植瘤两周后处死小鼠，，记录腹水和肿瘤转移情况。（A，B和C）拍照显示肿瘤向肾（A）、肺（B）和肠（C）转移的情况。（D）H&E 染色显示胰腺癌向肾脏和肺转移的情况。比例尺，100 μm。向肠、肺以及肾转移（图 2 A、B 和 C）。肾和肺组织切片 H&E 染色更直观地观察到这些结果 （图 2 D）。在这些结果的基础上，我们可以总结出脂联素对胰腺癌生长和转移具有不同寻常的调节作用。1.2.3 脂联素抑制胰腺癌的凋亡已经有文献报道提出，脂联素能够通过 些非常规途径来降低心脏和胰腺的凋亡[20, 26, 30]。鉴于脂联素具有促进胰腺癌细胞生长的作用，我们想研究弄清脂联素是否通过抑制胰腺癌细胞凋亡来促进胰腺癌生长。Western blot 检测发现，脂联素能够通过下调 caspase 3 的活化水平来显著抑制体内胰腺癌的细胞凋亡（图 3 A）。肿瘤切片的 TUNEL染色也说明脂联素具有抑制胰腺癌细胞凋亡
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.9

【共引文献】

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本文编号：2552574