幽门螺杆菌感染相关miRNA-148b在胃癌细胞增殖及侵袭中的分子机制研究

发布时间：2019-11-03 18:43

【摘要】：目的研究幽门螺杆菌相关miRNA-148b在胃癌中过表达与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的相关性及其在胃癌细胞增殖及侵袭中的分子机制。方法本研究首先建立稳定的H.pylori感染人胃上皮细胞模型;检测H.pylori感染前后胃上皮细胞的miRNAs表达谱变化,筛选出感染后miRNA-148b表达显著上调的为研究对象。选择胃癌细胞系AGS、HGC-27、SGC-7901及人正常胃上皮细胞GES-1为研究对象。设计合成miRNA-148b特异性siRNA及miRNA-148b的过表达质粒,抑制或过表达miRNA-148b的表达水平,通过细胞凋亡实验,Transwell小室细胞侵袭等实验,研究miRNA-148b在胃癌细胞增殖及侵袭中的作用。探讨miRNA-148b在胃癌细胞增殖侵袭中的分子作用机制。结果 realtime PCR检测,H.pylori在感染胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞株AGS、HGC-27、SGC-7901后miR-148b表达升高,不同胃癌细胞株较正常胃黏膜miR-148b表达下降,在体外,发现miR-148b可以促进胃癌细胞株AGS、HGC-27、SGC-7901细胞的增殖,抑制胃癌细胞株SGC-7901细胞的凋亡;证实抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1为miR-148b的靶基因,在胃癌细胞株和胃癌组织中miR-148b和PAI-1的表达水平呈显著负相关。结论通过H.pylori感染胃上皮细胞株前后miR-148b的表达检测,验证了先前的miRNAs芯片检测结果,在体外,过表达miR-148b促进胃癌细胞株增殖,抑制其凋亡,提示机体可能以这种方式减缓在H.pylori感染早期所诱导的胃上皮细胞的过度凋亡进程,从而发挥了相应的保护作用;相对于正常胃黏膜组织,在不同胃癌细胞株中miR-148b都表达下调暗示,在胃癌的发生发展过程中,miR-148b可能作为一个抑癌基因而被抑制,证实抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1为miR-148b的靶基因,提示miR-148b在H.pylori感染和胃癌发生的不同时期功能不同。

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本文编号：2555217