协同刺激分子B7-H4在胃癌组织中的表达及定位研究

发布时间：2019-11-14 01:41

【摘要】：胃癌是威胁人类健康的主要恶性肿瘤之一,尽管治疗手段及水平不断提高,但治疗效果尚不理想,因此寻找新的胃癌早期诊断和预后判断指标,研究影响胃癌发生、发展和预后的免疫机制,探索胃癌治疗的新靶点十分迫切。负性协同刺激分子B7-H4是B7家族新成员,主要表达在巨噬细胞、成熟的树突状细胞和某些肿瘤细胞以及活化的T细胞上,可通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的产生和细胞周期负性调控T细胞的免疫应答,并在介导肿瘤免疫应答过程中发挥重要作用。近年来,对肿瘤微环境和肿瘤免疫逃逸机制的深入研究发现,B7-H4可异常表达于诸多人类肿瘤组织及肿瘤浸润的免疫细胞,参与肿瘤免疫逃逸,是肿瘤微环境的重要组成部分,一方面通过负性调控T细胞介导的抗肿瘤应答,另一方面通过调节肿瘤细胞自身的生物学行为,共同参与肿瘤的发生与发展。本研究通过采用免疫组织化学、免疫荧光染色、激光共聚焦技术以及流式细胞术,分别检测B7-H4在胃癌组织、胃癌浸润免疫细胞及外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的表达及定位,为进一步研究B7-H4在胃癌发生发展过程中的分子机制奠定基础。目的:探讨负性协同刺激分子B7-H4在胃癌组织及浸润免疫细胞亚群中的表达及定位。方法:应用免疫组织化学、免疫荧光染色及激光共聚焦技术检测B7-H4蛋白在胃癌组织中的表达及定位;流式细胞术检测分析胃癌患者PBMCs亚群(CD3+T细胞、CD19+B细胞、CD14+单核细胞及粒细胞)中B7-H4的表达。结果:免疫组织化学检测结果表明,B7-H4在胃癌组织中呈阳性表达。免疫荧光染色及激光共聚焦检测结果显示,B7-H4在胃癌组织中呈阳性表达,并主要定位于胃癌细胞的细胞膜,特别是在Ki67+高度增殖的胃癌细胞中B7-H4呈高表达,且B7-H4在CD34+血管内皮细胞中呈高表达;B7-H4在浸润CD19+B细胞和CD68+巨噬细胞中呈高表达;而在胃癌浸润CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD57+NK细胞中呈弱表达。流式细胞术检测结果表明,B7-H4在胃癌患者外周血浸润CD19+B细胞及粒细胞中呈阳性表达,而在浸润CD3+T细胞及CD14+单核细胞中呈弱表达。结论:B7-H4在胃癌组织中可表达于肿瘤细胞和部分浸润免疫细胞。检测B7-H4的表达可作为潜在的胃癌诊断、治疗及预后判断的新靶点。
【图文】：

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胞的免疫逃逸[57]。调节性 T 细胞(Treg)也能通过诱导抗原递呈细胞 APC 分泌 IL-10来促使 APC 上调表达 B7-H4，形成有助于肿瘤免疫逃逸的“调节性 APC”细胞[53]。B7-H4 分子不仅在帮助癌细胞逃逸活化 T 细胞的杀伤作用时有重要作用，而且对维持肿瘤细胞自身的生存也有一定的促进作用。Salseda 等人运用 siRNA 技术降低肿瘤细胞中 B7-H4 分子的表达后发现，与 siRNA 法降低抗凋亡蛋白 DAXX 表达的阳性对照组一样[55]，不仅肿瘤细胞发生了明显的凋亡现象，而且参与细胞调亡的半胱天冬氨酸蛋白酶 caspase 3 和 caspase 7 活性明显增强[63]。此外，还有研究发现，相比癌旁组织，81.5%的肾癌病人肿瘤血管内皮上中度表达 B7-H4，这预示着 B7-H4 还可能参与了肿瘤新生血管的形成，，从而为维持肿瘤的生长提供了必要的条件。已有多项研究表明，B7-H4 分子通过抑制适应性免疫应答抑制肿瘤免疫，也是重要的固有免疫应答的负性调节者[64]。这些研究表明，B7-H4 在肿瘤细胞和浸润免疫细胞中可能作用不同，表达调控因素也不同，不同的调节机制可能与肿瘤微环境不同调节因子相关，深入研究B7-H4 在肿瘤组织表达的相关机制将有助于揭示其确切的作用。

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图 1 免疫组织化学染色检测胃癌组织及胃炎组织中 B7-H4 的表达A．胃癌 H&E 染色；B．胃癌 B7-H4 阳性表达(×200)；C．胃癌 B7-H4 阳性表达(×400)D．胃炎 H&E 染色；E．胃炎 B7-H4 阴性表达(×200)；F．胃炎 B7-H4 阴性表达(×400)图 2 免疫荧光染色阴性对照
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2

【参考文献】