EGCG对NB4细胞生物学功能的影响及作用机制的研究

发布时间：2020-01-25 05:52

【摘要】：第一部分 EGCG通过活化p38αMAPK-Bax途径诱导NB4细胞凋亡目的:本实验主要探讨EGCG是否能够诱导NB4细胞凋亡及其可能的分子机制。方法:分别用不同浓度的EGCG处理NB4细胞,或预先用p38αMAPK的抑制剂PD169316处理NB4细胞半小时,再用相应浓度的EGCG处理NB4细胞。用CCK-8方法测定NB4细胞增殖状况,用FITC-Annexin V/PI双染色法测定NB4细胞凋亡状况,用Western-Blot检测p38αMAPK、p-p38αMAPK、Bcl-2和Bax蛋白质的表达水平。结果:随着EGCG浓度的增加,CCK-8结果显示EGCG依赖浓度梯度抑制NB4细胞增殖;流式细胞术发现EGCG能够明显促进NB4细胞凋亡;同时Western-Blot检测发现p-p38αMAPK和Bax蛋白质表达水平升高,与EGCG浓度呈正相关,然而Bcl-2蛋白质表达水平随EGCG浓度升高而降低。在用p38αMAPK抑制剂处理后,CCK-8结果表明EGCG抑制细胞增殖的能力明显减弱,同时流式细胞术显示EGCG促进细胞凋亡的能力也减弱;Western-Blot结果显示Bax蛋白质表达程度降低,但Bcl-2蛋白质表达程度无明显变化。结论:EGCG可能通过活化p38αMAPK-Bax途径诱导NB4细胞凋亡。第二部分 EGCG通过SHP-1调节的p38αMAPK-Bax途径诱导NB4细胞凋亡目的:本实验主要观察EGCG是否通过SHP-1调节的p38αMAPK-Bax途径诱导NB4细胞凋亡。方法:分别用不同浓度的EGCG处理NB4细胞,或预先用SHP-1的抑制剂NSC87877处理NB4细胞半小时,再用相应浓度的EGCG处理NB4细胞。用CCK-8方法测定NB4细胞增殖状况,用FITC-Annexin V/PI双染色法检测NB4细胞凋亡状况,用Western-Blot检测SHP-1、p38αMAPK、p-p38αMAPK和Bax蛋白质的表达水平。结果:Western-Blot检测结果显示EGCG能够促进SHP-1蛋白质表达。预先用SHP-1抑制剂NSC87877处理后,SHP-1蛋白质的表达水平明显降低;同时CCK-8结果显示EGCG抑制细胞增殖的能力减弱,流式细胞术结果表明EGCG促进细胞凋亡的能力也减弱,Western-Blot检测结果显示p-p38αMAPK和Bax蛋白质表达水平随之减少,但p38αMAPK蛋白质表达水平无明显变化。结论:EGCG通过SHP-1调节的p38αMAPK-Bax途径诱导NB4细胞凋亡。
【图文】：

重庆医科大学硕士研究生学位论文，，NB4 细胞凋亡率与对照组相比无显著差异，但在浓度为 30μmol/L 时，细胞率为 51.21%±0.01，与对照组相比有极显著差异 (p<0.01) (图 1.2)，说明 EG够诱导 NB4 细胞凋亡。3 EGCG 对相关凋亡蛋白质表达的影响分别以0、10、20和30μmol/L的EGCG 处理NB4 细胞 24小时，用 Western 测相关凋亡蛋白情况。结果显示，在 30μmol/L EGCG 终浓度时，Bax 蛋白质水平明显升高(p<0.05)，然而 Bcl-2 蛋白质表达水平明显减低(p<0.05) (图 1.3

图 1.2 EGCG 对 NB4 细胞凋亡的影响Fig 1.2 Effect of EGCG on the apoptosis of NB4 cells
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R733.7

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 王卫东;陈正堂;;Bcl-2/Bax比率与细胞“命运”[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2007年04期

2 方建晨;苏祖兰;邱耕;何丹;冯智英;朱明芬;李莉;何向蕾;;淋巴瘤Daudi细胞SHP-1甲基化及5-杂氮脱氧胞苷抑制性效应的研究[J];中华血液学杂志;2006年10期

本文编号：2572928