miRNA-320d和FoxM1在贲门癌组织中表达相关性及临床价值分析

发布时间：2020-03-13 09:11

【摘要】：目的:本实验主要研究mi RNA-320d和Fox M1在贲门癌中的表达情况,探究他们的表达与贲门癌临床病理因素及预后之间的联系;研究mi RNA-320d和FoxM1在贲门癌发生发展进程中的影响,分析mi RNA-320与FoxM1之间可能的相互作用联系,研究二者的功能机理在贲门癌发生发展中。方法:收集30例河南科技大学第一附属医院肿瘤科2012年04月至2013年03月期间收治的贲门癌患者,以及30例2013年03月至2013年08月安阳肿瘤医院收治的贲门癌患者,行贲门癌根治术时取其癌组织及对应的癌旁组织,所有病例术前未经放疗和化疗。采用RT-PCR方法检测miRNA-320d和FoxM1分别在贲门癌及癌旁组织中mRNA核酸水平的表达。采用免疫组织化学法和Western blot检测Fox M1在癌旁组织和贲门癌组织中的表达水平,并作统计学比较,进而研究miRNA-320d和FoxM1的表达水平与贲门癌患者的预后及临床病理因素之间的联系。对数据进行统计学分析采用Graphpad Prism5.0统计学软件,当统计结果P0.05时,我们认为差异有统计学意义。结果:1.RT-PCR实验数据表明,mi RNA-320d的mRNA核酸表达水平在贲门癌组织中与相应癌旁组织相比表达明显降低(P0.001),而相反,FoxM1的mRNA核酸水平表达在贲门癌组织中与相应癌旁组织相比表达明显升高(P0.0001),与临床病理特征联系,mi RNA-320d的mRNA核酸表达水平与肿瘤组织大小有关(P0.05),Fox M1的mRNA核酸表达水平与肿瘤组织大小及TNM分期有关(P0.05),具有显著的统计学差异;而且mi RNA-320d和FoxM1在贲门癌组织中的核酸表达,通过统计学相关性分析得出呈负相关性。2.Western blot实验数据表明,FoxM1蛋白在贲门癌组织中与相应癌旁组织相比表达明显提高(P=0.0363),差异有统计学意义。3.免疫组化实验数据表明,Fox M1的阳性表现大部分定位于胞核呈棕黄色、黄色颗粒,有些定位于胞质呈黄色颗粒。FoxM1在60例贲门癌组织、相应癌旁组织中的表达阳性率分别为68%、45%,差异具有统计学意义(P0.01),与临床病理特征联系,FoxM1的阳性表达与肿瘤组织大小及TNM分期有关,具有显著的统计学差异(P0.05)。4.对60例贲门癌病人进行随访,Kaplan-Meier统计学生存分析显示,miRNA-320d高表达的患者组预后明显好于miRNA-320d低表达的患者组(P0.05);同时,FoxM1阳性表达组与阴性组相比预后较差(P0.05),差异具有统计学意义。结论:1.miRNA-320d在贲门癌组织中的表达明显低于贲门癌旁组织,而FoxM1在贲门癌组织中的表达明显高于贲门癌旁组织。表明mi RNA-320d和FoxM1的异常表达量有可能与贲门癌的发生发展有关。且mi RNA-320d与FoxM1在核酸水平表达呈负相关,推测可能上游基因miRNA-320d通过抑制下游基因FoxM1的表达从而在贲门癌发生发展中发挥作用,具体作用机制有待进一步探究,两因子可能成为贲门癌治疗的分子靶标。2.通过与临床病理特征联系,miRNA-320d的表达高低与肿瘤组织大小相关,而FoxM1的核酸表达高低、蛋白表达阳性率与肿瘤组织大小及TNM分期有关。mi RNA-320d高表达的贲门癌患者组预后明显好于低表达的贲门癌患者组;FoxM1阳性表达组与阴性组相比预后较差,故miRNA-320d与FoxM1可能成为贲门癌患者预后的指标。
【图文】：

贲门癌,PCR检测,内参

为了进一步验证 miRNA-320d 与 FoxM1 在贲门癌患者中 mRN况，将所有组织样品抽提 RNA 及合成 cDNA 第一链后，进行 PCR 对所有样品进行统计分析。以 U6 为内参进行对照，，实时荧光定量 P图 3-1 所示：发现 miRNA-320d mRNA 在 60 例贲门癌组织中，其中有门癌组织中的表达低于相应癌旁组织中的表达（50/60），为 83.3%；示：贲门癌组织中 miRNA-320d 的相对表达量为 1.137±0.101，明显织的 2.042±0.116（t=5.885，P<0.0001），统计学处理差异有显著性。为内参进行对照，实时荧光定量 PCR 结果如图 3-3 所示：发现 FoxM60 例贲门癌组织中，其中有 53 例在贲门癌组织中的表达高于相应癌表达（53/60），为 88.3%；如图 3-4 所示：贲门癌组织 FoxM1 mRN达量为 5.812±0.533，明显高于癌旁组织的 2.591±0.265（t=5.412，P<统计学处理差异有显著性。并且对贲门癌组织中 miRNA-320d 和 Fox平表达的相关性进行统计学分析，如图 3-5 所示：结果呈负相关性（P=0.0009），统计学处理差异有显著性。

贲门癌

图 3-2 贲门癌与相应癌旁组织中 miRNA-320d mRNA 的表达Fig. 3-2 The compare of miRNA-320d between GCA and matchingnormal tissues adjacent to carcinoma
【学位授予单位】：河南科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.2

【参考文献】