分泌型白细胞蛋白酶抑制剂在口腔白斑和口腔鳞癌中的表达和凋亡效应

发布时间：2020-03-21 08:31

【摘要】：背景:头颈鳞癌是世界六大常见肿瘤之一,全世界每年有166万人诊断为头颈鳞癌,而这近半是口腔鳞癌。尽管外科水平的提高和放化疗方案的日渐成熟,五年生存率也仅达到50%。而口腔鳞癌并非突然形成,如果能掌握其早期的警戒信号,早预防,早诊断,就能大大提高患者的生存率和生活质量。而口腔白斑作为最常见的癌前病变之一,准确判断其恶变潜能,及时阻断发展,可能是预防口腔癌发生的重要措施。目的:课题组前期在正常口腔上皮,口腔白斑和口腔癌样本比较中,筛出了表达明显降低的分泌型白细胞蛋白酶抑制剂。本研究旨在进一步探讨该蛋白在口腔白斑癌变中的表达变化、对生物学行为的调控和可能的机制。为其作为口腔白斑恶变的预测分子提供初步的实验依据。方法:通过免疫组化,探究分泌型白细胞蛋白酶抑制剂表达量与不同病理分期的口腔白斑的相关性。运用激光共聚焦,观察该蛋白的摄入;通过CCK-8、PI染色、Annexin V/PI凋亡检测,观察口腔白斑和口腔鳞癌细胞的增殖、周期、凋亡的变化。采用Caspase-Glo?3/7检测试剂盒,NF-κB双荧光素酶报告基因和q-PCR技术,初步探究SLPI对凋亡通路的调控机制。结果:通过免疫组化,发现SLPI表达量与口腔白斑的病理分期呈负相关(r=-0.4922,p0.05);采用激光共聚焦,观察其被细胞摄取,部分还进入到核内;运用表型研究实验,发现SLPI参与抑制口腔白斑和口腔鳞癌细胞的增殖,促进其凋亡。而这可能与其抑制NF-κB通路的激活相关。结论:随着口腔白斑的进展,SLPI表达逐渐降低,提示我们,该蛋白可能为预测口腔白斑癌变提供一定依据。而其参与抑制口腔白斑和口腔鳞癌的增殖,促进凋亡,可能对预防和治疗口腔鳞癌有一定的潜在效果,但还需更深入的探索。
【图文】：

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上海交通大学医学院 2015 级硕士学位论文异。先通过生物信息在线分析网站 Firebrowse (http://firebrowse.org/)，初SLPI 蛋白在 28 种肿瘤内的表达改变情况。如下图所示，该蛋白在不同肿瘤化不，而在头颈鳞状细胞癌中 RNA 表达有所下调，与前期文献检索结果为进步探究 SLPI 蛋白在口腔白斑内的表达差异提供定的可靠依据。rowse 在线分析网站的大数据全部来源于 The Cancer Genome Atlas (TCGA

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denocarcinoma; LUSC, lung squamous cell carcinoma; PAAD, pancreatic adenocarcinoma;CPG, pheochromocytoma and paraganglioma; PRAD, prostate adenocarcinoma; READ, rectumdenocarcinoma; SARC, sarcoma; SKCM, skin cutaneous melanoma; STAD, stomachdenocarcinoma; STES, stomach and esophageal carcinoma; THCA, thyroid carcinoma; THYM,ymoma; UCEC, uterine corpus endometrial carcinoma.2)通过 UALCAN(http://ualcan.path.uab.edu/analysis.html)生物信息在线分析站，，更细致地分析了 SLPI 在不同状况下的头颈鳞状细胞癌内的 RNA 表达情况。该站数据亦全部来源于 The Cancer Genome Atlas (TCGA)。由下图数据可知，SLPIRNA 在不同临床分期中的头颈鳞癌内表达存在差异，尤其是 T2 期与 T3 期之间。考 T4 期的病例数仅有 7 例，与其他临床分期组别的病例数相差较为悬殊，因此，T3 T4 间的统计学结果值得商榷。在 HPV 未感染的头颈鳞状细胞癌中，SLPI 的 RNA 表水平也相较与 HPV 感染的头颈鳞状细胞癌要高些，但不存在显著的统计学差异p=0.0680）。上述在线分析的结果，与搜索的文献结果(12, 36)基本致。也为检 SLPI 在不同病理分期的口腔白斑内的表达量提供了定的思路和支持。
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R781.5;R739.8

【参考文献】