PAP动态监测血浆cfDNA在进展期非小细胞肺癌治疗中的应用

发布时间：2020-03-27 00:18

【摘要】：背景和目的:肺癌是我国及世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,靶向治疗是目前晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)重要的治疗方式,其中以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)最为代表,在EGFR-TKIs治疗之前,需进行EGFR基因突变检测。但由于手术组织获取受限、穿刺标本不足等原因,突变的组织受检率很低。血液中循环游离DNA(circulating free DNA,cfDNA)携带肿瘤原发部位基因突变信息,可代替组织标本进行EGFR基因突变检测,且具有简便、快捷、微创、实时等优势。但cfDNA的检测方法繁多,优劣不等,缺乏统一标准。焦磷酸化激活的聚合反应(pyrophosphorolysis-activated polymerization,PAP)是一种原创性核酸扩增技术,通过封闭性引物定向串联焦磷酸化反应和聚合反应而具有超高灵敏度和特异度。本研究采用PAP对血浆cfDNA进行EGFR基因突变检测,分析PAP在进展期非小细胞肺癌患者血浆检测中的应用,并探讨cfDNA动态监测在进展期非小细胞肺癌患者治疗中的意义。材料和方法:纳入2016.03-2017.10天津医科大学肿瘤医院就诊的进展期非小细胞肺癌患者92例,采用焦磷酸化激活的聚合反应(PAP)核酸扩增实时荧光PCR法,对92例患者进行血浆cfDNA的EGFR基因突变检测,同时采用扩增阻滞突变系统(amplication refractory mutation system,ARMS)实时荧光PCR法进行血浆cfDNA的EGFR基因突变检测对比验证。对其中突变阳性的39例患者采用焦磷酸化激活的聚合反应(PAP)核酸扩增实时荧光PCR法进行连续血浆突变检测(每2个月1次)。查阅病历资料收集入组患者的组织EGFR基因突变检测结果及临床病理特征资料。比较组织与血浆的检测结果及PAP与ARMS PCR的检测结果的一致性;分析血浆EGFR基因突变动态监测与临床诊治的关系。结果:1.血浆与组织EGFR基因突变检测结果差异无统计学意义(p=0.092)。2.PAP与ARMS PCR对血浆EGFR基因突变检测结果差异无统计学意义(p=0.143)。3.血浆EGFR基因突变的发生率与年龄、性别、吸烟情况、肿瘤家族史、体力状态评分、病理类型及疾病分期均无显著相关性。4.血浆cfDNAEGFR基因突变的检出率,在疾病进展者中较未进展者中高(55.2%vs18.5%,p0.001)。结论:焦磷酸化激活聚合反应(PAP)可用于血浆cfDNA的EGFR基因突变检测,其检测结果与组织检测结果无显著差异,但较组织检测简便、快捷、微创、实时;与ARMS PCR检测结果无显著差异,但较ARMS PCR经济实惠,尤其是对于需要多次动态监测的患者,造成的经济负担轻。晚期非小细胞肺癌患者建议行血浆cfDNAEGFR基因突变动态监测,患者能从其中提前获得疾病进展的信息,血浆检测结果由阴性变为阳性或持续阳性,疾病进展可能性大,血浆检测结果由阳性变为阴性或持续阴性,考虑治疗有效,cfDNA水平低不易检出。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R734.2

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