生物活性水凝胶用于胃癌干细胞筛选的研究

发布时间：2020-04-12 11:31

【摘要】：胃癌久治不愈,主要原因是胃癌干细胞存在,而且不同胃癌阶段干细胞特性也不同,治疗方法也不尽相同。因此本论文欲探究不同胃癌阶段干细胞微环境的差异性选择了AGS和SGC7901两种细胞系。SGC7901来源于胃腺癌,由一位患者的淋巴结转移灶提取。而AGS细胞株也源于胃腺癌源,但源自一个未经治疗的切除肿瘤碎块。由于两种细胞株迁移性和干性细胞含量不同,可以视为原发性胃癌和迁移性胃癌两种不同阶段进行研究,实验得到的结论可以区分出胃癌转移和未转移两种条件下细胞的微环境差异,通过两种微环境的对比可以对胃癌的分期治疗进行临床指导。论文以海藻酸钠和透明质酸以及氯化钙和壳聚糖进行交联得到的水凝胶模拟微环境,论文选择从弹性模量,血清含量,以及透明质酸含量、分子量三个方面分别对两种胃癌细胞系进行筛选,通过创造最适合两种细胞系生长的微环境,从而得到两种细胞系的胃癌干细胞;并对得到的细胞团进行验证。细胞系SGC7901最佳生活的水凝胶条件是SA1.0%加LMW-HA 2.0%;适合细胞系AGS水凝胶条件为SA0.6%加LMW-HA2.0%。检验得知两种细胞系CD44、MDR1、LGR5三种标志物显著升高,其中CD44是恶性肿瘤标志物之一,MDR1升高表示经筛选两种细胞系耐药性均有提高,而LGR5升高显示筛选的细胞系均具有胃部干细胞性质。SGC7901其他标志物NANOG、CD24、CD133均有显著升高,这说明SGC7901筛选的细胞团干性增强。AGS细胞系其干性基因表达物OCT-4表达量显著上升,但其余的表达物NANOG、CD24、CD133没有显著性差异,这说明与SGC7901相比AGS细胞干性较弱。有研究表明OCT-4在原始细胞中表达量较高,而在成熟分化程度较高的细胞含量低,AGS分化程度低,因而OCT-4表达量高,而SGC7901是中分化的细胞株因而OCT-4表达量低。通过两种细胞系与THP1共培养后,向M2方向分化可以确定筛选后得到的细胞的确为干细胞。本论文对比了胃癌不同阶段干细胞的环境差异;而且共培养实验结果得知胃癌干细胞确实会对巨噬细胞造成一定影响,而巨噬细胞是人体免疫系统的重要防线,结合二者可以为开发新的胃癌治疗方法和治疗药物提供新的思路。
【图文】：

类器官,基本过程

图 1-1 类器官形成基本过程明一种药物对患者的肿瘤来源类器官无效，那么一该药物对患者类器官治疗有作用；那么它有 90%几治疗。而且经过验证得知这种类器官的基因表达完形成的组织结构也高度一致，，而且这种一致性表现

类器官,突变谱,抗癌药物,肿瘤组织

而且经过验证得知这种类器官的基因表达完全一致如图1-2 所示，而且形成的组织结构也高度一致，而且这种一致性表现在药物治疗试验当中。图 1-2 类器官与其来源肿瘤组织 96%突变谱重叠总体而言，类器官在预测抗癌药物的有效性上，具有 100%的敏感性，93%的特异性，88%的阳性预测值以及 100%的阴性预测值。与常用的小鼠模型预测治疗癌症药物的效用相比，类器官具有更高的准确性，更短的时间性。因此本论文选择用不同的胃癌细胞株形成类器官，筛选的得到的干细胞团可以应用于类器官的相关实验又可以得到不同胃癌阶段肿瘤细胞微环境的差异[15]。
【学位授予单位】：哈尔滨工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.2

【参考文献】