MiR-330-3p表达水平与ccRCC临床相关性及其作用机制的初步研究

发布时间：2020-05-12 18:36

【摘要】：背景:肾癌为较常见的恶性肿瘤之一,其中,肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)占70-80%。手术治疗是目前最有效的治疗方案,但术后复发的患者约占20-40%,肾癌患者的平均生存期约为26个月。因此,寻找有效的肾癌治疗靶标分子,及时对其作用机制研究,意义重大。miRNA是一类高度保守的内源性非编码小RNA,长度约为21nt,普遍存在于真核生物中。成熟miRNA通常与靶基因的3’-UTR区碱基通过不完全互补配对,使mRNA降解或抑制mRNA翻译,调控基因的表达。miRNA参与调控细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等行为,备受关注。miR-330表达失常与多种肿瘤相关,并在不同肿瘤类型的细胞和组织中表达,呈现一定特异性。目前尚无关于miR-330-3p在ccRCC中作用及机制的研究。目的:1.miR-330-3p在ccRCC患者临床样本组织中的表达水平及其临床相关性。2.miR-330-3p差异表达对786-O和ACHN细胞恶性表型影响。3.对miR-330-3p调控ccRCC细胞恶性行为分子机制进行初步研究。方法:1.qRT-PCR法检测miR-330-3p在42例ccRCC患者临床组织中表达水平,运用unpaired Student’s t-test或One-way ANOVA方法,分析miR-330-3p表达水平变化与临床病理参数的相关性。2.采用Lipofetamin~(TM) 2000转染法,在786-O、ACHN中转染miR-330-3p mimic/Inhibitor,及其阴性对照miR-330-3p mimic NC/miR-330-3p Inhibitor NC,qRT-PCR法检测miR-300-3p表达水平。3.采用Lipofetamin~(TM) 2000转染法,在786-O、ACHN中转染miR-330-3p mimic,及阴性对照miR-330-3p mimic NC,MTT法考证mi R-330-3p高表达对786-O、ACHN增殖影响,运用Transwell小室法和划痕实验考证miR-330-3p高表达对786-O、ACHN迁移、侵袭和运动能力影响。4.采用Lipofetamin~(TM) 2000转染法,在786-O、ACHN中转染miR-330-3p Inhibitor,及阴性对照miR-330-3p Inhibitor NC,MTT法考证miR-330-3p低表达对786-O、ACHN增殖影响,运用Transwell小室法和划痕实验考证miR-330-3p低表达对786-O、ACHN迁移、侵袭和运动能力影响。4.Western blot法检测MMP2、P53、p-Akt、p-Mek在ccRCC患者肿瘤组织和癌旁正常组织中表达水平;western blot法检测MMP2、P53、p-Akt、p-Mek在miR-330-3p低/高表达786-O中水平变化。结果:1.与癌旁正常组织相比,miR-330-3p在29例ccRCC患者临床肿瘤组织中水平升高(69.05%),在13例患者肿瘤组织中水平降低(30.95%),其整体水平上升138.24%(P=0.0229)。miR-330-3p高表达与ccRCC Fuhrman分级正相关,与Fuhrman 1-2患者相比,miR-330-3p在Fuhrman 3-4级ccRCC患者样本中表达水平升高147.2%(P=0.0477),与患者年龄、性别、侧别和TNM分期无关。2.与mimic NC组相比,miR-330-3p表达水平升高,786-O和ACHN的增殖、迁移、侵袭和运动能力增强。3.与Inhibitor NC组相比,miR-330-3p表达水平降低抑制786-O和ACHN的增殖、迁移、侵袭和运动能力。4.miR-330-3p高表达抑制786-O中P53蛋白水平,增强MMP2、p-Akt、p-Mek蛋白表达水平;786-O中下调miR-330-3p,P53蛋白水平上调,MMP2、p-Akt、p-Mek蛋白水平下调;与癌旁正常组织相比,P53蛋白在ccRCC患者肿瘤组织中水平降低,MMP2、p-Akt、p-Mek蛋白水平明显升高。结论:1.miR-330-3p水平升高潜在促进ccRCC发生发展并与患者Fuhrman分级正相关,与其他临床参数无关。2.miR-330-3p表达水平变化与786-O、ACHN的增殖、迁移、侵袭和运动能力正相关。3.mi R-330-3p影响P53,MMP2,p-Akt,p-Mek表达水平,影响ccRCC细胞的恶性表型,影响ccRCC的发生发展。
【图文】：

采用 SPSS13.0 软件分析数据。实验数据以均值±标准差（x s ）表示。二者之间比较采用 unpaired Student’s t-test 检验，三者之间采用 One-wayANOVA 分析，P<0.05 表示具有统计学意义。ns 代表 P>0.05，*，**，***，****分别代表 P<0.05，0.01，0.001 和 0.0001。结果1.miR-330-3p 在 ccRCC 患者临床肿瘤组织中水平总体升高qRT-PCR 检测 42 例 ccRCC 临床肿瘤组织及配对癌旁正常组织中 miR-330-3p的表达水平。如图 1-1A 所示，，与癌旁正常组织相比，miR-330-3p 在 29 例（69.1%）患者肿瘤组织中水平升高，在 13（30.9%）例患者肿瘤组织中水平降低（P=0.0122）。miR-330-3p 水平在 ccRCC 患者临床肿瘤组织中整体升高 138.2%(P=0.0229)(图1-1B)

图 1-2.miR-330-3p 表达水平与临床参数间相关性表 5. 临床样本具体信息及 miR-330-3p 与临床参数之间的 P 值统计病理参数 样本数 P 值性别男 24 0.148女 18年龄
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.11

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 赵正安;肺癌组织p53蛋白表达与临床相关性研究[J];中国肿瘤;1996年08期

2 毕黎琦;;SLE病人淋巴细胞表现型及其的临床相关性[J];吉林医学;1989年04期

3 申玉琴;;98例佝偻病骨X线片与临床相关性分析[J];河北医学院学报;1989年02期

4 牛丽凤;姜严;尹之全;;血清铜与临床相关性研究现状[J];微量元素与健康研究;2010年04期

5 楼尧勇;许曙;杨洁文;史俊;;颈椎病与干眼症的临床相关性探讨(附418例分析)[J];福建医药杂志;2006年01期

6 Vingerhoets G.;Miatton M.;Vonck K.;王孝文;;Wada作为刺激类型依赖物时记忆功能的临床相关性[J];世界核心医学期刊文摘(神经病学分册);2006年Z1期

7 张建勋;刘志强;万和斌;曹家驹;高秀先;温洪周;师访;汪进丁;任星;;缺血性脑卒中与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的临床相关性研究[J];现代诊断与治疗;2015年20期

8 阎雪燕;张川;;非酒精性脂肪性肝病患者血清瘦素水平与多种指标的临床相关性研究[J];胃肠病学和肝病学杂志;2015年08期

9 马超;白玉;吴大鹏;;不同类型骨盆骨折与大出血的临床相关性研究[J];中国现代医学杂志;2012年25期

10 常显星;俞丽芬;;非酒精性脂肪性肝病与心血管疾病的临床相关性研究进展[J];国际消化病杂志;2011年03期

相关会议论文 前10条

1 何黎;;痤疮遗传与临床相关性的研究[A];2011全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2011年

2 杨明华;廖宁;陈国力;尹莎莎;曹励之;康睿;;急性淋巴细胞白血病6q16．3候选肿瘤抑制基因的初步定位及临床相关性研究[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

3 杨明华;廖宁;陈国力;尹莎莎;曹励之;康睿;;急性淋巴细胞白血病6q16．3区候选肿瘤抑制基因的初步定位及临床相关性研究[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

4 杨国玲;李乔;于晓虹;刘维达;林熙然;;红色毛癣菌基因型与表型及其临床相关性的研究[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年

5 孙琥;余淑娇;李慧;陈景;吴锐;;甲襞微循环在神经精神狼疮中的临床相关性分析及意义[A];第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编[C];2016年

6 孙志荣;赵雯;彭思思;叶晓兰;舒秋菊;;视觉比色与电脑比色的临床相关性研究[A];全国口腔护理新进展研讨会论文汇编[C];2012年

7 王月海;蔡运昌;;妊娠相关血浆蛋白A与急性冠状动脉综合征临床相关性研究[A];贵州医学会心血管病学分会、心电生理与起搏学分会2008年学术年会专题讲座及论文摘要汇编[C];2008年

8 王永霞;胡宇才;朱明军;高传玉;李兴渊;;血清高敏C反应蛋白与急性冠状动脉综合征临床相关性研究[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年

9 牛振民;朱初麟;刘新灿;朱明军;胡宇才;;血清高敏C反应蛋白与急性冠状动脉综合征临床相关性研究[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年

10 于珍;易树华;周可树;李增军;徐燕;邱录贵;;TOSO基因在我国CLL患者中表达情况及其与临床相关性研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

相关重要报纸文章 前3条

1 王昕;钙增敏剂的特征分类及可能的临床相关性 Ca2+ Sensitizers：Characteristics,Classification and Potential ClinicalRelevance[N];中国医药报;2006年

2 何志高;试验为体观察为用[N];医药经济报;2001年

3 衣晓峰 李建辉;糖尿病自主神经病变研究新进展[N];中国医药报;2003年

相关博士学位论文 前1条

1 乐Pr;类风湿性关节炎患者外周血Th17细胞表达水平及其临床相关性[D];中国协和医科大学;2008年

相关硕士学位论文 前10条

1 马庆来;MiR-330-3p表达水平与ccRCC临床相关性及其作用机制的初步研究[D];大连医科大学;2018年

2 陈文红;急性缺血性脑血管病交感神经皮肤反应特点与临床相关性研究[D];华中科技大学;2016年

3 杨雪;妊娠相关血浆蛋白A与急性冠脉综合征临床相关性研究[D];天津医科大学;2006年

4 田寅;FATS在肺癌组织中的表达及临床相关性研究[D];天津医科大学;2012年

5 李新叶;PBEF与儿童急性呼吸窘迫综合征、噬血细胞综合征的临床相关性[D];广西医科大学;2014年

6 蒋煜文;白血病抑制因子在人不同程度骨性关节炎组织的表达定位及临床相关性研究[D];昆明医学院;2004年

7 曾剑;Survivin mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及其与临床相关性的研究[D];苏州大学;2005年

8 叶娟;胱硫醚-γ-裂解酶与乳腺癌的临床相关性研究[D];河南大学;2017年

9 张攀;外周血可溶性CXCL16与慢性肾脏病的临床相关性研究[D];第二军医大学;2012年

10 曾庆哲;阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征和肥胖低通气综合征的临床相关性分析[D];安徽医科大学;2016年

本文编号：2660658