人诱导多能干细胞（iPSc）外泌体的分离鉴定及其刺激人肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的研究

发布时间：2020-05-27 20:36

【摘要】：外泌体是一种由细胞内多泡体与细胞膜融合后分泌到细胞外的膜性囊泡,直径在40～120nm,呈杯状或碟状小体。其内包含脂类、蛋白及微小RNA等多种成分,在免疫监视、神经塑形、组织修复、干细胞存活、凝血功能等方面扮演重要角色。有研究表明,干细胞来源的外泌体能够促进肿瘤发生,转移。但也有研究者持反对意见,认为干细胞来源的外泌体抑制了肿瘤的生长。因此,本论文重点研究了人诱导多能干细胞(iPSc)外泌体的分离鉴定及其刺激人肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的能力。研究目的:分离鉴定人iPS细胞外泌体及其刺激人肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的能力。研究方法:改进人iPS细胞和人肺腺癌A549细胞培养条件。采用超速离心法从人iPS细胞培养液上清中分离出人iPS细胞外泌体,并通过透射电子显微镜观察外泌体形态,利用Western blot蛋白质印迹法检测其表面跨膜蛋白的表达。采用细胞活力测定MTS法、Transwell小室法分别检测外泌体对人肺腺癌A549细胞增殖侵袭作用的影响;采用划痕法了解人iPS细胞外泌体对人肺腺癌A549细胞迁移能力的影响。研究结果和结论:分离获得人iPS细胞外泌体,透射电镜观察呈圆形或椭圆形杯口状,大小均匀,直径在1OOnm左右,Western Blot鉴定外泌体表面具有丰富的CD63蛋白;MTS结果显示人iPS细胞外泌体对A549细胞具有促进增殖的作用,且具有时间及浓度依赖的特征(P0.05);Transwell小室法结果显示,人iPS细胞外泌体具有增强A549细胞侵袭能力的作用(P0.05);划痕法结果表明人iPS细胞外泌体具有促进A549细胞迁移运动的作用(P0.05)。结果表明人iPS细胞外泌体能促进人肺腺癌A549细胞增殖、增强其侵袭、迁移运动的能力。
【图文】：

形态特征,细胞的,圆形球,第三

第三章实验结果第三章实验结果逡逑．邋１人肺腺癌Ａ５４９细胞的形态特征逡逑人肺腺癌Ａ５４９细胞刚传代时为分散的圆形球状，，悬浮在培养基中；贴壁上皮样生长，多为多角形、长梭形等。由于人肺腺癌Ａ５４９细胞增殖及分化很强，因此也能观察到细胞之间相互挤压形成的不规则多边形状。（图３．邋１）。逡逑

形态特征,细胞的,细胞外,小囊

３．邋３人ｉＰＳ细胞外泌体的电镜结果逡逑通过透射电子显微镜下的观察结果显示，ｉＰＳ细胞外泌体多呈圆形或楠圆形逡逑小囊泡，典型呈杯口状，大小均匀，直径在ｌＯＯｎｍ左右（图３．３）。逡逑２８逡逑
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R734.2

【参考文献】