骨唾液酸蛋白及其糖基化修饰对乳腺癌浸润转移的影响

发布时间：2020-07-05 15:15

【摘要】：目的:探讨骨唾液酸蛋白(Bone sialoprotein,BSP)及其糖基化修饰对乳腺癌细胞浸润转移的影响及可能的作用机制。方法:1.通过CCK-8和transwell实验分别检测BSP对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231增殖和浸润转移的影响,在此基础上用不同的糖苷酶获得去N、O糖链或末端唾液酸的BSP,再用CCK-8和transwell实验分别检测不同糖基化修饰的BSP对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖和浸润转移的影响。2.用Western Blot检测BSP及不同糖基化修饰的BSP对MCF-7和MDA-MB-231细胞浸润转移相关因子蛋白水平的表达。3.用CCK-8和transwell实验分别检测1α,25(OH)2D3(1α,25-Dihydroxyvitamin D3,1α,25(OH)2D3)对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖和浸润转移的影响,然后用免疫共沉淀检测BSP是否与1α,25(OH)2D3竞争结合VDR从而影响乳腺癌细胞的浸润转移。结果:1.BSP促进MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖和浸润转移。不同糖基化修饰的BSP促进MCF-7细胞的增殖,但对MCF-7细胞的浸润转移影响不明显;不同糖基化修饰的BSP对MDA-MB-231细胞增殖和浸润转移的影响不同,BSP的N-糖基化对其增殖的影响减弱,BSP的唾液酸化对其浸润转移的影响减弱。2.BSP促进MCF-7和MDA-MB-231细胞中TGF-β、Smad2/3、MMP2、VEGF蛋白水平的表达,而BSP的唾液酸化对两种细胞中这些蛋白水平的表达影响都减弱。在MCF-7细胞中,MMP2蛋白水平的升高主要是由BSP的O-糖基化促进的,而在MDA-MB-231细胞中其变化主要是由BSP的N-糖基化促进的。3.在MCF-7和MDA-MB-231细胞中加入100 n M的1α,25(OH)2D3,两株细胞的增殖和浸润转移均被抑制。免疫共沉淀检测到BSP与VDR能相互结合,并且这种结合被1α,25(OH)2D3抑制。结论:BSP促进MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖和浸润转移,1α,25(OH)2D3抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖和浸润转移。BSP可能是通过TGF-β信号通路或是与1α,25(OH)2D3竞争结合VDR来影响乳腺癌细胞的浸润转移。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.9
【图文】：

SP 的 3D 模型图。蛋白质链呈黄色带状；连续的酸性残基的区域被染成红色；基位于小球表面的一个环上，以棒模式呈现，覆盖其表面积的约 34％，N-聚别着色为深蓝色和浅蓝色；Ca2+离子呈现为绿色的球体，大多数位于表面上；链以洋红色显示，两种硫酸化酪氨酸的侧链显示为橙色。

图...…日.山胜

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本文编号：2742777