PsiRNA-STAT3对乳腺癌4T1细胞凋亡作用的体外研究

发布时间：2020-08-01 20:03

【摘要】：近年来随着我国社会、经济发展,人口老龄化,生活方式以及环境的变化,癌症的发病率和死亡率总体呈上升趋势。其中乳腺癌是最主要的恶性肿瘤之一,发病率位居女性癌症首位,危害生命健康。目前乳腺癌的治疗手段主要有,手术治疗、放疗、化疗、靶向治疗等。但这些治疗方法均未取得突破性进展,主要原因是肿瘤细胞具有无限增殖和侵袭转移的能力,在明确诊断为肿瘤时,已伴有淋巴结及其他组织的转移。肿瘤的发生、发展、侵袭和转移过程中,涉及多种细胞信号传导通路及复杂的作用机制。其中,STAT3信号通路在恶性肿瘤的侵袭、转移过程中起着至关重要的作用。所以通过阻断或干扰STAT3信号传导通路来抑制细胞的恶性转化,诱导细胞凋亡,为乳腺癌基因靶向治疗带来新的研究方向。目的:研究PsiRNA-STAT3对乳腺癌4T1细胞凋亡作用的影响。方法:采用MTT法及Transwell小室法检测PsiRNA-STAT3对乳腺癌细胞增殖及侵袭能力的影响;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色、线粒体膜电位检测PsiRNA-STAT3对乳腺癌细胞凋亡影响;流式细胞仪检测PsiRNA-STAT3对乳腺癌细胞周期及细胞凋亡的影响;Western-blot检测PsiRNA-STAT3对STAT3、Cyclin-D1、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达的调节作用。结果:MTT及侵袭小室实验结果显示,PsiRNA-STAT3能够明显抑制乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力,分别与Mock组及Scramble比较具有显著性差异(P0.05),Mock组与Scramble组比较无统计学意义(P0.05);吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)检测细胞凋亡,PsiRNA-STAT3组乳腺癌细胞凋亡率与Mock组比较具有统计学意义(P0.05);本研究采用荧光显微镜观察了线粒体膜电位的变化,PsiRNA-STAT3能诱导乳腺癌细胞凋亡,分别与Mock组Scramble组比较具有显著差异(P0.05),流式细胞仪检测细胞周期,PsiRNA-STAT3组G0/G1期细胞数明显增多,S期细胞数明显减少,分别与Mock组及Scramble组比较具有显著性差异(P0.05)。表明PsiRNA-STAT3能够阻止细胞由G0/G1期进入S期,从而抑制细胞DNA的合成。流式细胞仪检测细胞凋亡率,Mock组、Scramble组及PsiRNA-STAT3组凋亡率分别为:4.5%、10.64%、39.68%。Western-blot检测蛋白表达量,PsiRNA-STAT3组Pro-Caspase-3表达量明显降低、Cleaved-Caspase-3表达量升高,与Scramble组比较均有显著性差异(P0.05);Cyclin-D1白表达水平明显降低,与Mock组之间比较具有统计学意义(P0.05);PsiRNA-STAT3组Bcl-2蛋白表达水平降低、Bax表达水平增高,分别与Mock组及Scramble组比较均显著性差异(P0.05)。表明PsiRNA-STAT3能够显著调节上述蛋白表达。结论:PsiRNA-STAT3能显著诱导细胞凋亡的发生。其机制可能是通过降低乳腺癌细胞线粒体膜电位,破坏线粒体膜的完整性,STAT3、Cyclin-D1、Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达量上调,Bax/Bcl-2比值升高,Pro-Caspase-3被激活,Cleaved-Caspase-3诱导细胞凋亡。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.9

【参考文献】