SCD1对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭及增殖能力的影响
发布时间：2020-11-09 21:15
目的探究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Stearoyl-Coenzyme A desaturase1,SCD1)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭及增殖能力的影响,并初步观察SCD1对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮组织间充质化(EMT)相关蛋白的改变,为SCD1在乳腺癌的防治中提供理论基础。方法1.将干扰SCD1基因三个不同位点的SCD1-siRNA利用脂质体转染的方法转染至人乳腺癌MDA-MB-231细胞,分别作为siRNA1组,siRNA2组,siRNA3组,以及未被转染siRNA的阴性对照组(NC组)。2.转染siRNA后,通过蛋白质免疫印迹(western blot,WB)检测各组细胞中SCD1蛋白被干扰后的表达情况。3.用MTT法检测人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖能力;采用划痕实验检测乳腺癌细胞迁移能力;Transwell体外侵袭实验检测乳腺癌细胞侵袭能力。4.利用WB技术检测SCD1干扰后乳腺癌MDA-MB-231细胞中上皮组织间充质化(EMT)相关蛋白的表达情况,进一步验证和分析SCD1对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭及增殖的影响。结果1.WB检测显示:转染SCD1-siRNA后的三组人乳腺癌MDA-MB-231细胞,SCD1蛋白表达较转染siRNA的阴性对照组(NC组)明显减少(P0.05)。2.MTT实验显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移增殖能力显著减弱(P0.05)。3.Transwell侵袭实验显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力显著减弱(P0.05)。4.划痕实验显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力显著减弱(P0.05)。5.WB检测显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞E-cadherin表达增加,N-cadherin和β-catenin的表达均减少(P0.05)。结论1.SCD1增加MDA-MB-231细胞体外侵袭、迁移及增殖能力。2.SCD1影响人乳腺癌MDA-MB-231细胞EMT相关蛋白表达。
【学位单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R737.9
【部分图文】：
第 4 章 实验结果.1 SCD1-siRNA 对 MBA-MB-231 细胞干扰后 SCD1 蛋白表达况将干扰 SCD1 基因三个不同位点的 SCD1-siRNA（浓度为 50nM）利用脂质转染的方法转染至人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞，分别作为 siRNA1 组，siRNA2，siRNA3 组，以及未被转染 siRNA 的阴性对照组（NC 组）。转染 siRNA 后，过蛋白质免疫印迹（western blot，WB）检测各组细胞中 SCD1 蛋白被干扰后表达情况如下：SCD1-siRNA 各组 SCD1 蛋白表达较阴性对照组（NC 组）明减少，说明 SCD1-siRNA 干扰 SCD1 蛋白表达的效果显著（P＜0.05）。
南华大学硕士学位论文2 SCD1 低表达抑制人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 的增殖能力通过 MTT 法分别检测 96 孔班接种 24h、48h、72h（即转染 48h、72h、96h）iRNA1 siRNA2 siRNA3 三组实验组细胞和 NC 组细胞的增殖能力。结果如图，相比于阴性对照 NC 组，siRNA1 siRNA2 siRNA3 实验组细胞的增殖能力均降低（P＜0.05），这说明：干扰 SCD1 蛋白可显著减低 MDA-MB-231 细胞殖能力。
第 4 章 实验结果3 SCD1 低表达抑制人乳腺癌细胞 MD1-MB-231 细胞迁分别取转染 SCD1-siRNA 后 0H 24H 48H 72H 这四个点观察四组情况，发现相比于阴性对照 NC 组，siRNA1 siRNA2 siRNA3 实验组能力均明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。NC siRNA1 siRNA2 siRNA3
【参考文献】
本文编号：2876979
【学位单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R737.9
【部分图文】：
第 4 章 实验结果.1 SCD1-siRNA 对 MBA-MB-231 细胞干扰后 SCD1 蛋白表达况将干扰 SCD1 基因三个不同位点的 SCD1-siRNA（浓度为 50nM）利用脂质转染的方法转染至人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞，分别作为 siRNA1 组，siRNA2，siRNA3 组，以及未被转染 siRNA 的阴性对照组（NC 组）。转染 siRNA 后，过蛋白质免疫印迹（western blot，WB）检测各组细胞中 SCD1 蛋白被干扰后表达情况如下：SCD1-siRNA 各组 SCD1 蛋白表达较阴性对照组（NC 组）明减少，说明 SCD1-siRNA 干扰 SCD1 蛋白表达的效果显著（P＜0.05）。
南华大学硕士学位论文2 SCD1 低表达抑制人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 的增殖能力通过 MTT 法分别检测 96 孔班接种 24h、48h、72h（即转染 48h、72h、96h）iRNA1 siRNA2 siRNA3 三组实验组细胞和 NC 组细胞的增殖能力。结果如图，相比于阴性对照 NC 组，siRNA1 siRNA2 siRNA3 实验组细胞的增殖能力均降低（P＜0.05），这说明：干扰 SCD1 蛋白可显著减低 MDA-MB-231 细胞殖能力。
第 4 章 实验结果3 SCD1 低表达抑制人乳腺癌细胞 MD1-MB-231 细胞迁分别取转染 SCD1-siRNA 后 0H 24H 48H 72H 这四个点观察四组情况，发现相比于阴性对照 NC 组，siRNA1 siRNA2 siRNA3 实验组能力均明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。NC siRNA1 siRNA2 siRNA3
【参考文献】
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6 李颖平;张映;邵国青;;一种新的基因敲除术-RNAi[J];生物技术通报;2006年03期
本文编号：2876979
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