CagA与YWHAE互作激活NF-κB的途径及细胞侵袭转移效应

发布时间：2020-12-09 18:45

　　目的:细胞毒素相关蛋白A（cytotoxin-associated antigen A,CagA）是由幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）分泌的重要毒力蛋白,在胃癌的致病中起重要作用。大量研究表明,CagA可以和宿主细胞内的多种蛋白相互作用,激活多条信号通路,对细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭转移等生物学行为产生影响。本课题组在前期的研究工作中证实CagA可以和胃黏膜细胞蛋白YWHAE相互作用,激活NF-κB,但是具体的激活途径尚未阐明。因此,本研究在此基础上,拟进一步研究CagA与YWHAE互作激活NF-κB的具体途径,并深入探讨其引起的细胞侵袭转移效应,旨在进一步阐明CagA的致病机制。方法:1构建腺病毒Ad-CagA首先构建重组质粒pMD19-T-CagA,继而构建重组穿梭质粒pShuttleIRES-hrGFP-CagA,进一步利用同源重组的原理,构建重组腺病毒质粒pAdCagA。转染293A细胞,进行病毒包装,获得腺病毒Ad-CagA。Ad-CagA和Ad-GFP分别以不同浓度感染AGS细胞,荧光显微镜观察荧光的表达情况,确定最适感染的MOI值,... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

构建重组腺病毒流程

pMD19-T-CagA的构建

d-CagA 的构建和鉴以 Pac I 酶切鉴定，未 和 4.5kb 左右的两条agA（图 1.5）。tle-IRES-hrGFP-CagAn of the recombinant phrGFP-CagAShuttle-IRES-hrGFP-ca


本文编号：2907314