Shc3通过激活MEK/ERK影响肝细胞肝癌增殖和转移的研究
发布时间：2020-12-19 20:38
目的:肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,肝细胞肝癌占肝癌总数的70-90%,肿瘤发生转移是肝细胞肝癌患者预后差的主要原因。手术切除依然是肝癌的首选治疗手段,肝癌中晚期不能手术治疗的患者大部分选择索拉非尼进行传统化疗,然而索拉非尼治疗效果有限。因此我们希望发现新的药物靶点,为肝癌治疗提供新手段。方法:利用基因芯片技术比较不同转移能力肝癌细胞系的差异表达基因,筛选出转移相关基因Shc3,分别用实时定量PCR和western blot方法验证芯片数据。检测临床肝癌病人组织标本中Shc3的表达量,结合实验结果和临床病理资料分析考察Shc3与转移、病理分期和不良预后的关系。构建稳定表达的Shc3高表达和降表达肝癌细胞系。通过生长曲线实验、划痕实验、趋化实验、侵袭实验观察Shc3表达对肝癌细胞增殖和转移能力的影响。利用蛋白质谱学方法寻找与Shc3相互作用的蛋白。用Western blot实验检测Shc3下游激活通路。用裸鼠皮下成瘤模型和原位肝癌移植模型考察体内Shc3表达对肝癌转移能力的影响。结果:基因芯片数据分析发现肝癌细胞中Shc3表达量与肝癌细胞的转移和侵袭能力存在正相关关系。同时,33名肝...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１肝癌细胞系基因芯片热图??
Ｓｈｃ４和１８ｓｒＲＮＡ的ｍＲＮＡ表达水平９结果显示不仅Ｓｈｃ３的ｍＲＮＡ水乎在恶??性肝癌细胞系中显著性增高，而Ｍ?Ｓｈｅ家族的其他三个亚型Ｓｈｃｌ、Ｓｈｃ２和Ｓｈｃ４??的ｍＲＮＡ水平在肝癌细胞系中的变化弁无Ｍ蓍增加或者减少（ｐ＜０．０５，图１．２）。??２１０＂］?■?Ｈｕｈ７?￣??＾?８?．?□?ＭＨＣＣ９７Ｌ??Ｉ?■?ＨＣＣＬＭ３??ｅ６一??＼ｌｉｊ１ａ?ｉｌｌｉＰ??Ｓｈｃ１?Ｓｈｃ２?Ｓｈｃ３?Ｓｈｃ４??图１．２?Ｓｈｅ家族在Ｈｕｈ７，?ＭＨＣＣ９７Ｌ和ＨＣＣＬＭ３三个肝癌细胞系中的ｍＲＮＡ??的表达??用蛋＿＿白印迹实验（ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ）检测Ｓｈｃ３在常肝细胞和肝痛细胞中的蛋??白表达量％?Ｓｈｃ３表达在恶性肝癌细胞系ＭＨＣＣ９７Ｌ、ＭＨＣＣ９７Ｈ、ＨＣＣＬＭ３中??显著增高《结果表明，Ｓｈｃ３蛋白在庄常肝细胞７７０２和低转移能力的肝癌细胞??Ｈｕｈ７中低表达，在高转移能力的肝癌细胞系ＭＨＣＣ９７Ｌ，ＭＨＣＣ９７Ｈ和??ＨＣＣＬＭ３中显著高表达，与塞因芯片分析结果和实时定暈ＰＣＲ结果一致（图??１．３）〇??Ｐ－ａｃｔｉｎ??图１．３?Ｓｈｃ３蛋白在肝正常细胞和肝癌细胞系中的表达??１．２．?３?Ｓｈｃ３在临床样本中高表达??２０１５－２０１６年＿肿癣医院３３名临床肝癌病人，选取其癌和癌旁组织浸泡在??ＲＮＡ保护液中放在－２０°Ｃ冰箱保存（表１．１）。收取完毕后
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Portal vein tumor thrombus is a bottleneck in the treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Ju-Xian Sun,Jie Shi,Nan Li,Wei-Xing Guo,Meng-Chao Wu,Wan-Yee Lau,Shu-Qun Cheng. Cancer Biology & Medicine. 2016(04)
本文编号：2926537
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１肝癌细胞系基因芯片热图??
Ｓｈｃ４和１８ｓｒＲＮＡ的ｍＲＮＡ表达水平９结果显示不仅Ｓｈｃ３的ｍＲＮＡ水乎在恶??性肝癌细胞系中显著性增高，而Ｍ?Ｓｈｅ家族的其他三个亚型Ｓｈｃｌ、Ｓｈｃ２和Ｓｈｃ４??的ｍＲＮＡ水平在肝癌细胞系中的变化弁无Ｍ蓍增加或者减少（ｐ＜０．０５，图１．２）。??２１０＂］?■?Ｈｕｈ７?￣??＾?８?．?□?ＭＨＣＣ９７Ｌ??Ｉ?■?ＨＣＣＬＭ３??ｅ６一??＼ｌｉｊ１ａ?ｉｌｌｉＰ??Ｓｈｃ１?Ｓｈｃ２?Ｓｈｃ３?Ｓｈｃ４??图１．２?Ｓｈｅ家族在Ｈｕｈ７，?ＭＨＣＣ９７Ｌ和ＨＣＣＬＭ３三个肝癌细胞系中的ｍＲＮＡ??的表达??用蛋＿＿白印迹实验（ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ）检测Ｓｈｃ３在常肝细胞和肝痛细胞中的蛋??白表达量％?Ｓｈｃ３表达在恶性肝癌细胞系ＭＨＣＣ９７Ｌ、ＭＨＣＣ９７Ｈ、ＨＣＣＬＭ３中??显著增高《结果表明，Ｓｈｃ３蛋白在庄常肝细胞７７０２和低转移能力的肝癌细胞??Ｈｕｈ７中低表达，在高转移能力的肝癌细胞系ＭＨＣＣ９７Ｌ，ＭＨＣＣ９７Ｈ和??ＨＣＣＬＭ３中显著高表达，与塞因芯片分析结果和实时定暈ＰＣＲ结果一致（图??１．３）〇??Ｐ－ａｃｔｉｎ??图１．３?Ｓｈｃ３蛋白在肝正常细胞和肝癌细胞系中的表达??１．２．?３?Ｓｈｃ３在临床样本中高表达??２０１５－２０１６年＿肿癣医院３３名临床肝癌病人，选取其癌和癌旁组织浸泡在??ＲＮＡ保护液中放在－２０°Ｃ冰箱保存（表１．１）。收取完毕后
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Portal vein tumor thrombus is a bottleneck in the treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Ju-Xian Sun,Jie Shi,Nan Li,Wei-Xing Guo,Meng-Chao Wu,Wan-Yee Lau,Shu-Qun Cheng. Cancer Biology & Medicine. 2016(04)
本文编号：2926537
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