晚期乳腺癌治疗模式及疗效预测因子的探索性研究

发布时间：2020-12-27 15:26

　　[背景和目的]外泌体,是一种由各种细胞分泌的细胞外囊泡,并携带大量与供体细胞来源相关的蛋白质、核酸等组分。近年来的研究发现,其与乳腺癌的侵袭转移及耐药密切相关。本研究拟在接受多西他赛联合卡培他滨方案一线治疗的晚期乳腺癌患者中进行血浆外泌体miRNA的探索性研究,以期发掘可预测化疗敏感性、疗效和预后的分子标志物。[方法]本研究共纳入中国医学科学院肿瘤医院内科2014年5月至2016年3月接受多西他赛联合卡培他滨方案一线化疗的晚期乳腺癌患者18例,比较不同疗效乳腺癌患者血浆外泌体中miRNA表达水平的差异,并通过生物信息学方法对其下游靶基因及其功能和信号转导通路进行分析,探索血浆外泌体miRNA与乳腺癌的诊断及外泌体miRNA调控网络与乳腺癌化疗疗效的相关性。[结果]通过二代测序共获得1513种已知miRNA,miR-451a在所有患者血浆外泌体中表达量最高。根据化疗敏感性、化疗前后变化、生存差异及分子分型进行分组,对不同分组样品间miRNA的差异表达进行分析,分别筛选出18个、21个、15个及 11 个差异表达 miRNA,其中,miR-218-5p 等 18 个 miRNA 在 Kap... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－２转移性乳腺癌患者血浆外泌体电镜示图（Ｘ８００００）??２．２?Ｂｒａｄｆｏｒｄ

ｉ??＇??图１－２转移性乳腺癌患者血浆外泌体电镜示图（Ｘ８００００）??２．２?Ｂｒａｄｆｏｒｄ法检测蛋白浓度标准曲线??通过Ｂｒａｄｆｏｒｄ法检测５９５ｎｍ波长处吸光度与蛋白浓度之间的相关性。吸光度??对８８八浓度的关系曲线为丫＝０．０７４５３＼＋０．０３］１５，１＾２＝０．９９４１，二者呈线性关系，提??示拟合度良好。??２．３?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ血浆外泌体表面蛋白表达情况??ＣＤ６３、ＣＤ８１为血楽外泌体的特异性表面蛋白，应用ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ法对本研究所??提取患者外泌体进行验证，结果如图１－３所示，患者血浆提取外泌体ＣＤ６３及ＣＤ８１??高表达。为进一步证实实验结果?＇再次重复ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ法２次，结果一致。??４１０ＮＣ细胞血浆外泌??５３ｋＤａ??ＣＤ６３??４０ｋＤａ??ＧＡＰＤＨ??２８ｋＤａ??ＣＤ８１??图１－３血浆外泌体表面特异性蛋白ＣＤ

第一部分结果??２．４血浆外泌体ＲＮＡ提取结果??血浆外泌体ＲＮＡ提取后质检结果如图１?－４所示，主峰出现在２５ｎｔ左右，２００ｎｔ??以上基线平稳，无明显杂峰，说明外泌体ＲＮＡ分离提取效果较好，所有样品质量??合格，满足ＲＮＡ检测要求，保证测序结果可靠，可继续行后续检测。??０１０Ｓ１ＪＸ?（?１：２?］??？ＵＪ??８０－??７０－??６０－??５０－??知＿??？－??２０－??１０－??０－??２Ｓ?２００?Ｓ００?）０００?ＸＩ００?４〇００?【ｎｔ

【参考文献】：
期刊论文
[1]外泌体及其在肿瘤诊疗中的意义[J]. 张敏,张晨光,丁卫.  生理科学进展. 2014(05)
[2]Aurora-A在乳腺癌致瘤机制和预后方面的研究进展[J]. 夏良平,周菲菲,杨名添,刘强.  癌症. 2009(06)



本文编号：2941988