CXCL12/CXCR4轴在脐血间充质干细胞影响白血病细胞增殖和凋亡中作用的研究

发布时间：2020-12-30 00:40

　　目的:探讨脐血间充质干细胞对急性髓细胞白血病细胞株HL-60、急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞增殖和凋亡的影响及CXCL12/CXCR4信号轴在其中发挥的作用;探讨AMD3100、G-CSF对CXCL12/CXCR4信号轴的影响及其机制。方法:将HL-60细胞株、Jurkat细胞株分别与人脐血间充质干细胞（HUCMSC）共培养建立共培养模型,并加用G-CSF、AMD3100单药或联合处理共培养模型。采用CCK-8法检测细胞活力,用Annexin-V/PI试剂盒检测细胞凋亡和细胞周期,流式细胞术和蛋白印迹法分别检测白血病膜表面CXCR4蛋白及总CXCR4蛋白表达情况。结果:1.与HUCMSC共培养后HL-60细胞、Jurkat细胞增殖活力降低,凋亡减少,二者G0/G1期细胞增多;2.加入G-CSF和AMD3100可进一步降低与HUCMSC共培养体系中HL-60、Jurkat的细胞活力,干扰HUCMSC对HL-60、Jurkat的凋亡抑制作用,使两种细胞G0/G1期细胞比例减少,且两药联合作用时更明显;3.G-CSF可同时降低HL-60、Jurkat细胞膜表面CXCR4及细胞质内总... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

光学显微镜下细胞形态a：HUCMSC细胞（×100）；b：Jurkat细胞与HUCMSC共培

图 3.2 不同组细胞经 AMD3100（5μg/ml）、G-CSF（50ng/ml）或联合加药作用 48h 后测得细胞活力分析 c：HL-60 细胞；d：Jurkat 细胞.3.3 细胞凋亡分析单独培养组与 HUCMSC 共培养组细胞经 AMD3100（5μg/ml）、G-CS

图 3.4 不同组细胞经 AMD3100（5μg/ml）、G-CSF（50ng/ml）或联合加药作用 48h 后测得的细胞凋亡率分析 e：HL-60 细胞；f：Jurkat 细胞.3.4 细胞周期分析单独培养组与 HUCMSC 共培养组细胞经 AMD3100（5μg/ml）、G-CSF（50ng/ml）单药或联合处理 48h 后检测其细胞周期发现，共培养组 HUCMSC 可明显阻滞细胞周期，使 HL-60、Jurkat 细胞 G0/G1 期细胞增多，其中 HL-60 由（53.73±4.30）% 提高至（55.82±2.20）%，Jurkat 由（62.25±1.07）% 提高至（74.51±4.69）%（P＜0.05）。单独培养时，两种药物对 HL-60、Jurkat 细胞的细胞周期均无影响（P＞0.05)。共培养模型中，经 AMD3100（5ug/ml）、G-CSF（50ng/ml）单药或联合处理后，HL-60及 Jurkat 细胞 G0/G1 期细胞比例均较共培养对照组降低，其中 HL-60 各组分别是（49.70±3.55）%，（48.75±4.34）%，和（48.51±1.78）% ; Jurkat 各组分别是（57.04±1.70）%，（55.28±3.73）% 和（53.65±2.15）%（P＜0.05），其中共培养的 Jurkat 细胞系 G0/G1 期细胞比例降低较 HL-60 更明显(表 3.3，图 3.5，图 3.6）。表明与 HUCMSC 共培养模型中，HUCMSC 可增加 HL-60、Jurkat 细胞 G0/G1 期细


本文编号：2946635