人卵巢癌细胞对人脐带间充质干细胞的影响

发布时间：2021-01-24 01:55

　　间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells, MSCs）是一类能够自我更新复制和向不同方向分化的成体干细胞,能分化为间质组织,并经诱导分化成为多种组织细胞。人脐带间充质干细胞（Human UmbilicalCord Mesenchymal Stem Cells, HUMSCs）来源于新生儿脐带华通氏胶,因不受伦理限制、免疫原性低、体外增殖能力强等优势,而成为细胞治疗中的种子细胞,是再生医学,细胞移植及疾病治疗的研究热点。然而对于HUMSCs治疗肿瘤的机理还需进一步地研究探讨,所以本研究选用HUMSCs口卵巢癌细胞（HO8910）共培养,进而探讨肿瘤细胞的微环境对HUMSCs生物活性的影响。通过“爬片”的方法从人脐带中分离获得HUMSC s,采用流式细胞术检测干细胞的表面标记物,使用Trans well共培养HUMSCs和HO8910,利用MTT法检测共培养对HUMSCs增殖及迁移的影响,用Western Blot测定共培养对HUMSCs凋亡的影响。流式细胞仪检测显示HUMSCs高表达CD105、CD90、CD73、 CD29,低表达CD45、CD34和HLA-DR。HO... 

【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
一 引言
二 实验材料
    2.1 主要试剂及实验材料
    2.2 主要仪器设备
    2.3 常用溶液的配制
        2.3.1 完全培养基DMEM的配制
        2.3.2 配制PBS
        2.3.3 胰蛋白酶的配制
        2.3.4 电泳缓冲液（Running buffer）的配制
        2.3.5 转膜缓冲液（Transfer buffer）的配制
        2.3.6 TBST Buffer液的配制
        2.3.7 显影液和定影液的配制
        2.3.8 配制明胶
        2.3.9 配制饥饿培养基
三 实验方法
    3.1 HUMSC的分离和培养
        3.1.1 HUMSCs的分离
        3.1.2 HUMSCs的传代
        3.1.3 HUMSC的冻存
        3.1.4 HUMSCs的复苏
    3.2 HUMSC生物学特性鉴定
        3.2.1 HUMSCs形态学的观察
        3.2.2 HUMSCs标准曲线的制作
        3.2.3 HUMSCs生长曲线的制作
        3.2.4 HUMSCs的细胞表面标记物的检测
        3.2.5 上清液的收集
        3.2.6 蛋白的提取
        3.2.7 Wensten Blot
        3.2.8 HO8910上清液对HUMSC增殖的影响
        3.2.9 共培养对HUMSC增殖的影响
        3.2.10 MTT法检测共培养对HUMSC细胞迁移的影响
四 实验结果与分析
    4.1 HUMSCs的分离与培养
    4.2 HUMSC标准曲线的绘制
    4.3 HUMSC生长曲线的绘制
    4.4 HUMSC表面标记物的检测
    4.5 共培养对HUMSC生物功能的影响
        4.5.1 HO8910上清液对HUMSC细胞增殖的影响
        4.5.2 培养HO8910上清液对HUMSC细胞迁移的影响
        4.5.3 培养HO8910上清液对HUMSC细胞凋亡的影响
        4.5.4 Transwell共培养对HUMSC细胞增殖的影响
        4.5.5 Transwell共培养对HUMSC细胞迁移的影响
五 讨论
六 结论
文献综述
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Differentiation of rat marrow mesenchymal stem cells into pancreatic islet beta-cells[J]. Li-Bo Chen Xiao-Bing Jiang Lian Yang Department of Surgery,Union Hospital of Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430022,Hubei Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(20)



本文编号：2996339