DLX6-AS1/miR-204-5p/OCT1正反馈通路促进胃癌进展的机制研究
发布时间：2021-02-06 18:28
目的:胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,每年全球约有超过100万的新发病例以及80万的死亡病例。目前,手术联合放化疗、免疫治疗以及靶向治疗仍然是胃癌治疗的有效手段,但由于肿瘤早期症状不典型且我国居民体检意识相对较弱,我国的早期胃癌检出率较低。因此,发现并揭示胃癌的特异性标记物及有效治疗靶点对疾病的诊治具有深远的意义。研究证实人类基因组中有98%的基因不具备编码蛋白的能力,因此被称为非编码基因。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是指一类长度大于200个核苷酸且不具有开放阅读框的转录本。近年来,围绕lncRNA在胃癌中的作用及机制研究已成为学术热点,大量研究报道lncRNA可影响肿瘤的增殖、侵袭、迁移以及凋亡等表型变化。我们通过分析TCGA（The Cancer Genome Atlas）数据库发现lncRNA DLX6-AS1在胃癌中过表达并与预后相关。DLX6-AS1是长度为1990bp的转录组,位于7q21.3染色体上。已有学者报道DLX6-AS1在肝癌、骨巨细胞瘤、前列腺癌、肺癌、卵巢癌中过表达并起促癌作用。尽管如此,DLX6-AS1在胃癌中...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
DLX6-AS1在TCGA数据库的胃癌组织中呈高表达且与预后相关
为进一步验证TCGA数据库中的高通量结果,我们通过qRT-PCR实验检测56组胃癌及对应癌旁非癌组织的DLX6-AS1表达水平。如图1.2A所示,DLX6-AS1在胃癌组织的表达水平显著高于癌旁组织,此结果也与TCGA数据库的高通量数据结果相一致。我们检测了DLX6-AS1在胃癌细胞系和胃正常粘膜上皮细胞中的表达水平以进一步阐释DLX6-AS1在胃癌中的功能及作用机制。将GES-1的表达水平作为标准组,胃癌细胞系中DLX6-AS1均呈过表达,且SGC-7901和AGS细胞系的表达水平最高(图1.2B)。3.3 DLX6-AS1的表达水平与临床病理资料的关系
为进一步证实DLX6-AS1在胃癌发生发展中的作用,我们通过转染siRNA-DLX6-AS1下调胃癌细胞系中DLX6-AS1的表达水平,并通过qRT-PCR实验进行验证。如图2.1所示,转染siRNA-DLX6-AS1后可有效下调DLX6-AS1在胃癌细胞系SGC-7901和AGS中的表达水平。由于si-DLX6-AS1#2和si-DLX6-AS1#3的转染效率最高,因此我们选择这两对序列进行后续的细胞功能实验和机制研究。CCK8实验可以检测细胞的增殖能力。如图2.2A所示,与对照组相比,敲除DLX6-AS1后SGC-7901和AGS细胞系的增殖能力明显下降。克隆形成实验也进一步证实,DLX6-AS1可促进胃癌细胞的增殖(图2.2B)。应用Transwell实验可进一步验证细胞的迁移和侵袭能力。如图2.2C所示,沉默DLX6-AS1后可显著抑制胃癌细胞的迁移和侵袭功能。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Long non-coding RNA HULC as a diagnostic and prognostic marker of pancreatic cancer[J]. Zheng-Lin Ou,Zhen Luo,Ye-Bin Lu. World Journal of Gastroenterology. 2019(46)
[2]Identification and prediction of novel non-coding and coding RNA-associated competing endogenous RNA networks in colorectal cancer[J]. Yu Liang,Cheng Zhang,Ming-hui Ma,Dong-qiu Dai. World Journal of Gastroenterology. 2018(46)
[3]Noncoding RNAs in gastric cancer: Research progress and prospects[J]. Meng Zhang,Xiang Du. World Journal of Gastroenterology. 2016(29)
[4]Current and emerging therapies in unresectable and recurrent gastric cancer[J]. Erin Jou,Lakshmi Rajdev. World Journal of Gastroenterology. 2016(20)
[5]Role of epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer initiation and progression[J]. Zhao Peng,Chen-Xiao Wang,Er-Hu Fang,Guo-Bin Wang,Qiang Tong. World Journal of Gastroenterology. 2014(18)
本文编号：3020896
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：124 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
DLX6-AS1在TCGA数据库的胃癌组织中呈高表达且与预后相关
为进一步验证TCGA数据库中的高通量结果,我们通过qRT-PCR实验检测56组胃癌及对应癌旁非癌组织的DLX6-AS1表达水平。如图1.2A所示,DLX6-AS1在胃癌组织的表达水平显著高于癌旁组织,此结果也与TCGA数据库的高通量数据结果相一致。我们检测了DLX6-AS1在胃癌细胞系和胃正常粘膜上皮细胞中的表达水平以进一步阐释DLX6-AS1在胃癌中的功能及作用机制。将GES-1的表达水平作为标准组,胃癌细胞系中DLX6-AS1均呈过表达,且SGC-7901和AGS细胞系的表达水平最高(图1.2B)。3.3 DLX6-AS1的表达水平与临床病理资料的关系
为进一步证实DLX6-AS1在胃癌发生发展中的作用,我们通过转染siRNA-DLX6-AS1下调胃癌细胞系中DLX6-AS1的表达水平,并通过qRT-PCR实验进行验证。如图2.1所示,转染siRNA-DLX6-AS1后可有效下调DLX6-AS1在胃癌细胞系SGC-7901和AGS中的表达水平。由于si-DLX6-AS1#2和si-DLX6-AS1#3的转染效率最高,因此我们选择这两对序列进行后续的细胞功能实验和机制研究。CCK8实验可以检测细胞的增殖能力。如图2.2A所示,与对照组相比,敲除DLX6-AS1后SGC-7901和AGS细胞系的增殖能力明显下降。克隆形成实验也进一步证实,DLX6-AS1可促进胃癌细胞的增殖(图2.2B)。应用Transwell实验可进一步验证细胞的迁移和侵袭能力。如图2.2C所示,沉默DLX6-AS1后可显著抑制胃癌细胞的迁移和侵袭功能。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Long non-coding RNA HULC as a diagnostic and prognostic marker of pancreatic cancer[J]. Zheng-Lin Ou,Zhen Luo,Ye-Bin Lu. World Journal of Gastroenterology. 2019(46)
[2]Identification and prediction of novel non-coding and coding RNA-associated competing endogenous RNA networks in colorectal cancer[J]. Yu Liang,Cheng Zhang,Ming-hui Ma,Dong-qiu Dai. World Journal of Gastroenterology. 2018(46)
[3]Noncoding RNAs in gastric cancer: Research progress and prospects[J]. Meng Zhang,Xiang Du. World Journal of Gastroenterology. 2016(29)
[4]Current and emerging therapies in unresectable and recurrent gastric cancer[J]. Erin Jou,Lakshmi Rajdev. World Journal of Gastroenterology. 2016(20)
[5]Role of epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer initiation and progression[J]. Zhao Peng,Chen-Xiao Wang,Er-Hu Fang,Guo-Bin Wang,Qiang Tong. World Journal of Gastroenterology. 2014(18)
本文编号：3020896
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3020896.html
